Enzimas para el análisis de fármacos

La mayoría de los fármacos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por el organismo humano y animal en moléculas hidrofílicas y, a continuación, se excretan rápidamente en los fluidos corporales, principalmente en la orina. Dichos fármacos y moléculas conjugados se unen principalmente a glucurónidos o sulfatos (glucurónidos y sulfatos). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GC-MS) y cromatografía líquida (LC-MS). La hidrólisis con beta-glucuronidasa y/o sulfatasa rompe los enlaces de conjugación y devuelve los fármacos, las hormonas y los xenobióticos a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente «visibles» y cuantificables mediante instrumentos de laboratorio para su detección o cuantificación.
Las enzimas beta-glucuronidasas llevan más de cinco décadas disponibles para los sectores de las ciencias de la vida y el diagnóstico, extraídas principalmente de las vísceras de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens) o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio hacia el uso de beta-glucuronidasas recombinantes en toxicología analítica y en los análisis rutinarios de drogas en orina. Gracias a la mejora de la calidad analítica, la facilidad en la preparación de muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzimas analíticas.
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Campos de aplicación de la beta-glucuronidasa y las sulfatasa como enzimas analíticas
Los análisis de drogas en orina (UDT) constituyen la principal aplicación rutinaria de la beta-glucuronidasa y las sulfatasa. Las enzimas utilizadas en los UDT se aplican a diferentes tipos de análisis:
- Análisis forenses de drogas (justicia penal)
- Pruebas antidopaje en humanos (deportes de competición)
- Controles antidopaje en animales (competiciones hípicas)
- Pruebas de detección de drogas en el ámbito laboral (nuevos empleados)
- Análisis de exposición a xenobióticos (exposición ambiental)
- Control de medicamentos recetados y terapéuticos (cumplimiento y ensayos complementarios)
HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Figura 1.Intervalos óptimos de pH para diversas enzimas glucuronidasas procedentes de fuentes habituales.
La hidrólisis eficaz y completa de los metabolitos glucurónidos y sulfatos es fundamental para los análisis de drogas en orina, especialmente cuando es necesario realizar una cuantificación. Una larga trayectoria de investigación académica ha permitido descubrir en la naturaleza numerosas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros más influyentes en relación con la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle en la selección de la enzima adecuada, consulte nuestra tabla de rangos óptimos de pH, que incluye una lista de los valores óptimos de pH para diversas enzimas glucuronidasas procedentes de fuentes comunes.
Nuestras plantas llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen bajo el sistema de calidad ISO 9001. Seguimos dedicando nuestros esfuerzos a hacer que la hidrólisis sea más rápida, más fácil de llevar a cabo y lista para su uso.
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