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Oligonucléotides iScale Oligos™ personnalisés pour l'ADN et les siRNA

POURQUOI LES OLIGOS ÉVOLUTIFS SONT-ILS UTILES ?

Les oligonucléotides évolutifs sont essentiels car ils permettent une production flexible en quantités variables afin de répondre à des besoins spécifiques, qu'ils soient de nature scientifique ou commerciale. Cette évolutivité garantit une utilisation efficace des ressources, un bon rapport coût-efficacité et une adaptabilité aux exigences des projets. Qu'il s'agisse d'expériences à petite échelle ou d'applications commerciales à grande échelle, les oligonucléotides évolutifs offrent la polyvalence et la commodité nécessaires à la rationalisation des flux de travail et à l'optimisation des résultats dans le domaine de la recherche et de la génomique appliquée.

Les oligonucléotides d'ADN et les siRNA d'iScale permettent une production évolutive, allant de quelques milligrammes à plusieurs grammes, d'oligonucléotides d'ADN et de siRNA sur mesure. Cette capacité de fabrication évolutive répond aux besoins spécifiques des applications commerciales, garantissant une production efficace et rentable d'oligonucléotides de haute qualité destinés à la recherche, au diagnostic, aux tests développés en laboratoire (LDT) et au développement thérapeutique.

Oligonucléotides d'ADN sur mesure à production évolutive

Forts de plus de 35 ans d’expertise dans la fabrication d’oligonucléotides, nous sommes l’un des principaux fournisseurs mondiaux d’oligonucléotides sur mesure à échelle modulable. Les quantités de l’ordre du milligramme et du gramme d’oligonucléotides d’ADN sur mesure sont destinées à des projets in vivo, à haut débit et commerciaux (outils de recherche en sciences de la vie, diagnostics moléculaires et tests développés en laboratoire). Les oligonucléotides sur mesure iScale sont validés par lots sous un contrôle rigoureux du système de gestion de la qualité (QMS) afin de répondre aux besoins spécifiques des clients.



Avantages des oligonucléotides d'ADN sur mesure

  • Des quantités d'oligonucléotides adaptées à vos besoins expérimentaux et commerciaux, avec une évolutivité de production rapide et efficace à l'échelle mondiale
  • Consultation directe avec notre équipe scientifique pour définir les spécifications adaptées à votre application
  • Un laboratoire d'analyse à la pointe de la technologie, garantissant un produit de haute qualité soumis à des contrôles rigoureux

Spécifications des oligonucléotides personnalisés évolutifs

Les oligonucléotides iScale sont disponibles dans une large gamme de longueurs de séquence, de quantités, de niveaux de purification et de formats. Pour tout élément marqué « Sur demande » ci-dessous ou si vous avez des besoins spécifiques en matière d’oligonucléotides qui diffèrent des spécifications générales présentées, veuillez envoyer une demande à dnaoligos@milliporesigma.com.

Applications utiles des oligonucléotides personnalisés à production évolutive

  • Antisens
  • Études de liaison
  • PCR/qPCR à haut débit
  • Séquençage Sanger et NGS (sans adaptateurs)
  • Détermination de la structure par cristallographie aux rayons X
  • Essais d'immunostimulation
  • Production de puces à ADN

Fabrication d'oligonucléotides sur mesure Assurance qualité

Nos processus de fabrication d’oligonucléotides s’appuient sur un système de gestion de la qualité (SGQ) robuste qui garantit la conformité à nos certifications de qualité suivantes :

  • ISO 9001:2015 pour la fabrication d’oligonucléotides de qualité recherche
  • ISO 13485:2016 pour la fabrication d'oligonucléotides de qualité diagnostique
  • ISO 14001:2015 pour une gestion environnementale efficace

Cette culture de la qualité est intégrée à tous les aspects de notre activité de fabrication d’oligonucléotides sur mesure. Les éléments clés de notre SMQ comprennent :

  • Certificats d’analyse
  • Contrôle des documents
  • Notification des changements
  • Gestion des fournisseurs
  • Accords commerciaux
  • Actions correctives et préventives

Chaque élément contribue à l'assurance qualité et, à des fins de vérification, nous organisons régulièrement des audits rigoureux menés par des organismes de certification, des audits internes et des audits clients.


Capacités en matière d'oligonucléotides commerciaux et conformes aux normes cGMP

Dans le cadre de notre offre d’oligonucléotides commerciaux, nos oligonucléotides cGMP sur mesure se distinguent par leur homogénéité et leur qualité irréprochable. Que vous souhaitiez commercialiser ou développer un test basé sur la qPCR, l’amplification isotherme, le NGS ou toute autre technologie, nos produits offrent un équilibre parfait entre diversité et profondeur.

