ディスパーゼ^®II（中性プロテアーゼ、グレードII）

ディスパーゼは、真皮から表皮を無傷に分離する、中性で即効性の穏やかなプロテアーゼです。さらに、培養された上皮細胞を基層から無傷に分離します。これは、基底膜帯を開裂させ、上皮細胞を無傷のまま残します。

ディスパーゼ^®は、広範囲の異なる組織および器官由来の細胞の調製に使用されます。本酵素は、細胞培養（初代細胞培養）用に単一細胞を放出させるために、またはすでに培養中の細胞を回収して新しい基質に移す（二次培養）ために組織の細胞外マトリックスを破壊することを目的とした迅速かつ効果的でありながら穏やかな薬剤であることが証明されています。さらに、懸濁液中で培養された細胞の望まない凝集を防止するために使用されます。

ディスパーゼは、非特異的なメタロプロテアーゼです。

2〜8℃で保存します。（乾いた状態で保存してください！）

活性化剤：Ca²⁺の至適濃度は、2 mMです。酵素製剤には、活性が至適になるように十分なCa²⁺が含有されています。
阻害剤：EDTA、EGTA、Hg²⁺、その他の重金属。ディスパーゼは、血清により阻害されません。
ワーキング濃度：0.6～2.4 U/mL
ワーキング溶液：保存溶液とワーキング溶液の調製：

10 mg/mLの保存溶液を調製するには、凍結乾燥したディスパーゼ^®II酵素をHEPES緩衝生理食塩水（50 mM HEPES/KOH pH 7.4、150 mM NaCl）に溶解します。ワーキング溶液を調製するには、上記の保存溶液を単離細胞用の培地で希釈し、最終濃度を0.6～2.4 U/mLとします。2.4 U/mL超の濃度は推奨されないことにご注意ください。最良の結果を得るために、0.22 μmフィルターメンブレンを使用してワーキング溶液をろ過します。
保存条件（ワーキング溶液）：-15～-25℃
復元調製された保存溶液は、2～8℃で2週間安定です。最大2ヵ月間まで保存するためには、保存溶液はアリコートにして凍結する必要があります。凍結融解を繰り返さないでください！PBSで希釈したワーキング溶液は、2～8℃で3日間安定です。

1単位は、アッセイ条件下（pH 7.5、+37℃）で1分間に1 μmol（181 μg）のチロシンに相応するフォリン陽性アミノ酸およびペプチドを遊離させる酵素活性です。
ディスパーゼ^®IIのRoche単位と日本の文献に引用されている単位との実際的な比較（1,000～2,000単位/mLのディスパーゼ^®濃度は珍しいことではない）によると、ディスパーゼのRoche 1単位は日本の約600単位と等しいことが示唆されています。
Roche Applied Scienceのディスパーゼ^®の1単位は、アミノ酸の放出として測定される181プロテアーゼ単位（PU）に等しく、これは+37℃、pH 7.5で1分・mLあたりの1 μgのチロシンに相当します。

ライフサイエンス研究専用です。診断的処置に使用しないでください。

Dispase is a registered trademark of Godo Shusei Co., Ltd.