Procédures d'immunohistochimie diagnostique

Immunohistochimie diagnostique et pathologie clinique

L’immunohistochimie (IHC) fait partie des services de routine proposés par les laboratoires de pathologie générale, constituant ainsi un outil analytique et diagnostique pratique. Bien qu’une grande partie du diagnostic clinique repose encore largement sur la coloration tissulaire standard, comme l’hématoxyline et l’éosine (H&E), l’IHC aide les pathologistes de nombreuses façons à détecter les cas problématiques. L’immunocoloration diagnostique est régulièrement utilisée pour identifier des modifications cellulaires morphologiques ou développementales précoces et subtiles, telles que la prolifération ou l’apoptose. Les anticorps cliniques permettent d’identifier des lignées cellulaires individuelles en se liant à des protéines marqueurs spécifiques. Cette spécificité des anticorps peut toutefois entraîner des résultats faussement positifs ou faussement négatifs, car l’immunocoloration est sensible aux conditions de manipulation et de conservation des tissus, ainsi qu’à la qualité des réactifs. Les laboratoires de pathologie clinique minimisent les erreurs d’analyse en travaillant selon des protocoles et des programmes de formation établis, tout en utilisant des anticorps, des colorants et des réactifs diagnostiques validés cliniquement. En particulier, le développement d’anticorps monoclonaux hautement spécifiques dirigés contre des marqueurs cellulaires clés a conduit à l’utilisation de panels d’IHC diagnostiques dans la recherche et l’identification clinique des états pathologiques, ainsi que pour l’orientation en pathologie chirurgicale.

L’IHC diagnostique et les cancers

La plupart des cancers peuvent être identifiés grâce à une combinaison de coloration histologique et d’immunohistochimie diagnostique, en localisant des antigènes spécifiques dans les tissus biopsiés. Déterminer le type exact d’une tumeur à l’aide d’une coloration H&E standard sur des tissus fixés au formol peut s’avérer difficile, en particulier dans le cas de tumeurs métastatiques et/ou peu différenciées. L’IHC offre une méthode relativement rapide et simple pour mieux déterminer l’origine du tissu néoplasique et étudier le comportement ou la progression d’un néoplasme donné. Le cancer de siège primaire inconnu (CUP) est une pathologie dans laquelle on observe des métastases cancéreuses, mais dont le siège primaire reste inconnu. On estime que 3 à 5 % de tous les cas de cancer relèvent du CUP. Pour les CUP critiques et autres cas atypiques où il existe une divergence entre les données morphologiques et cliniques, l’IHC s’avère essentielle pour réduire l’éventail des alternatives diagnostiques. Dans certains cas, elle apporte des informations significatives pour établir un diagnostic provisoire concernant le phénotype du cancer et la localisation de la tumeur primaire. En immunohistochimie, l’immunomarquage s’avère être un outil diagnostique pratique pour détecter de nombreux types de cancer, notamment les adénocarcinomes (du côlon, du sein, de la prostate) et les cancers de la peau. Il est souvent utilisé dans le diagnostic du cancer du côlon (HNPCC/syndrome de Lynch) pour compléter les méthodes de détection classiques telles que l’instabilité des microsatellites (MSI), qui se caractérise par de nombreuses altérations d’un type d’ADN répétitif. En pathologie du cancer de la peau, l’identification des mélanocytes intra-épidermiques sur des coupes standard colorées à l’H&E n’est pas fiable, en particulier sur une peau endommagée par le soleil. Même un examen minutieux peut ne pas permettre de différencier clairement les kératinocytes pigmentés des mélanocytes ni de délimiter distinctement la densité mélanocytaire. Ainsi, de nombreux pathologistes recommandent l’IHC pour différencier le mélanome in situ de ses imitations.

Immunohistochimie diagnostique et agents infectieux

L’immunohistochimie diagnostique permet actuellement un diagnostic différentiel morphologique rapide des infections dans les échantillons tissulaires prélevés sur les patients, facilitant ainsi la prise de décisions diagnostiques rapides dans la prise en charge des patients. Des anticorps marqués à l’isothiocyanate de fluorescéine (FITC) ont été utilisés pour détecter des antigènes pneumococciques dans des tissus infectés. Dans le cadre de la détection des maladies infectieuses, l’IHC s’est révélée très utile pour identifier des micro-organismes qui sont :

• difficiles à détecter par des colorations de routine ou spéciales
• se colorent mal
• présents en faible nombre
• non cultivables

Certaines méthodes de diagnostic par IHC sont utilisées dans les cas d’hépatite B, d’hépatite C et d’infections à cytomégalovirus afin de confirmer la présence d’agents infectieux dans les tissus à l’aide d’anticorps spécifiques dirigés contre l’ADN ou l’ARN microbien. De plus, l’IHC est utilisée dans la détection de plusieurs infections cutanées pour identifier des infections virales et bactériennes spécifiques difficiles à détecter avec certitude à l’aide des seaux de microscopie de routine seules. Le test d’immunofluorescence (IFA) est largement utilisé pour la détection d’agents pathogènes (viraux, bactériens ou protozoaires) dans des tissus non fixés, tant en médecine humaine qu’en médecine vétérinaire.