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Colonne per HPLC Chromolith® RP-18e Standard


Le colonne per HPLC Chromolith® RP-18 endcapped sono la scelta ideale per una separazione rapida e solida di composti da idrofobici a mediamente polari, per esempio la carbidopa o gli steroidi, con una bassa contropressione della colonna.

A differenza delle colonne convenzionali impaccate con particelle, le colonne Chromolith® RP-18 sono costituite da silice monolitica di elevata purezza con una struttura bimodale di macropori e mesopori. I grossi macropori riducono la contropressione della colonna consentendo quindi velocità di flusso significativamente superiori. La fine struttura mesoporica nel materiale crea al tempo stesso una superficie attiva molto estesa che garantisce l’elevata efficienza delle separazioni. Grazie alla bassa contropressione è possibile accoppiare diverse colonne per ottenere una risoluzione ancora maggiore.

Inoltre, la durata della colonna è sostanzialmente migliorata grazie al rigido materiale monolitico, e la base in silice di elevata purezza riduce al minimo gli effetti avversi dei metalli in tracce. Le colonne per HPLC Chromolith® RP-18e sono chimicamente modificate con catene n-alchiliche ad alta densità di ligandi e sottoposte a un processo di endcapping completo per ridurre gli effetti dei gruppi silanolici non modificati.

Facilità di trasferimento del metodo

La base chimica delle colonne Chromolith® RP-18 endcapped è identica a quella delle colonne particellari in silice di elevata qualità (es. Purospher®). Sono prodotte a partire dagli stessi silani privi di metalli e sottoposte alle stesse procedure di modifica della superficie. Ne consegue che siano dotate di una selettività simile a quella delle colonne C18 endcapped (fase inversa) impaccate con particelle, di qualità elevata. Di conseguenza, nello sviluppare nuovi protocolli gli addetti alla cromatografia possono utilizzare con facilità i metodi standard, e il trasferimento del metodo dalle colonne particellari alle colonne monolitiche Chromolith® RP-18 è semplice e senza soluzione di continuità.

Le colonne Chromolith® RP-18e rientrano nella farmacopea USA nella categoria L1.

Caratteristiche e pregi

  • Rendimento elevato a velocità di flusso elevate con la migliore qualità complessiva della colonna
  • Possibili gradienti di flusso
  • Prestazioni aggiuntive attraverso l'accoppiamento delle colonne
  • Rigida struttura monolitica per colonne di maggiore durata
  • Minore sensibilità della matrice
  • Semplicità di trasferimento del metodo dalle colonne particellari

Diverse lunghezze per ogni applicazione

La lunghezza della colonna è direttamente proporzionale all'efficienza, alla contropressione e ai tempi di ritenzione. Inoltre, grazie al numero più elevato di lastrine teoriche per colonna, aumentando la lunghezza della colonna aumenta la risoluzione. Le colonne Chromolith® RP-18e standard sono disponibili in diverse lunghezze e diametri interni (DI) per adattarsi perfettamente alle esigenze di ogni applicazione. Inoltre, grazie alla bassa contropressione è facile accoppiare due o più colonne Chromolith® HighResolution.

Prodotto
Diametro interno
Numero di catalogo
Chromolith® Flash RP-18e, (L) 25 mm: per separare molto rapidamente miscele semplici
Chromolith® Flash RP-18 endcapped (disponibile con DI di 2, 3 e 4,6 mm) è la più rapida colonna per HPLC presente sul mercato. Trattandosi di una colonna molto corta, il numero delle lastrine teoriche è sufficiente per separazioni semplici.
2 mm
3 mm
4,6 mm
152014
152003
151463
Chromolith® SpeedROD and FastGradient RP-18e, (L) 50 mm: per separare rapidamente miscele semplici
These short, fast columns – available with 2 or 3 mm i.d. (FastGradient) e 4,6 mm (SpeedRod) sono perfette per un rapido screening dei campioni durante i controlli interni al processo, oltre che per i laboratori specializzati nella ricerca o nella sintesi organica (es. chimica combinatoria).

