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Medio Eagle modificado de Dulbecco F12 (DMEM F12)

Cuatro botellas de medio DMEM F12, que contienen un líquido naranja.

En los últimos años, los investigadores han informado del cultivo de una variedad de líneas celulares en medios libres de suero que contienen un suplemento de nutrientes, factores de crecimiento y hormonas en lugar de suero. Mather y Sato (BBRC, 1985) informaron del cultivo satisfactorio de células de Leydig y Sertoli en un medio sin suero que contenía insulina, transferrina, factor de crecimiento epidérmico, hormona leutinizante u hormona foliculoestimulante, somatomedina y hormona del crecimiento. 

Aunque las hormonas y sus concentraciones son específicas para el tipo de célula en estudio, el medio que resultó óptimo para estos estudios fue una mezcla 1:1 de Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) y Ham's F-12 Nutrient Mixture. Esta mezcla conocida como medio DMEM/F12 contiene 21 aminoácidos, 10 vitaminas, glucosa, hierro y zinc, entre otros componentes. 

DMEM/F12 es un medio más rico y complejo que DMEM. También se puede incluir en la formulación el tampón HEPES a una concentración final de 15 mM para compensar la pérdida de capacidad tampón que se produce al eliminar el suero. Este medio sintético no contiene suero, proteínas, lípidos ni factores de crecimiento, por lo que puede ser necesario complementarlo con suero bovino fetal (FBS) dependiendo del tipo de cultivo celular. Algunas formulaciones comerciales pueden o no incluir glutamina o rojo de fenol.

Preparación.

Products

Aplicaciones de DMEM/F12

El medio basal avanzado DMEM/F12 se utiliza a menudo en aplicaciones que requieren medios con bajo contenido en suero o libres de suero, como el cultivo de organoides 3D o el cultivo de células madre. Los medios DMEM/f12 también pueden utilizarse para ayudar a optimizar las transfecciones celulares que requieren condiciones con bajo contenido en suero o libres de suero.

Además del cultivo de células madre, que a menudo requieren un entorno con bajo contenido en suero o libre de suero, las células primarias pueden cultivarse en medios DMEM/F12. Esto incluye fibroblastos, células MDCK, líneas celulares neuronales, células gliales y células musculares lisas, que muestran un crecimiento y una función equivalentes o superiores a los de las células primarias que fueron suplementadas con altas concentraciones de suero. Las células cultivadas con medios DMEM/F12 también muestran la misma morfología celular que las células cultivadas en condiciones de alta concentración de suero.

Células primarias cultivadas con medios DMEM/F12.

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