Sondas de doble etiquetado

Las sondas de doble etiquetado son el tipo de sonda más común para qPCR. Son sondas de hidrólisis lineal utilizadas en el ensayo de nucleasa 5' con colorantes reporteros 5' y quenchers en el extremo 3', en una posición interna (entre las bases 9 y 10), una posición interna (entre las bases 9 y 10) y el extremo 3', o MGB unido a EDQ en el extremo 3', respectivamente.

Lea más sobre

• Aplicaciones de las sondas etiquetadas-dobles
• Aplicaciones de las sondas etiquetadas-dobles.
• Beneficios del uso de sondas de doble etiquetado
• Añada ácido nucleico bloqueado o MGB:EDQ a su sonda
  
• Cómo funcionan las sondas de doble etiquetado.
• Características de las sondas de doble etiquetado
• Tabla de propiedades espectrales
• Programa de envíos
• Productos-relacionados

Aplicaciones de las sondas etiquetadas-dobles

• Validación de micromatrices
• Multiplexación de genes diana / pocas muestras
• Detección de patógenos
• Multiplexación
• Cuantificación de carga viral
• Análisis de expresión génica
• Determinación de copias de genes
• Detección de la expresión génica
• Detección de la expresión génicali>Multiplexado
• Cuantificación de carga viral
• Análisis de expresión génica
• Determinación de copias de genes

Perfecto para validar knockdowns de siRNA y shRNA de MISSION^® .

BENEFICIOS DEL USO DE SONDAS DE ETIQUETADO DUAL

• Sencillez de diseño para especificidad de secuencia<./li>
• Amplia disponibilidad de combinaciones reportero/secuenciador
• Aumento de la sensibilidad

AÑADA ÁCIDO NUCLEICO BLOQUEADO O MGB:EDQ A SU SONDA

Beneficios del ácido nucleico bloqueado con BHQ™

• Mayor estabilidad térmica y especificidad de hibridación
• Mayor precisión en la detección de SNP, la discriminación de alelos y in vitro la cuantificación o detección
• Diseños de sonda más fáciles y sensibles para secuencias diana problemáticas 
• No tiene fluorescencia nativa (emite calor en lugar de luz), lo que resulta en una menor fluorescencia de fondo
• Incrementa la relación señal/ruido, proporcionando una mayor sensibilidad
• Permite una mayor elección de reporteros para multiplexación

Beneficios de MGB:EDQ

• Incrementa la especificidad de la hibridación sonda-destino, reduciendo la probabilidad de uniones inespecíficas
• Una mayor sensibilidad permite el uso de sondas más cortas, lo que aumenta la sensibilidad de los ensayos de qPCR
• El ajuste de la temperatura de fusión permite ajustar la Tm de la sonda, lo que puede ser beneficioso para diseñar sondas de qPCR con valores de Tm óptimos
• La reducción de la señal de fondo contribuye a una reducción de la fluorescencia de fondo, lo que conduce a una mejora de la S:N o relación señal-ruido
• La estabilidad mejorada puede mejorar la estabilidad del híbrido sonda-destino, reduciendo la probabilidad de degradación de la sonda
• La flexibilidad de diseño amplía las opciones para el diseño de sondas, facilitando la creación de ensayos qPCR eficientes
• Detección mejorada de SNP mediante la discriminación de desajustes

Cómo funcionan las sondas de etiquetado dual

Una sonda de doble etiquetado es un oligonucleótido monocatenario marcado con dos colorantes diferentes. En el extremo 5' se localiza un colorante informador y en el extremo 3' una molécula quencher. La molécula quencher inhibe la emisión natural de fluorescencia del colorante reportero mediante transferencia de energía por resonancia de fluorescencia (FRET). La siguiente ilustración muestra el mecanismo.

El cebador es elongado por la polimerasa y la sonda se une al molde de ADN específico. La hidrólisis libera el reportero del híbrido sonda/destino, provocando un aumento de la fluorescencia. La señal de fluorescencia medida es directamente proporcional a la cantidad de ADN diana.

Características de las sondas de doble etiquetado

• Cantidades: 1, 3, 5 y 10 OD
• Purificación: HPLC
• Longitudes de secuencia: 15 - 40 bases
• Control de calidad: 100% espectrometría de masas
• Formato: Suministrado en seco en tubos de color ámbar
• Formatos personalizados disponibles (normalización, placas especiales, etc.)

Nuestras sondas se suministran en un formato para simplificar su planificación experimental.

• Nuestras sondas se suministran en un formato para simplificar su planificación experimental.

¹JOE/TET alternativa
²VIC^® alternativa
³Cianina 3 alternativa
⁴TAMRA™ alternativa
⁵Cianina 5 alternativaCianina 3 alternativa
⁴TAMRA™ alternativa
⁵Cianina 5 alternativa