Milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM)
Le milieu Eagle modifié de Dulbecco (DMEM) est l’un des milieux les plus polyvalents pour de nombreux phénotypes de cellules adhérentes parmi les milieux définis destinés à la culture cellulaire et tissulaire. Cela inclut les cellules de mammifères, les cellules d’insectes et les cellules végétales. Le milieu d’Eagle original a été mis au point dans les années 1950 et était destiné à la culture de cellules de poulet. Cependant, la version modifiée par Dulbecco est une formulation améliorée qui multiplie par quatre la teneur en certains acides aminés et vitamines par rapport au milieu d’Eagle original.
En culture cellulaire, le DMEM est utilisé comme milieu pour favoriser la croissance de différents types de cellules, notamment les cellules primaires, les cellules souches et les cellules transformées. La version modifiée du DMEM peut également être utilisée pour diverses applications de recherche telles que la découverte de médicaments, l’ingénierie tissulaire et l’étude des voies de signalisation cellulaire.
Le DMEM n’est pas un milieu complet en soi, car il ne contient pas les nutriments nécessaires tels que les protéines, les lipides ou les facteurs de croissance. Il doit donc être complété par d’autres composants, tels que le sérum fœtal bovin (FBS), des acides aminés et d’autres nutriments, afin d’offrir un environnement de croissance complet et équilibré aux cellules en culture.
Notre gamme comprend différentes concentrations en glucose, ainsi que des formulations avec ou sans L-glutamine. Des produits ne contenant pas de phénol rouge (indicateur de pH) sont disponibles pour les applications sensibles aux œstrogènes, et notre offre complète comprend des formats liquides pratiques et prêts à l’emploi, ainsi que des milieux en poudre économiques, facilitant le stockage et offrant une durée de conservation plus longue.
Products
DMEM – forte teneur en glucose vs faible teneur en glucose
Le DMEM est disponible sous différentes formulations, en fonction des besoins spécifiques des cellules mises en culture et des objectifs des travaux expérimentaux. Le milieu initial a été formulé avec une faible teneur en glucose (1 g/L), adaptée à la culture de cellules sensibles à une concentration élevée de glucose et qui risquent de ne pas se développer correctement dans des milieux présentant des taux élevés de ce sucre. En revanche, le DMEM à forte teneur en glucose contient 4,5 g/L de glucose et est généralement utilisé pour la culture de cellules nécessitant des taux élevés de glucose pour une croissance optimale.
Milieux sans sérum (SFM)
Le sérum est un composant de nombreux milieux de culture cellulaire et est souvent utilisé pour enrichir ces milieux en hormones, facteurs de croissance et autres nutriments nécessaires à la croissance et à la prolifération cellulaires. Cependant, le sérum peut contenir des impuretés et des contaminants susceptibles d’interférer avec les résultats expérimentaux, et son utilisation peut soulever des questions d’ordre éthique.
Les milieux sans sérum sont formulés sans sérum animal ni autres composants d’origine animale. Ces milieux se composent de formulations nutritionnelles et hormonales adaptées qui favorisent la croissance et la prolifération des cellules en culture.
L’utilisation de milieux sans sérum pour la culture cellulaire présente plusieurs avantages, notamment une productivité accrue, une plus grande homogénéité, ainsi qu’une purification et un traitement en aval plus faciles. Les milieux sans sérum peuvent également être formulés avec des combinaisons spécifiques de facteurs de croissance adaptées à certains types de cellules et à des objectifs de recherche particuliers. Ces milieux conviennent à un large éventail d’applications de culture cellulaire, notamment la production de protéines recombinantes, l’étude de la croissance et de la différenciation cellulaires, l’analyse des voies de signalisation cellulaires, la production de vaccins viraux, ainsi que la découverte et le développement de médicaments.
L’un de ces milieux sans sérum est le DMEM associé au Ham’s F-12, utilisé pour la culture de cellules mammifères, notamment les cellules MDCK, les cellules gliales, les fibroblastes, les cellules endothéliales humaines et les fibroblastes de rat. Le DMEM contient des concentrations élevées d’acides aminés, de glucose et de vitamines, tandis que le Ham’s F-12 apporte du zinc, de la putrescine, de l’hypoxanthine et de la thymidine. Des tampons tels que le FBS et l’HEPES peuvent être ajoutés pour compenser la perte de capacité tampon.
DMEM avec et sans rouge de phénol
Le rouge de phénol est un indicateur de pH qui change de couleur en fonction du pH et qui est généralement ajouté au DMEM à une concentration comprise entre 0,01 et 0,03 %. Il est utile pour surveiller le pH du milieu et s'assurer qu'il reste dans la fourchette appropriée pour la croissance et le métabolisme cellulaires.
Certaines cellules peuvent être sensibles au rouge de phénol ou être affectées par sa présence dans le milieu ; c’est pourquoi il existe également du DMEM sans rouge de phénol. Pour certaines applications en aval, telles que l’analyse des protéines ou l’analyse de l’expression génique, la présence de rouge de phénol dans le milieu pourrait constituer une source d’interférence. Pour certaines techniques d’imagerie, comme la microscopie à fluorescence, l’utilisation de DMEM sans rouge de phénol peut également s’avérer nécessaire afin d’obtenir des résultats précis. Le rouge de phénol absorbe la lumière dans le spectre visible et peut donc nuire à la précision de ces techniques. Le choix entre un DMEM avec ou sans rouge de phénol dépend des besoins et des exigences spécifiques des cellules cultivées, ainsi que des objectifs des travaux expérimentaux.