Filtres à centrifuger Amicon Ultra-0,5 ml pour la purification et la concentration de protéines
With their vertical membrane design, Amicon Ultra 0.5 mL filters deliver great performance and lower spin times for protein purification.
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FAQ
| Question | Réponse |
|---|---|
| What is the recommended rotor for Amicon Ultra units? | Any rotor capable of accommodating 22.7 cm in diameter and 124 mm length centrifuge tubes for the Amicon Ultra-4 and 35 mm in diameter and 121 mm in length for the Amicon Ultra-15 can be used for Amicon Ultra units. |
| How should I select the appropriate Molecular Weight Cutoff (MWCO) for Amicon Ultra? | Select a Molecular Weight Cutoff that is 2x smaller that the Molecular Weight (MW) of the solute of interest. |
| Which membranes are available in Amicon Ultra units? | Amicon Ultra units are only available with Ultracel regenerated cellulose material. This high recovery/low binding membrane is offered in 3,000, 10,000, 30,000, 50,000 & 100,000 MWCO. |
| Can the Amicon Ultra be spun to dryness? | No, the Amicon Ultra has a built in deadstop. |
| What is the chemical compatibility of Amicon Ultra? | Amicon Ultra units are intended for use with biological fluids and aqueous solutions. Please refer to the user guide, catalogue, or contact Technical Support. |
| Do you have any centrifugal filter units that are pyrogen free? | We do not have any centrifugals devices that we claim are pyrogen free. Even the sterile devices could contain pyrogens. |
Produits & Applications associés
Produits associés classés par : Application Facete
| Protein Purification |
| Dialysis and Filtration |
Produits associés classés par : Brand Facete
| Ultracel® |
| Amicon® |
Catégories
| Life Science Research > Protein Sample Preparation > Protein Concentration & Dialysis > Sample Prep Centrifugal Filter Units |
- Capables de concentrer 500 µl en 15 µl
- Facteur de concentration compris entre 25x et 30x
- Taux de récupération élevé de l'échantillon (supérieur à 90 % d'une solution de départ diluée)
- Temps de traitement courts - 10 à 30 minutes
- La capacité de centrifugation en sens inverse permet des taux de récupération reproductibles
)
Applications
- Concentration d'échantillons biologiques contenant des antigènes, des anticorps, des enzymes, des acides nucléiques ou des micro-organismes
- Purification de composés macromoléculaires présents dans les extraits de culture tissulaire ou les lysats cellulaires
- Dessalage, échange de tampon et dialyse de protéines
- Exclusion par la taille et fractionnement d'échantillons de protéines
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Matériel fourni
Le dispositif Amicon Ultra-0,5 est fourni avec deux microtubes à centrifuger. Au cours de l'opération, l'un des tubes sert à collecter le filtrat et l'autre à récupérer l'échantillon concentré.
Performances – Concentration d'ADN
L'unité Amicon Ultra-0,5 offre le meilleur équilibre entre taux de récupération et temps de centrifugation pour l'ADN double brin d'une longueur comprise entre 137 et 1159 paires de bases. Pour atteindre une récupération d'un produit de PCR et une élimination des amorces maximales avec des amorces d'une taille supérieure à 20 bases, il est recommandé de procéder à une ou deux centrifugation(s) supplémentaire(s) avec du tampon Tris-EDTA (TE).
