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Medio Eagle modificado de Dulbecco con F12 (DMEM F12)

Cuatro frascos de medio DMEM-F12, que contienen un líquido de color naranja.

En los últimos años, los investigadores han descrito el cultivo de diversas líneas celulares en medios sin suero que contienen un suplemento de nutrientes, factores de crecimiento y hormonas en sustitución del suero. Mather y Sato (BBRC, 1985) describieron el cultivo satisfactorio de células de Leydig y de Sertoli en un medio sin suero que contenía insulina, transferrina, factor de crecimiento epidérmico, hormona luteinizante u hormona folículoestimulante, somatomedina y hormona del crecimiento. 

Aunque las hormonas y sus concentraciones son específicas para el tipo de célula objeto de estudio, el medio que resultó óptimo para estos estudios fue una mezcla 1:1 de medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) y mezcla nutritiva F-12 de Ham. Esta mezcla, conocida como medio DMEM/F12, contiene 21 aminoácidos, 10 vitaminas, glucosa, hierro y zinc, entre otros componentes. 

El DMEM/F12 es un medio más rico y complejo que el DMEM. También se puede incluir en la formulación un tampón HEPES a una concentración final de 15 mM para compensar la pérdida de capacidad tampón que se produce al eliminar el suero. Este medio sintético no contiene suero, proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que puede requerir la adición de suero fetal bovino (FBS) dependiendo del tipo de cultivo celular. Algunas formulaciones comerciales pueden incluir o no glutamina o rojo de fenol.

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Aplicaciones del DMEM/F12

El medio basal avanzado DMEM/F12 se utiliza a menudo en aplicaciones que requieren medios con bajo contenido en suero o sin suero, como el cultivo de organoides en 3D o el cultivo de células madre. Los medios DMEM/F12 también pueden utilizarse para ayudar a optimizar las transfecciones celulares que requieren condiciones de bajo contenido en suero o sin suero.

Además del cultivo de células madre, que a menudo requiere un entorno con bajo contenido en suero o sin suero, las células primarias pueden cultivarse en medios DMEM/F12. Esto incluye fibroblastos, células MDCK, líneas celulares neuronales, células gliales y células del músculo liso, que muestran un crecimiento y una función equivalentes o superiores a los de las células primarias a las que se les ha añadido altas concentraciones de suero. Las células cultivadas con medios DMEM/F12 también presentan la misma morfología celular que las cultivadas en condiciones de alto contenido en suero.

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