Électrophorèse sur gel d'acides nucléiques
L'électrophorèse sur gel d'acides nucléiques est une technique de biologie moléculaire permettant la séparation, l'identification et la purification de fragments d'ADN et d'ARN en fonction de leur taille et de leur charge. Dans cette technique, les molécules d'ADN et d'ARN sont séparées en appliquant un champ électrique qui fait migrer les acides nucléiques chargés négativement à travers une matrice de gel d'agarose ou de polyacrylamide.
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La matrice de gel agit comme un tamis, permettant aux molécules les plus courtes de se déplacer plus rapidement à travers les pores du gel que les molécules plus longues.
- Les gels d'agarose sont plus couramment utilisés pour l'électrophorèse de l'ADN et de l'ARN et permettent de séparer des fragments d'ADN allant de 50 paires de bases (50 pb) à 50 000 pb à l'aide de techniques d'électrophorèse standard.
- Les gels de polyacrylamide ont une plage de séparation plus restreinte et permettent de séparer des fragments d'ADN inférieurs à environ 500 pb avec une très haute résolution.
- Les gels d’agarose et de polyacrylamide peuvent également être utilisés dans les tests de déplacement de mobilité électrophorétique (EMSA) pour caractériser les interactions protéine-acide nucléique.
Après l’électrophorèse, les molécules d’ADN et d’ARN peuvent être visualisées à l’aide de colorants ou sous lumière UV, extraites et purifiées du gel, ou transférées pour un transfert sur membrane. Ces méthodes constituent des techniques préparatives courantes dans le clonage, la PCR, la spectrométrie de masse, le séquençage de nouvelle génération (NGS), ainsi que dans les applications et les flux de travail de Northern et Southern blot.
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