연구, 진단 및 제약용 세포 분리 매체

ACCUSPIN™ 시스템-HISTOPAQUE^® 매체를 이용한 세포 분리

히스토팩^®-1077을 사용하는 인기 있는 ACCUSPIN™ 시스템은 방사선 멸균 처리된 원심분리 튜브를 사용하여 다공성 고밀도 폴리에틸렌 장벽("프릿")으로 두 개의 분리된 챔버를 형성하도록 설계되었습니다. 이 시스템은 상부 챔버에 항응고 처리된 전혈을 첨가할 수 있도록 하여 하부 챔버의 히스토팩^® 분리 매체와 혼합될 위험 없이 분리할 수 있게 합니다. 히스토팩^® 밀도 등급 매체는 림프구와 단핵구(즉, 단핵구)의 명확한 분리를 가능하게 합니다. 적혈구는 응집되고 과립구는 약간 고장성 상태가 되어 침강 속도가 증가하여 ACCUSPIN™ 튜브 바닥에 펠릿 형태로 침전됩니다. 분리 과정이 완료되면 분리된 세포를 추가로 특성화하거나 배양, 분석하거나 유동세포계측법, 세포 기반 분석법, 분자 분석, 제약 또는 세포 치료제 개발과 같은 다운스트림 응용 분야에 사용할 수 있습니다.

HISTOPAQUE^® 요오드화 밀도 구배 매체

히스토팩^® 매체는 세포 밀도에 기반하여 다양한 세포 유형을 분리하도록 설계되었으며, 특정 세포 집단의 분리 및 정제를 위해 제약 및 생물의학 연구에서 일반적으로 사용됩니다. 히스토팩^® 매체는 정밀하게 밀도가 조정된 폴리수크로오스 및 디아트리조산 나트륨 용액으로, 멸균 여과 및 내독소 검사를 거쳤습니다. 이 즉시 사용 가능한 분리 매체는 소량의 전혈에서 생존 가능한 세포를 신속하고 최적으로 회수하는 데 도움이 됩니다. 히스토팩^® 분리 매체는 일반적으로 다음과 같은 용도로 사용됩니다: 말초혈 단핵 세포(PBMC) 분리: 히스토팩^® 매체는 전혈 샘플에서 PBMC를 분리하는 데 자주 사용됩니다. PBMC는 림프구, 단핵구 및 기타 핵을 가진 세포로 구성됩니다. 혈액 샘플과 원심 분리 튜브 사이에 히스토팩^® 매체를 층을 이루도록 넣으면, 원심 분리 과정에서 PBMC가 적혈구 및 혈소판과 같은 다른 혈액 성분으로부터 분리됩니다. 세포 분획: 히스토팩^® 매체는 혼합된 세포 군집을 밀도에 따라 뚜렷한 층으로 분획하는 데 사용할 수 있습니다. 분리 매체를 원심 분리 튜브에 층을 이루도록 넣고 세포 현탁액을 조심스럽게 첨가하면, 원심 분리 과정에서 서로 다른 세포 유형을 나타내는 뚜렷한 층이 형성됩니다. 이 기술은 추가 분석이나 실험을 위해 세포를 분리 및 정제하는 데 유용합니다. 특정 세포 유형 분리: Histopaque^® 분리 매체는 밀도나 특정 표지자를 기준으로 특정 세포 집단을 분리하는 데 활용될 수 있습니다. 분리 매체와 세포 현탁액을 신중하게 층을 형성한 후 원심분리하면 관심 세포를 원치 않는 세포로부터 분리할 수 있습니다. 이 기술은 특정 세포 유형을 연구하거나 희귀 세포 집단을 농축하려는 연구자에게 특히 유용합니다. ISO 9001 품질 관리 하에 생산된 Histopaque^® 제품은 로트별 성능 테스트를 통해 혈액 세포 계통의 일관된 선택적 분리, 생존 가능한 변형되지 않은 세포의 최적 분리 및 최소한의 외부 세포 간섭을 제공합니다.

PERCOLL^® 콜로이달 실리카 매체

콜로이달 실리카 매체는 직경 15-30 nm의 폴리비닐피롤리돈(PVP)으로 코팅된 실리카 입자의 콜로이드 현탁액으로, 일반적으로 생의학 및 제약 연구에서 세포 분리 및 정제에 사용됩니다. PVP는 생물학적 물질과의 입자 상호작용을 감소시키고 등장성 염화나트륨 용액 내에서 콜로이드를 안정화시킵니다. Percoll^® 용액의 농도 조절을 통해 밀도를 변경할 수 있어 연구자가 특정 분리 요구사항에 맞게 농도 구배를 맞춤 설정할 수 있습니다. 머크의 Percoll^® 콜로이드 매체는 밀도 변화에 거의 영향을 받지 않는 극히 낮은 삼투압 강도를 지닙니다. 또한 원심분리로 형성된 구배의 삼투압 농도는 적절한 양의 수크로스 또는 완충 용액을 첨가하여 쉽게 조절됩니다. Percoll^® 구배는 세포, 세포소기관, 막 소포체, 심지어 일부 바이러스의 등밀도 분리에 이상적입니다.

