Kits para el ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)
Un ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) es un inmunoensayo basado en placas de múltiples pocillos en el que uno de los componentes del ensayo, normalmente un anticuerpo o una muestra, se adsorbe sobre una superficie sólida, en este caso, una placa. Al ofrecer una detección rápida, cuantitativa y sensible de los analitos a un coste relativamente bajo, los ELISA constituyen uno de los formatos de ensayo más sencillos de realizar. Además, la facilidad para adaptar un ELISA a un método de cribado de mayor rendimiento permite a los investigadores analizar un gran número de muestras en una sola tanda.
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ELISA tipo sándwich, directo y competitivo
Nuestros ELISA constituyen un método práctico y fácil de usar para el estudio de biomarcadores proteicos solubles en diversas matrices, como suero, plasma, sobrenadante de cultivos celulares o lisados. Nuestra gama de ELISA incluye más de 1.000 ensayos «solo para uso en investigación», dirigidos a una amplia variedad de especies, entre las que se incluyen humanos, ratones, ratas y otros modelos animales (agrícolas y de compañía). Cada ensayo incluye un protocolo específico y los reactivos necesarios para realizar el análisis en una placa de 96 pocillos. Los ELISA se presentan principalmente en formato de 96 pocillos, y el proveedor facilita los reactivos necesarios para detectar y cuantificar la proteína diana. Existen diversos métodos de ELISA, entre los que se incluyen los de tipo sándwich, directo y competitivo.
El ensayo tipo sándwich utiliza un par de anticuerpos monoclonales (mAb) dirigidos contra diferentes epítopos de la misma molécula diana. El mAb primario, unido a la placa, captura la proteína de la solución, mientras que el segundo mAb se utiliza para completar el «sándwich» y proporcionar la señal que indicará la presencia de la molécula diana. El kit incluye una cantidad conocida de la versión recombinante de la proteína, lo que permite al usuario crear una curva de calibración con la que se interpretará la señal de una de las muestras. La mayor parte de nuestra gama de productos se presenta en este formato de ELISA tipo sándwich.
Los ensayos ELISA directos y competitivos son menos habituales. El ensayo directo utiliza un único anticuerpo monoclonal para detectar la muestra unida a la placa. A continuación, el anticuerpo monoclonal se une a un anticuerpo secundario reportero para proporcionar la señal.
En el ensayo competitivo, hay una cantidad conocida del biomarcador previamente unida a la placa. Se incuba conjuntamente un anticuerpo marcado con la muestra, el cual «absorbe» el anticuerpo en función de la concentración del biomarcador objetivo en la muestra. A continuación, el anticuerpo libre puede unirse al antígeno presente en la placa y proporcionar una señal tras el lavado de la muestra. En este caso, la señal es inversamente proporcional a la concentración del biomarcador objetivo.
ELISA de Conferma® y el software de ajuste de curvas de inmunoensayo Belysa®
La marca Conferma® ELISA se compone de ensayos tipo sándwich diseñados para minimizar la variabilidad entre lotes en lo que respecta a los reactivos críticos, una preocupación clave para los usuarios de los ensayos. La evaluación de los lotes individuales de reactivos críticos mediante diversas técnicas analíticas, en consonancia con un protocolo detallado de control de calidad (CC), nos permite controlar y limitar la variabilidad a lo largo del tiempo.
Con el fin de permitir a los científicos evaluar la reproducibilidad de su método, hemos diseñado además el software de ajuste de curvas para inmunoensayos Belysa®. Con esta herramienta, el usuario puede examinar su inmunoensayo tipo sándwich para asegurarse de que parámetros como el %CV (coeficiente de variación) y el % de recuperación sean los esperados. A continuación, puede pasar a comparar las curvas patrón de varias placas para confirmar que su método es consistente.
Recursos relacionados
- Article: ELISA Protocols
En este artículo se ofrecen 4 protocolos ELISA populares: Protocolo de ELISA en sándwich, procedimiento de análisis de fosforilación, procedimiento de análisis EIA y procedimiento de análisis en células aisladas.
- Article: ELISA Troubleshooting Guide
Troubleshoot and optimize ELISAs using this guide that includes solutions to some of the most common sources of problems for assay development.
- Brochure: ELISA Kits
There are several ELISA configurations, with the most common formats being sandwich, competitive and signaling assays.
- Article: Conferma® ELISAs
Learn about the Conferma® ELISA development and manufacturing methods that provide strong sample detection and long-term assay and lot consistency, giving you confidence in your research.
- Article: Belysa® Software
Explore how to effortlessly monitor immunoassay method reproducibility using Belysa® analysis software.
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