Cromatografía en capa fina
La cromatografía en capa fina (TLC) es un método basado en la afinidad que se utiliza para separar compuestos en una mezcla. La TLC es un método de separación muy versátil que se utiliza ampliamente para el análisis cualitativo y cuantitativo de muestras. La TLC se puede utilizar para analizar prácticamente cualquier clase de sustancia, incluidos pesticidas, esteroides, alcaloides, lípidos, nucleótidos, glucósidos, carbohidratos y ácidos grasos.
Cromatografía en capa fina.
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En la TLC, la fase estacionaria es una fina capa de material adsorbente, normalmente gel de sílice u óxido de aluminio, recubierta sobre una superficie de placa inerte, normalmente de vidrio, plástico o aluminio. La muestra se deposita en un extremo de la placa de TLC y se coloca verticalmente en una cámara cerrada con un disolvente orgánico (fase móvil). La fase móvil asciende por la placa mediante fuerzas capilares y los componentes de la muestra migran distancias variables en función de sus afinidades diferenciales por las fases estacionaria y móvil. Cuando el disolvente alcanza la parte superior de la placa, ésta se retira de la cámara de revelado y se seca. Los componentes separados aparecen como manchas en la placa y se evalúa el factor de retención (Rf) de cada componente.
TLC Process and Principles
La TLC se basa en el principio clásico de la cromatografía en el que los componentes de la mezcla se separan entre una fase estacionaria fija y una fase móvil líquida por afinidades diferenciales entre las dos fases.
Factor de Retención de TLC (Rf)
El factor de retención (Rf) se utiliza para medir el movimiento de los compuestos a lo largo de la placa de TLC. Rf se define como la distancia recorrida por un componente individual dividida por la distancia total recorrida por el disolvente. Su valor está siempre entre cero y uno.
| Rf = | distancia recorrida por componente |
| distance traveled by solvent |
En general, cuanto más fuerte se une un compuesto al adsorbente de fase estacionaria, más lentamente migra por la placa de TLC. Como los adsorbentes de TLC suelen ser polares, los compuestos no polares tienden a ascender más rápidamente por la placa, lo que da lugar a valores de Rf más altos, mientras que los compuestos polares tienden a moverse lentamente y tienen valores de Rf más bajos.
Aplicaciones de la TLC
La TLC es ampliamente utilizada por muchas industrias y campos de investigación, incluyendo el farmacéutico, pruebas clínicas, toxicología ambiental, análisis de alimentos, agua y pesticidas, y cosméticos. Las aplicaciones típicas de TLC incluyen:
- Análisis de residuos de fármacos y antibióticos en alimentos y muestras medioambientales
- Identificación y cuantificación de colores, ingredientes, conservantes y edulcorantes en alimentos y productos cosméticos
- Control de calidad y pruebas de pureza de formulaciones farmacéuticas
- Cribado rápido de alto rendimiento previo a la HPLC
- Examen de reacciones químicas para su finalización
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