ARN interférent de petite taille (siRNA) à production évolutive

Notre expertise mondiale en matière de fabrication nous permet de produire des quantités, de l’ordre du milligramme au gramme, d’ARN interférent (siRNA) MISSION® de qualité in vivo, idéal pour une recherche de pointe sur l’ARNi chez l’animal. De plus, nous produisons d’autres types d’ARN, tels que les miARN et l’ARN simple brin, tous disponibles à des échelles adaptables afin de répondre avec excellence aux divers besoins de la recherche.


Avantages des produits siRNA

  • Convient aux applications in vivo, notamment la validation de cibles et les essais précliniques
  • Disponibles sous forme de siRNA prédéfinis MISSION ou selon vos séquences de siRNA personnalisées
  • Convient à l'administration directe ou comme composant essentiel de votre stratégie de formulation

Spécifications des siRNA iScale Oligos

Les siRNA personnalisés et modulables sont disponibles dans une gamme de quantités, de degrés de purification et de formats variés, en fonction de vos besoins de fabrication. Pour tout élément marqué « Sur demande » ci-dessous ou si vos besoins diffèrent des autres spécifications générales présentées, veuillez envoyer une demande à sirnarequest@milliporesigma.com.

*Selon le site de fabrication, la technique PAGE peut être utilisée pour évaluer les duplex d'ARNsi.

Utilisation avérée de siRNA de précision in vivo

Nous nous sommes associés à Bioo Scientific (aujourd’hui PerkinElmer) pour valider la qualité de nos siRNA MISSION in vivo (voir l’article paru dans Drug Discovery & Development du 1er août 2008).

Au cours de ces expériences, des cellules H1155luc ont été injectées à des souris NOD/SCID. Des tumeurs se sont formées et ont reçu une injection d’ARNsi spécifique de la luciférase ou d’ARNsi de qualité in vivo non ciblé, formulé dans le MaxSuppressor™ in vivo RNA-LANCEr II. Au bout de 24 heures, une solution de D-luciférine a été injectée, puis les animaux ont été imagés à l’aide de l’instrument NightOWL II LB 983 de Berthold Technologies. Les animaux traités par l’ARNsi spécifique de la luciférase ont présenté une réduction significative de l’activité de la luciférase, tandis que les animaux traités par l’ARNsi non ciblant ont présenté une luminescence positive (figure 1). Ces données démontrent l’efficacité de l’ARNsi de qualité in vivo formulé dans l’agent d’administration in vivo MaxSuppressor™ in vivo RNA-LANCEr II.

Photographies d'animaux traités par un ARNsi spécifique de la luciférase, émettant une lumière fluorescente, et d'animaux témoins traités par un ARNsi non ciblé, ne produisant pas de lumière, illustrant l'efficacité d'un ARNsi de qualité « in vivo » dans l'expression de la luciférase

Figure 1.À gauche, un animal traité par un ARNsi spécifique de la luciférase ; à droite, un animal traité par un ARNsi non ciblé

72 heures après l'injection, les tumeurs ont été prélevées, puis la protéine a été extraite et normalisée à l'aide d'un test de Bradford. Les concentrations de luciférase ont été dosées à l'aide d'un test ELISA spécifique à la luciférase. La réduction de la protéine est exprimée par rapport à un animal traité par un agent ARNi non ciblé. L'activité de la luciférase a été divisée par deux dans les tumeurs (figure 2).

Diagramme à barres illustrant le pourcentage d'expression de la protéine luciférase dans les tumeurs de trois souris traitées par un ARNsi spécifique de la luciférase et d'une souris traitée par un ARNsi non ciblant. L'activité de la luciférase a été divisée par deux dans les tumeurs.

Figure 2.Pourcentage d'expression de la protéine luciférase chez les animaux traités par un ARNsi spécifique de la luciférase et chez les témoins, mesuré par ELISA. Chaque réplicat correspond à une souris différente.

Si vous avez besoin d'une aide supplémentaire, veuillez contacter notre service d'assistance technique à l'adresse oligotechserv@milliporesigma.com. 

MISSION est une marque déposée de Merck KGaA, Darmstadt, Allemagne, et/ou de ses filiales. Licence d'utilisation de la marque.

Références

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Brahmamdam P, Watanabe E, Unsinger J, Chang KC, Schierding W, Hoekzema AS, Zhou TT, McDonough JS, Holemon H, Heidel JD, et al. 2009. TARGETED DELIVERY OF siRNA TO CELL DEATH PROTEINS IN SEPSIS. 32(2):131-139. https://doi.org/10.1097/shk.0b013e318194bcee
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Fitamant J, Guenebeaud C, Coissieux M, Guix C, Treilleux I, Scoazec J, Bachelot T, Bernet A, Mehlen P. 2008. Netrin-1 expression confers a selective advantage for tumor cell survival in metastatic breast cancer. Proceedings of the National Academy of Sciences. 105(12):4850-4855. https://doi.org/10.1073/pnas.0709810105
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