Méthode d'analyse de l'urée dans l'eau et les eaux usées par détermination enzymatique
Dosage photométrique par la méthode au bleu d'indophénol après clivage de l'urée
Instruments et réactifs :
(173016) Spectrophotomètre VIS Spectroquant® Prove 100 ou
(173017) Spectrophotomètre UV/VIS Spectroquant® Prove 300 ou
(173018) Spectrophotomètre UV/VIS Spectroquant® Prove 600 ou
(109751) Photomètre Spectroquant® NOVA 60
(114544) Test de l'ammonium en tube Spectroquant®
(106578) Phosphate trisodique dodécahydraté pour l'analyse
(106346) Dihydrogénophosphate de sodium monohydraté pour l'analyse
(108418) Titriplex® III pour l'analyse
(116754) Eau pour l'analyse
(116493) Uréase

Réactif 1 :
Dissoudre 1,5 g de phosphate trisodique dodécahydraté, 0,5 g de dihydrogénophosphate de sodium monohydraté
et 1,5 g de Titriplex® III dans 100 ml d'eau pour l'analyse.
Réactif 2 :
Uréase
Réaction :
L'uréase provoque la conversion de l'urée en ammonium ; l'ammonium peut alors être dosé par photométrie selon la méthode au bleu d'indophénol. Lorsque de l'ammonium est présent dans l'échantillon, la détermination cumulée de la concentration en ammonium+urée et la détermination de la concentration en ammonium peuvent être utilisées pour calculer la concentration en urée.
Plage de mesure :
0,5 - 25,0 mg/l d'urée à 690 nm dans un tube de 16 mm.
Analyse :
Dans 5,0 ml d'échantillon en solution, ajouter 2 gouttes de réactif 1 et 1 goutte de réactif 2 et mélanger, puis laisser reposer pendant 5 min. Prélever 0,50 ml de cette solution et procéder au dosage de l'ammonium avec le test de l'ammonium en tube Spectroquant®.
Liste des paramètres de programmation des photomètres Spectroquant® NOVA 60, Pharo 100 et Pharo 300
Liste des paramètres de programmation des photomètres Spectroquant® Prove 100, Prove 300 et Prove 600
Calcul lors de la mesure de la valeur d'absorbance avec les photomètres sans programmer la méthode dans la mémoire de l'instrument :
Distinction entre l'urée et l'ammonium :
A. Mesure de la concentration d'ammonium sans ajout des réactifs 1 et 2 : Valeur A mesurée en mg/l de NH4+ (avec la méthode du test de l'ammonium en tube Spectroquant®)
= Valeur A mesurée en mg/l de NH4
B. Mesure de la somme ammonium + urée après ajout des réactifs 1 et 2 : Valeur B mesurée en mg/l de NH4+ (avec la liste des paramètres de programmation des photomètres NOVA 60, Prove et Pharo
= Valeur B mesurée en mg/l d'urée
C. Calcul de la concentration d'urée :
Concentration d'urée en mg/l d'urée = B - (A × 1,66)
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