Performances – Concentration de protéines
)
Volume de concentrat typique/Facteurs de concentration en fonction du temps de centrifugation
| Volume de concentrat / Facteur de concentration | ||||||||||
| Unités de 3 kD | Unités de 10 kD | Unités de 30 kD | Unités de 50 kD | Unités de 100 kD | ||||||
| Temps de centrifugation (min) | Volume de conc. (µl) | Facteur de conc. (x) | Volume de conc. (µl) | Facteur de conc. (x) | Volume de conc. (µl) | Facteur de conc. (x) | Volume de conc. (µl) | Facteur de conc. (x) | Volume de conc. (µl) | Facteur de conc. (x) |
| 5 | 215 | 2 | 66 | 7 | 42 | 12 | 28 | 18 | 58 | 9 |
| 10 | 114 | 4 | 35 | 14 | 23 | 22 | 20 | 25 | 19 | 26 |
| 15 | 80 | 6 | 22 | 22 | 19 | 27 | 17 | 30 | 15 | 33 |
| 20 | 62 | 8 | 20 | 24 | 17 | 30 | 15 | 33 | 13 | 36 |
| 30 | 48 | 10 | 15 | 31 | 15 | 32 | 15 | 36 | 11 | 41 |
| Conditions de centrifugation : rotor à angle fixe à 40°, 14 000 x g, température ambiante, volume de départ 500 µl. Marqueurs protéiques utilisés : Cytochrome c pour 3 kD et 10 kD, BSA pour 30 kD et 50 kD et IgG pour 100 kD, n=12. | ||||||||||
Rétention typique des marqueurs protéiques
| Marqueur/Concentration | Poids moléculaire (daltons) | PMNL du dispositif | % de Rétention | Temps de centrifugation (min) |
| α-Chymotrypsinogène (1 mg/ml) | 25 000 | 3 kD | > 95 | 30 |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | > 95 | 30 | |
| Vitamine B12 (0,2 mg/ml) | 1 350 | < 42 | 30 | |
| α-Chymotrypsinogène (1 mg/ml) | 25 000 | 5 kD | > 95 | 15 |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | > 95 | 15 | |
| Vitamine B12 (0,2 mg/ml) | 1 350 | < 42 | 15 | |
| BSA (1 mg/ml) | 67 000 | 30 kD | > 95 | 10 |
| Ovalbumine (1 mg/ml) | 45 000 | > 95 | 10 | |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | < 35 | 10 | |
| BSA (1 mg/ml) | 67 000 | 50 kD | > 95 | 10 |
| Ovalbumine (1 mg/ml) | 45 000 | ~ 40 | 10 | |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | < 20 | 10 | |
| Thyroglobuline (0,5 mg/ml) | 677 000 | 100 kD | > 95 | 10 |
| IgG (1 mg/ml) | 156 000 | > 95 | 10 | |
| Ovalbumine (1 mg/ml) | 45 000 | < 30 | 10 | |
| Conditions de centrifugation : rotor à angle fixe à 40°, 14 000 x g, température ambiante, volume de départ 500 µl, n=12. | ||||
Récupération typique du concentrat
| Marqueur/Concentration | Poids moléculaire | PMNL du dispositif | Temps de centrifugation (min) | Volume de concentrat (µl) | Facteur de concentration (X) | Récupération du concentrat (%) |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | 3 kD | 30 | 48 | 10 | 98 |
| Cytochrome c (0,25 mg/ml) | 12 400 | 10 kD | 15 | 22 | 22 | 93 |
| BSA (1 mg/ml) | 67 000 | 30 kD | 10 | 23 | 22 | 97 |
| BSA (1 mg/ml) | 67 000 | 50 kD | 10 | 20 | 25 | 92 |
| IgG (1 mg/ml) | 156 000 | 100 kD | 10 | 19 | 26 | 92 |
| Conditions de centrifugation : rotor à angle fixe à 40°, 14 000 x g, température ambiante, volume de départ 500 µl, n=12. | ||||||
Dessalage ou diafiltration
Le dessalage et l'échange de tampon ou diafiltration constituent des méthodes importantes pour éliminer sels ou solvants des solutions contenant des biomolécules. L'élimination de sels ou l'échange de tampons peuvent être réalisés dans une unité Amicon Ultra-0,5 en concentrant l'échantillon, puis en reconstituant le concentrat avec le solvant de son choix pour retrouver le volume original d'échantillon. Le processus d'élimination par lavage peut être répété jusqu'à ce que la concentration du microsoluté contaminant ait été suffisamment réduite. Cf. l'exemple ci-dessous.