2 mm
3 mm
4,6 mm

152007
152002
151450
Chromolith® Performance RP-18e, (L) 100 mm: per separare rapidamente miscele più complesse
La colonna Chromolith® RP-18e da 100 mm è perfetta come strumento analitico di routine da utilizzare nei laboratori che effettuano controlli di qualità o nei laboratori di ricerca nei quali si analizzano miscele più complesse.
2 mm
3 mm
4,6 mm
152006
152001
102129
Kit di convalida: per un'accurata convalida del metodo.
Kit di convalida sono disponibili per colonne Chromolith® Performance (DI di 4,6 o 3 mm) e Chromolith® FastGradient (DI di 2 mm) RP-18e columns. Ogni kit di convalida contiene tre colonne da tre diversi lotti di produzione. Ciò consente di confrontare con facilità la riproducibilità e la qualità tra i lotti, rendendo il kit di convalida uno strumento ideale per i laboratori addetti al controllo di qualità e alla convalida.
2 mm
3 mm
4,6 mm
152062
152063
151466

Esempi di applicazioni

Chromolith® Performance RP-18e

Colonna Chromolith® Performance, 100-4,6 mm
Fase mobile A: Acetonitrile
B: Tampone fosfato
20 mM, pH 4,5  
Gradiente Tempo/min %A %B
0,0 20 80
3,0 60 40
Velocità di flusso 4 ml/min
Rilevazione 230 nm
Temperatura 22° C
Volume d'iniezione 10 μl
Campione

1. Acido ascorbico
2. Acido 4-idrossibenzoico
3. Acido benzoico
4. Acido sorbico
5. Metil 4-idrossibenzoato
6. Etil 4-idrossibenzoato
7. Propil 4-idrossibenzoato

100 μg/ml
100 μg/ml
100 μg/ml
50 μg/ml
100 μg/ml
150 μg/ml
100 μg/ml

Merck:/Freestyle/LE-Lab-Essentials/Chromatography/Diagrams/LE-Chromolith Performance RP-18e-250x274-11102014.jpg

Chromolith® SpeedROD RP-18

Colonna Chromolith® SpeedROD RP-18 endcapped, 50-4,6 mm
Fase mobile A: Acetonitrile
B: 0,01 M Tampone
fosfato pH 5,0
Gradiente Tempo/min %A %B
0,0 3 97
2,5 3 97
2,6 8 92
5,0 8 92
Velocità di flusso 4 ml/min
Rilevazione 227 nm
Temperatura Ambiente
Volume d'iniezione 10 μl
Campione

1. Acesulfame K
2. Saccarina
3. Acido benzoico
4. Acido sorbico
5. Caffeina
6. Aspartame

23 μg/ml
29 μg/ml
13 μg/ml
14 μg/ml
47 μg/ml
100 μg/ml

  Merck:/Freestyle/LE-Lab-Essentials/Chromatography/Diagrams/LE-Chromolith SpeedROD RP-18e-300x312-11102014.jpg
Separazione della carbidopa

Colonna Chromolith® Performance RP-18 endcapped, 100-4,6 mm
Fase mobile A: Metanolo
B: TFA 0,1% in acqua
Gradiente Tempo/min %B
0,0 100
1,0 100
10 80
Velocità di flusso 2 ml/min
Rilevazione UV 282 nm
Temperatura Ambiente
Volume d'iniezione 5 μl
Campione

1. 2,4,5-triidrossifenilalanina
2. Levodopa
3. Metildopa
4. Dopamina
5. Carbidopa
6. Acido 3,4-diidrossifenilacetico
7. 3-o-metilcarbidopa

125 μg/ml
235 μg/ml
160 μg/ml
190 μg/ml
175 μg/ml
185 μg/ml
105 μg/m

  Merck:/Freestyle/LE-Lab-Essentials/Chromatography/Diagrams/LE-Separation of carbidopa-300x270-11102014.jpg
Separazione degli steroidi

Colonna 2 colonne di Chromolith® Performance RP-18 endcapped
Fase mobile A: Acetonitrile
B: Acqua  
Gradiente Tempo/min %B
0,0 80
7,0 10
Velocità di flusso 3.0 ml/min
Rilevazione 220 nm
Temperatura Ambiente
Volume d'iniezione 10 μl
Campione

1. Prednisolone
2. Cortisone
3. Nortestosterone
4. Estradiolo
5. Testosterone
6. Corticosterone
7. Estrone
8. Progesterone

  Merck:/Freestyle/LE-Lab-Essentials/Chromatography/Diagrams/LE-Separation of steroids-300x304-11102014.jpg

Specifiche

Tipo di silice Purezza elevata
Dimensioni delle particelle Monolitica
Dim. macropori 1,5 µm (colonne con DI di 2 mm);
2 µm (colonne con DI di 25, 10, 4,6 e 3 mm);
Dim. mesopori 13 nm (130 Å)
Volume dei pori 1,0 ml/g
Porosità totale >80 %
Superficie 300 m2/g
Variazione della superficie RP-18 endcapped
Contenuto di carbonio 18 %
 
 
 
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