Test de ligature par proximité Duolink®
Les tests de ligature par proximité (PLA) Duolink® permettent d'étudier les interactions protéine-protéine (IPP) endogènes et les modifications post-traductionnelles, en fournissant un signal fluorescent pour chaque événement, qui peut être visualisé soit par microscopie, soit par cytométrie en flux. Pour étudier les interactions protéine-protéine, la technologie Duolink® PLA utilise une paire d’anticorps marqués par des oligonucléotides qui, lorsqu’ils se trouvent à moins de 40 nm l’un de l’autre, déclenchent une amplification en cercle roulant afin de générer un signal fluorescent spécifique après l’ajout de sondes marquées.
Disponible en quatre couleurs différentes, tant pour la cytométrie en flux que pour la microscopie, Duolink® PLA permet de visualiser plusieurs interactions protéine-protéine par cellule. Découvrez les nouvelles perspectives pour vos recherches grâce aux performances accrues et aux avantages de la technologie Duolink® PLA :
- Visualisez les interactions protéiques, qu’elles soient stables ou transitoires
- Visualisez les modifications post-traductionnelles
- Détectez les protéines endogènes – sans surexpression ni manipulation génétique
- Haute spécificité – l’utilisation de deux anticorps/sondes élimine les faux positifs
- Aucun équipement spécifique requis – méthodes standard d’immunofluorescence et de cytométrie en flux disponibles
Products
Produits Duolink® PLA
- Les kits de démarrage Duolink® PLA contiennent tous les réactifs nécessaires pour réaliser une expérience de fluorescence et analyser jusqu’à 30 échantillons.
- Les kits Duolink® Probemaker permettent la conjugaison d'un oligo PLA (PLUS ou MINUS) à n'importe quel anticorps.
- Les kits Duolink® PLA Multicolor permettent la visualisation de multiples interactions protéine-protéine (PPI) par microscopie.
- Les kits de détection Duolink® flowPLA permettent des applications de cytométrie en flux utilisant quatre couleurs : vert, orange, rouge et rouge lointain.
- Le kit de détection Duolink® PLA en champ clair contient des oligonucléotides marqués à la peroxydase de raifort (HRP), ce qui permet une utilisation avec un microscope optique.
Ressources connexes
- Note d'application : Introduction au PLA Duolink®
La technologie de détection des protéines Duolink® PLA repose sur le test de ligature de proximité in situ (PLA) et permet, en quelques heures seulement, de détecter, de visualiser et de quantifier l'expression des protéines, les interactions protéine-protéine et les modifications post-traductionnelles dans des cellules et des échantillons de tissus non modifiés.
- Protocole de création de sondes PLA®
Duolink® kits use in situ PLA® technology for accurate quantification of individual proteins, interactions, and modifications in cells and tissue.
- Article : Kits multicolores Duolink® Proximity Ligation Assay (PLA) pour une détection multiplex sensible
La technologie Duolink® PLA Multicolor et la quantification des interactions protéine-protéine dans les tissus et les cellules fixés.
- Article : Kits de cytométrie en flux Duolink® PLA
Le kit Duolink® PLA améliore la cytométrie en flux pour détecter avec précision les interactions protéiques.
- Protocole de visualisation en champ clair Duolink® PLA
Ce protocole décrit l'utilisation des réactifs Duolink® PLA pour la détection en champ clair, la visualisation et la quantification de protéines individuelles, de modifications protéiques et d'interactions protéiques dans des échantillons tissulaires et cellulaires.
- Protocole de fluorescence Duolink® PLA
Ce protocole décrit l'utilisation des réactifs Duolink® PLA pour la détection par immunofluorescence, la visualisation et la quantification de protéines individuelles, de modifications protéiques et d'interactions protéiques dans des échantillons tissulaires et cellulaires.
- Note d'application : Comment optimiser le test de ligature par proximité Duolink®
Pour mener à bien une expérience Duolink® PLA, il convient de prendre en compte certains éléments afin de préparer, de mettre en place et d'exécuter correctement le protocole d'analyse.
- Brochure : Test de ligature de proximité (PLA) Duolink® à détection amplifiée
Faites confiance à Duolink® PLA pour amplifier les signaux protéiques par 1 000, ce qui vous permettra de détecter visuellement les protéines et leurs interactions, le tout grâce à un protocole simple.
- Note d'application : Guide d'utilisation du Probemaker Duolink® PLA
Ce guide décrit l'utilisation du Duolink® In Situ Probemaker pour la conjugaison d'oligonucléotides PLA (PLUS ou MINUS) à n'importe quel anticorps, en vue de leur utilisation dans des expériences Duolink® PLA.
- Brochure : Cytométrie en flux Duolink®
La cytométrie en flux traditionnelle présentait jusqu'à présent des limites quant à sa capacité à détecter les interactions protéiques et les événements impliquant des protéines peu abondantes — jusqu'à présent.
