Enzimas para el análisis de fármacos

La mayoría de los fármacos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por el organismo humano y animal en moléculas hidrofílicas y, a continuación, se excretan rápidamente en los fluidos corporales, principalmente en la orina. Dichos fármacos y moléculas conjugados se conjugan principalmente con glucurónidos o sulfatos (glucurónidos y sulfatos). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GC-MS) y cromatografía de líquidos (LC-MS). La hidrólisis con beta-glucuronidasa y/o sulfatasa rompe los enlaces de conjugación y devuelve los fármacos, las hormonas y los xenobióticos a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente «visibles» y cuantificables mediante instrumentos de laboratorio para su detección o cuantificación.
Las enzimas beta-glucuronidasas llevan más de cinco décadas disponibles para los sectores de las ciencias de la vida y el diagnóstico, y se extraen principalmente de las vísceras de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens) o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio hacia el uso de beta-glucuronidasas recombinantes en la toxicología analítica y en los análisis rutinarios de drogas en orina. Gracias a la mejora de la calidad analítica, la facilidad en la preparación de muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzimas analíticas.
Products
Campos de aplicación de la beta-glucuronidasa y las sulfatasa como enzimas analíticas
El análisis de drogas en orina (UDT) es la principal aplicación rutinaria de la beta-glucuronidasa y las sulfatasa. Las enzimas utilizadas en el UDT se aplican a diferentes tipos de análisis:
- Análisis forenses de drogas (justicia penal)
- Pruebas antidopaje en humanos (deportes de competición)
- Controles antidopaje en animales (competiciones hípicas)
- Pruebas de detección de drogas en el ámbito laboral (nuevos empleados)
- Análisis de exposición a xenobióticos (exposición ambiental)
- Control de medicamentos recetados y terapéuticos (cumplimiento y ensayos complementarios)
HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Figura 1.Intervalos de pH óptimos para diversas enzimas glucuronidasas procedentes de fuentes habituales.
La hidrólisis eficaz y completa de los metabolitos glucurónidos y sulfatos es fundamental para los análisis de drogas en orina, especialmente cuando es necesario realizar una cuantificación. Una larga trayectoria de investigación académica ha permitido descubrir en la naturaleza numerosas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros más influyentes en relación con la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle en la selección de enzimas, consulte nuestra tabla de rangos de pH óptimos, que incluye una lista de los valores de pH óptimos para diversas enzimas glucuronidasas procedentes de fuentes comunes.
Nuestras plantas llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen bajo el sistema de calidad ISO 9001. Seguimos dedicando nuestros esfuerzos a hacer que la hidrólisis sea más rápida, más fácil de llevar a cabo y lista para su uso.
Recursos relacionados
- UHPLC/MS for Drug Detection in Urine
Optimize β-glucuronidase hydrolysis for glucuronide metabolite analysis considering factors like time, temperature, pH, and enzyme concentration.
- Evaluation of Different Enzymes on Hydrolysis Efficiencies of Glucuronide Drug Metabolites in Urine
β-glucuronidase (GUS) enzymes are utilized to hydrolyze glucuronide (gluc) drug metabolites to the parent drug, facilitating analysis by LC-MS/MS.
- Drug Conjugate Analysis using β-Glucuronidases
Drug conjugate analysis and the enzymatic hydrolysis of glucuronides
- Simple Urine Drug Screening with MS β-glucuronidase: Quick Start Guide and Demo Video
MS β-glucuronidase urinalysis workflow overview, features and benefits, and quick start guide video for your drug testing application needs.
- Analysis of Drugs of Abuse in Urine
Validate urine sample cleanup with HLB SPE for opioid analysis via LC-MS/MS using the Supel™ Swift HLB 96-well plate.
- Enzymatic Assay of β-Glucuronidase (EC 3.2.1.31) from E. coli
Objective: To standardize a procedure for the enzymatic assay of β-Glucuronidase.
- ß-Glucuronidase Enzymatic Assay
Enzymatic assay protocol for β-Glucuronidase from Helix Pomatia and Bovine Liver aids laboratory personnel in following procedures.
- Phase I Drug Metabolism
Phase I biotransformation reactions increase drug compound polarity, mainly occurring in hepatic circulation.