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Purification FLAG®

Gros plan sur un laboratoire. L'attention est principalement attirée par une pipette bleue qui dépose une goutte dans un petit récipient en verre partiellement rempli d'un liquide de couleur rose. L'arrière-plan, bien que flou, laisse entrevoir la présence de divers autres instruments ou récipients de laboratoire.

Les marqueurs FLAG® permettent une détection optimale et une purification fiable des protéines de fusion recombinantes ; leur utilité a été démontrée dans de nombreuses applications en aval, allant des tests de liaison et d’activité à l’analyse structurale. Le marqueur épitopique FLAG® est un peptide court et hydrophile composé de huit acides aminés (marqueur DYKDDDDK) qui se clive facilement sous l’action de l’entérokinase (EK). En raison de sa petite taille et de sa nature hydrophile, le tag FLAG® se trouve généralement à la surface de la protéine de fusion, ce qui minimise les effets sur la fonction, la sécrétion ou le transport de cette dernière. Quelle que soit votre application finale, nous disposons des outils nécessaires pour exprimer, purifier et détecter les protéines de fusion FLAG®. 

Products

Représentation graphique composée d'un motif de cercles et de lignes violets interconnectés sur fond jaune. Ce motif rappelle une structure moléculaire simplifiée ou un schéma de réseau, évoquant les thèmes de l'interconnectivité ou des relations.

Expression de protéines marquées par le tag FLAG®

Notre gamme de produits dédiée à l’expression des protéines marquées par le tag FLAG® comprend des vecteurs permettant l’expression efficace de protéines de fusion recombinantes dans des systèmes bactériens et mammifères. La technologie de vecteurs SnapFast™ vous permet de transférer facilement le gène d’intérêt d’un vecteur à un autre, pour un clonage plus efficace et plus économique.

  • Le peptide FLAG® standard (séquence : DYKDDDDK) est une petite étiquette qui peut être incorporée avec un risque minimal d’encombrement stérique ou d’impact négatif sur la solubilité de la protéine
  • La séquence de l'étiquette 3xFLAG® fusionne trois épitopes FLAG® en tandem pour une détection améliorée (jusqu’à 200 fois supérieure) des protéines de fusion
un fond jaune vif sur lequel est centré un carré violet aux coins arrondis. À l'intérieur du carré se trouve un motif symétrique composé de trois flèches horizontales : une en haut pointant vers la gauche et vers la droite, une au milieu pointant vers les deux côtés à partir du centre, et une en bas qui est le reflet de la flèche du haut. Une ligne verticale relie la flèche du haut à celle du bas en passant par leurs points de symétrie. Des formes géométriques — des cercles et des losanges — sont dispersées autour de ces flèches.

Purification des protéines
marquées FLAG®

Nous proposons une gamme variée de gels de purification par affinité à l'agarose, de billes magnétiques, de kits de purification et de plaques enduites pour l'isolement et la purification des protéines marquées par le tag FLAG®.

  • Les gels d'affinité à l'agarose permettent la purification de protéines marquées par fusion à l'aide d'anticorps anti-FLAG® réticulés à de l'agarose sous forme de billes. Adaptés à la purification à petite comme à grande échelle, ces gels conviennent à la purification par colonne à écoulement par gravité.
  • Les billes magnétiques anti-FLAG® M2 sont utilisées pour purifier des protéines recombinantes marquées par fusion à l'aide d'un support ou d'une plateforme magnétique permettant de séparer les billes et d'isoler la protéine en vue d'un traitement rapide.
  • Les plaques à 96 puits enduites d’Anti-FLAG® haute sensibilité M2 conviennent au criblage d’expression, à l’étude des interactions protéine-protéine et aux tests ELISA.
un dessin au trait violet sur fond jaune, ressemblant à une représentation abstraite de la lettre « K ». Le motif est simple, avec des lignes épurées, sans ornements ni textures supplémentaires.

Détection des
marqueurs FLAG®

Les marqueurs FLAG® et 3xFLAG™ comportent des sites de liaison pour des anticorps monoclonaux anti-FLAG® hautement spécifiques, ainsi que pour des anticorps polyclonaux et des conjugués destinés aux applications ELISA, de transfert, d’immunofluorescence, d’immunocytochimie, d’immunohistochimie (IHC), de transfert et de cytométrie en flux.

  • L'anticorps anti-FLAG® M2 se lie aux protéines de fusion FLAG® N-terminale, FLAG® C-terminale et Met-FLAG®.
  • La liaison de l’anticorps anti-FLAG® M1 est dépendante du calcium et spécifique de l’extrémité N-terminale du tag FLAG®.
  • L'anticorps anti-FLAG® M5 se lie aux protéines de fusion FLAG® N-terminales et Met-FLAG®.

Ressources connexes

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  • Guide d'utilisation : FLAG - Système éprouvé de détection et de purification des protéines

    Le système d'expression FLAG est une méthode éprouvée permettant d'exprimer, de purifier et de détecter des protéines de fusion recombinantes. Les marqueurs FLAG et 3×FLAG® ont démontré leur utilité dans de nombreuses applications telles que le Western blot, l'immunocytochimie, l'immunoprécipitation, la cytométrie en flux, la purification des protéines, ainsi que dans l'étude des interactions protéine-protéine, de l'ultrastructure cellulaire et de la localisation des protéines. Ces petits marqueurs hydrophiles facilitent la détection et la purification optimales des protéines de fusion recombinantes lorsqu'ils sont utilisés avec nos anticorps ANTI-FLAG® hautement spécifiques et sensibles.

  • Note d'application : Gels d'affinité EZview™ Red Protein A et ANTI-FLAG® M2 - Immunoprécipitation à l'aide de billes d'affinité à visibilité améliorée

    La force et la spécificité des interactions entre biomolécules sont exploitées depuis des années dans la recherche biochimique. Les techniques de purification des protéines par affinité sont largement utilisées pour isoler et purifier des protéines spécifiques ou des classes de protéines à partir de mélanges biochimiques complexes, tels que les lysats cellulaires.

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