biological source
bovine intestine
recombinant
expressed in Pichia pastoris
form
liquid
specific activity
1 units/μg protein
mol wt
monomer 56 kDa by SDS-PAGE
packaging
pkg of 1,000 U (04898133001 [1 U/μl]), pkg of 5,000 U (04898141001 [1 U/μl])
manufacturer/tradename
Roche
concentration
<0.1 % (w/w)
parameter
37 °C optimum reaction temp.
technique(s)
molecular cloning: suitable
color
colorless
pH
7.6-8.5 (68 °F)
solubility
water: miscible
suitability
suitable for molecular biology
NCBI accession no.
UniProt accession no.
application(s)
life science and biopharma
foreign activity
Nicking activity, none detected (up to 20 µl enzyme using pBR322-DNA/ 16h / 37°C), unspecific endonuclease, none detected (up to 20 µl enzyme using Lambda-DNA 16 h/37 °C)
storage temp.
−20°C
Gene Information
bovine ... ALPI(280993)
General description
rAPidアルカリホスファターゼは、ウシ膵臓から分離されたアルカリホスファターゼであり、酵母菌のピキア・パストリスと表記される56 kDの再結合酵素として供給されます。再結合フォームにより、耐久性と安全性が保証されます。rAPidアルカリホスファターゼは、5′リン酸塩のDNAおよびRNA、ヌクレオチド、およびたんぱく質からの脱リン酸化に触媒作用を及ぼします。アルカリホスフォターゼ処理によって、リガーゼに必要な5′-ホスホリル終端の除去によりDNA断片の自己核酸連結が防止されます。この特徴は、ベクトルバックグラウンドを減少させるためのクローン戦略においてもっとも重要です。ウシ腸ホスファターゼと異なり、rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間の熱処理により急速に、完全に、かつ不可逆的に不活性化されます。 したがって、これはShrimp Alkaline Phosphataseの代替品として優れています。さらに、本酵素は制限酵素バッファー内で活性です。したがって、制限酵素分解、脱リン酸化、酵素不活性化、核酸連結、または5′-終端ラベリングは、精製工程なしで実行可能です。
Application
- 以下を含む多くのアプリケーションでRAPidアルカリホスファターゼが使用できます。核酸からの5′-ホスホリルグループの除去。
- 5′-終端ラベリング用のテンプレートの準備。
- dNTPsの除去によるPCR製品の洗浄。
- たんぱく質の脱リン酸化。
注記： rAPidアルカリホスフォターゼはまた、迅速で効率的な脱リン酸化および、粘着性またはブラント端のDNA断片の核酸連結を可能にする、 Rapid DNA Dephos &核酸連結キットにも含まれます。この便利なキットによって、ブラントで粘着性の5′-突出端の脱リン酸化が+37°C で10分間以内に実行され、核酸連結は +15–25°Cでちょうど5分間で完了します。
Biochem/physiol Actions
アルカリホスファターゼは、第一級および第二級アルコール、サッカライド、環状アルコール、フェノール、アミン等の多くのホスファターゼエステルの加水分解に触媒作用を及ぼします。ホスホジエステラーゼは反応しません。酵素は、無機ピロホスフェイトを加水分解します。酵素の運動特性は、酵素の純度、分析中の酵素の濃度、緩衝剤、pH等の多くの因子に依存します。
熱による不活性化：RAPidアルカリホスファターゼは75°Cで2分間の保温により不活性化されます。
熱による不活性化：RAPidアルカリホスファターゼは75°Cで2分間の保温により不活性化されます。
Features and Benefits
- 汚染リスクの除去：組換体発現、および高信頼性かつ高感度の品質管理試験により、高純度が保証されます。
- 現在使用中のホスファターゼを安価なソリューションに交換しましょう： rAPidアルカリホスファターゼは、Shrimp Alkaline Phosphatase またはBovine Alkaline Phosphataseと同等の働きをします。
- 動物起因の病気の除去：ピキア・パストリスにおける発現により、耐久性および安全性が保証されます。
- 急速な熱不活性化による利点：rAPidアルカリホスファターゼは、+75°Cで2分間加熱するだけで不活性化されます。
- 一貫した結果を得ること：rAPidアルカリホスファターゼは、他のアルカリホスファターゼと比べて、保管中の優れた安定性を有します。
Packaging
一つのキットは二つの部品を有します。
Analysis Note
rAPidアルカリホスファターゼの全ロットは、最新の品質管理手順に基づいて、デオキシリボヌクレアーゼの不在およびニッキング活性について試験されます。
Other Notes
RAPidアルカリホスファターゼの一単位は、分析条件下において+37°Cで1分間、1モルの4-ニトロフェニルホスファターゼを加水分解する酵素活性です。
体積活性：1 U/μl
体積活性：1 U/μl
生命科学研究用途に限ります。診断措置において使用しないでください。
キットの構成要素のみ
製品番号
詳細
- rAPid Alkaline Phosphatase Buffer 10x concentrated
- rAPid Alkaline Phosphatase 1 U/μl
保管分類
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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