)
| Volumes | |
| Volume d'échantillon initial maximum, µl | 500 |
| Volume typique du concentrat final, µl | 15 – 20 |
| Force centrifuge relative recommandée | 14 000 x g pour la concentration 1 000 x g pour la centrifugation en sens inverse |
| Force centrifuge relative maximale | 15 000 x g |
| Surface de membrane active, cm2 | 1 cm² |
| Volume mort, µl | < 1 |
| Matériaux | |
| Dispositif de filtration | Copolymère styrène/butadiène |
| Membrane | Cellulose régénérée à faible adsorption Ultracel de Millipore |
| Tube collecteur | Polypropylène |
| Les membranes d'ultrafiltration des dispositifs Amicon Ultra-0,5 ml contiennent des traces des produits suivants : | Dispositifs Amicon Ultra de 3K, 10K, 30K, 50K et 100K : glycérine |
| Si ces produits interfèrent avec l'analyse, pré-rincer le dispositif avec du tampon ou de l'eau Milli-Q. Si l'interférence persiste, rincer avec du NaOH 0,1 N, suivi d'une seconde centrifugation avec du tampon ou de l'eau Milli-Q. | |
| Dimensions | |
| Unité de filtration, mm | Diamètre : 9,4 |
| Longueur : 29,6 | |
| Tube, mm | Diamètre : 10.8 mm |
| Longueur : 43,0 | |
| Unité de filtration et tube, mm | Longueur (mode concentration ; unité dans le tube) : 4.99 cm (1.96 in.) |
| Longueur (centrifugation en sens inverse; unité retournée dans le tube) : 37,3 | |
Compatibilité chimique des filtres Amicon Ultra
| Acides | Concentration | Acides | Concentration |
| Acide acétique | ≤ 50 %* | Acide phosphorique | ≤ 30 % |
| Acide formique | ≤ 5 %* | Acide sulfamique | ≤ 3 % |
| Acide chlorhydrique | ≤ 1,0 M | Acide sulfurique | ≤ 3 % |
| Acide lactique | ≤ 50 % | Acide trichloracétique (TCA) | ≤ 10 %* |
| Acide nitrique | ≤ 10 % | Acide trifluoroacétique (TFA) | ≤ 30 %* |
| Alcalins | Concentration | Alcalins | Concentration |
| Hydroxyde d'ammonium | ≤ 10 % | Hydroxyde de sodium | ≤ 0,5 M |
| Alcools | Concentration | Alcools | Concentration |
| n-Butanol | ≤ 70 % | Isopropanol | ≤ 70 % |
| Ethanol | ≤ 70 % | Méthanol | ≤ 60 % |
| Détergents | Concentration | Détergents | Concentration |
| Alconox®, détergent | ≤ 1 % | Nonidet™ P40, tensio-actif | ≤ 2% |
| CHAPS, détergent | ≤ 0,1 % | Terg-A-Zyme®, détergent | ≤ 1 % |
| Désoxycholate de sodium | ≤ 5 % | Triton® X-100, tensio-actif | ≤ 0,1 % |
| Dodécylsulfate de sodium (SDS) | ≤ 0,1 % | Tween® 20, tensio-actif | ≤ 0,1 % |
| Lubrol® PX, détergent | ≤ 0,1 % | ||
| Solvants organiques | Concentration | Solvants organiques | Concentration |
| Acétate d'éthyle | Non recommandé | Formaldéhyde | ≤ 5% |
| Acétone | Non recommandé | Pyridine | Non recommandé |
| Acétonitrile | ≤ 20 % | Tétrachlorure de carbone | Non recommandé |
| Benzène | Non recommandé | Tétrahydrofuranne | Non recommandé |
| Chloroforme | Non recommandé | Toluène | Non recommandé |
| Diméthylsulfoxyde (DMSO) | ≤ 5 %* | ||
| Divers | Concentration | Divers | Concentration |
| Carbonate de sodium | ≤ 20 % | Phénol | ≤ 1 % |
| Chlorure de guanidinium | ≤ 6 M | Polyéthylène glycol | ≤ 10 % |
| Diéthylpyrocarbonate | ≤ 0,2 % | Sulfate d'ammonium | Saturé |
| Dithiothréitol (DTT) | ≤ 0,1 M | Tampon phosphate (pH 8,2) | ≤ 1 M |
| Glycérine | ≤ 70 % | Tampon Tris (pH 8,2) | ≤ 1 M |
| Imidazole | ≤ 100 mM | Urée | ≤ 8 M |
| Mercaptoéthanol | ≤ 0,1 M | ||
| * Un contact avec ce produit chimique peut entraîner un relargage de substances extractibles en provenance des différentes composantes. Des blancs de solvant sont recommandés pour déterminer si les substances extractibles présentent des interférences potentielles avec l'essai. | |||