무기염

이온성 농도 구배 매체(이온성 농도 구배 또는 이온성 용액으로도 알려짐)는 세포의 표면 전하 또는 전기적 특성에 기반하여 세포를 분리하는 세포 분리 기술에 사용됩니다. 이러한 매체는 정전기장 또는 전하 차이를 생성하여 서로 다른 표면 전하를 가진 세포의 분리를 가능하게 합니다. 이온성 농도 구배 매체를 활용하는 세포 분리 기술의 예로는 전기영동, 유전영동(DEP), 등전점 초점화(IEF) 등이 있습니다. 매체와 기법의 구체적 선택은 분리 대상 세포의 특성, 원하는 분리 메커니즘, 전반적인 실험 목적에 따라 달라집니다. 머크의 이온 농도 구배 매체는 농축 중금속 염으로 구성되며, 핵산의 등밀도 분리에만 전용으로 사용됩니다. 염화세슘과 황산세슘은 최대 1.91 g/cm³의 구배 밀도를 가진 가장 널리 사용되는 중금속 염입니다. 기타 사용되는 염으로는 요오드화나트륨, 브롬화나트륨 및 루비듐염이 있습니다. 이온 농도 구배 매체와 기법의 선택 및 설계에는 pH, 전도도, 완충액 조성, 연구 대상 세포의 전기적 특성 등과 같은 요소를 신중하게 고려해야 합니다.

비이온성 요오드화 밀도 구배 매질

비이온성 요오드화 밀도 구배 매체는 생물학, 생화학, 임상 진단 등 다양한 분야의 분리 및 정제 기술에 사용되는 특수 물질입니다. 이러한 매체는 일반적으로 밀도 구배를 형성하는 요오드화 화합물을 기반으로 하여 입자의 밀도에 따른 분리를 가능하게 합니다. 비이온성 요오드화 밀도 구배 매체는 밀도 구배 원심분리 원리에 따라 작동합니다. 널리 사용되는 밀도 구배 매체에 사용되는 대부분의 요오드화 화합물 구조는 수용액에서 연속적인 밀도 구배를 형성하기 위한 용해도를 높이기 위해 친수성 그룹이 부착된 트라이요오도벤조산과 같은 요오드화 화합물을 기반으로 합니다. 머크는 생물학적 입자의 탈수를 최소화하는 고밀도 이오헥솔 용액(예: Nycodenz^® 및 Histodenz™)을 제공합니다. 이오헥솔은 무독성이며 포유류 세포에 의해 대사되지 않습니다.

다원자 알코올

머크의 다원자 알코올 비이온성 농도 구배 매체 포트폴리오에는 고분자의 속도-영역별 분리 및 바이러스와 세포 소기관의 등밀도 분리에 널리 사용되는 수크로스 구배가 포함됩니다. 장점으로는 안정성, 비활성 및 저비용이 있으며, 단점으로는 용액의 농축 및 고삼투성 특성이 있습니다. 머크에서는 또한 해당 수크로스 용액보다 밀도가 낮은 글리세롤 용액을 제공하여 특정 효소의 활성을 억제하면서도 진공을 통해 쉽게 제거할 수 있도록 합니다.

다당류

당액 사용 시 발생하는 높은 삼투압 문제를 해결하기 위해 가장 널리 사용되는 다당류 매체인 Ficoll^®을 제공합니다. Ficoll^® 합성 고분자는 폴리비닐피롤리돈으로 코팅된 폴리에틸렌글라이콜(PEG)로, 밀도 구배 용액 제조에 흔히 사용됩니다. Ficoll^® 용액은 다양한 생물학적 및 생화학적 응용 분야, 특히 세포 분리 및 격리 작업에 널리 활용됩니다. 이 용액은 자당 분자와 에피클로로히드린의 중합을 통해 평균 분자량 400,000의 다당류를 생성합니다. 20%(w/v) 미만의 Ficoll^® 용액은 1.07 g/cm³의 밀도를 가지며 삼투적으로 불활성으로 간주됩니다. 피콜^® 용액의 주요 단점은 유사한 수크로스 용액에 비해 점도가 높다는 점입니다. 피콜^® 용액은 다양한 제약 연구 및 개발 과정에서 중요한 역할을 수행하며, 세포, 바이러스 및 기타 생물학적 성분의 분리, 정제 및 특성 분석을 용이하게 하여 신약 개발, 면역요법 및 기타 제약 응용 분야의 발전에 기여합니다. 특히 말초혈액이나 기타 세포 공급원에서 단핵세포를 분리하는 세포 분리 기술에 널리 사용됩니다. 세포 현탁액을 Ficoll^® 밀도 구배 위에 층을 형성하고 원심분리함으로써, 림프구나 단핵구와 같은 관심 세포를 적혈구나 과립구 같은 다른 세포 유형 및 원치 않는 성분으로부터 분리할 수 있습니다. Ficoll^® 용액은 또한 부력 밀도에 따라 입자나 분자를 분리하는 기술인 밀도 구배 원심분리에도 사용됩니다. 원심분리 과정에서 입자나 세포는 Ficoll^® 농도 구배를 따라 이동하며, 각자의 밀도에 해당하는 위치에 침전됩니다. 이를 통해 이질적인 혼합물에 존재하는 다양한 성분을 분리하고 분획할 수 있습니다.