뉴클레아제(DNase 및 RNase)
뉴클레아제(DNase 및 RNase)의 기능에는 DNA와 RNA의 효소적 분해가 포함되며, 이는 수많은 연구 분야에 필수적입니다. 예를 들어, 단백질 및 특정 핵산의 정제 과정에서는 종종 DNA, RNA 또는 둘 모두의 분해가 필요합니다. 높은 DNA 농도로 인해 발생하는 점도 문제나 효소적 세포 분해 방법은 DNase를 활용함으로써 종종 개선될 수 있습니다. 당사는 대부분의 분해 요구 사항을 충족할 수 있는 다양한 고순도 뉴클레아제 제품군을 제공합니다.
Products
| DNA | DNA | 하이브리드 | ||||||
| 비특이적 뉴클레아제 | 엔도뉴클레아제 | 엑소뉴클레아제 | 단일 가닥 |
이중 가닥 | RNA | RNA | 3'-인산 생성 | 5'-인산 생성 |
| 터보뉴클레아제 | X | X | X | X | X | |||
| DNase I | X | X | X | X | ||||
| DNase II | X | X | X | X | ||||
| 미코코칼 뉴클레아제 | X | X | X | X | X | |||
| 뉴클레아제 P1 | X | X | X | |||||
| 뉴클레아제 S1 | X | X | X | X | X | |||
| 포스포디에스테라제 I | X | X | ||||||
| 포스포디에스테라제 II | X | X | X | X | X | |||
| RNase A | X | X | X | |||||
| RNase H | X | X | X | |||||
| RNase T1 | X | X | X | |||||
| 리보뉴클레아제 최적화 혼합물 | X | X | X | X |
제한 효소
DNA 및 RNA 분해용 뉴클레아제
당사의 뉴클레아제는 절단 특이성뿐만 아니라 최적 pH와 같은 특성에 따라 다양하므로, 연구자는 실험 요구 사항에 가장 적합한 분해 효소를 선택할 수 있습니다. 예를 들어, 포유류 유래의 데옥시리보뉴클레아제 I은 말단에 5’ P1을 가진 산물을 생성하며, 페니실리움 시트리눔(Penicillium citrinum) 유래 제품은 이중가닥 DNA는 분해하지 않고 단일가닥 DNA와 RNA만을 분해합니다. 리보뉴클레아제 A는 단백질 시료나 플라스미드 DNA 제제에 혼입된 모든 RNA를 가수분해합니다. 이러한 효소 중 다수는 분자생물학 분야에서 추가적인 용도로 사용됩니다. 예를 들어, DNase I은 DNA에 “절단”을 만들어 표지된 염기가 통합되도록 합니다. RNase A는 특정 mRNA의 양을 측정하는 RNase 보호 분석법(RNase protection assay)에 사용되는 도구입니다.
데옥시리보뉴클레아제 I 및 데옥시리보뉴클레아제 II DNase 효소
데옥시리보뉴클레아제 I은 이중가닥 및 단일가닥 DNA의 내핵산분해 절단을 촉매하여 5'-포스포디뉴클레오티드 및 5'-포스포올리고뉴클레오티드 최종 생성물을 생성합니다. 가수분해 생성물은 5'-인산 모노뉴클레오티드와 올리고뉴클레오티드의 복잡한 혼합물입니다. 마그네슘 이온이 존재할 경우, DNase I은 DNA의 각 가닥을 독립적으로 공격하며 절단 부위는 무작위적으로 발생합니다. 망간(II)이 존재할 경우, DNase I은 DNA의 양 가닥을 거의 동일한 부위에서 절단합니다. 대부분의 실험 프로토콜에서는 DNase I과 함께 마그네슘 이온을 사용하지만, 특정 목적을 위해서는 망간이 사용되기도 합니다. 또한, 데옥시리보뉴클레아제 II는 이중가닥 및 단일가닥 DNA의 내핵분해 절단을 촉매하여 뉴클레오사이드 3'-인산염과 3'-포스포올리고뉴클레오티드 최종 생성물을 생성합니다. 활성이 나타나는 pH 범위는 4.0~6.5이며, pH 6.5에서는 약 15% 정도만 활성을 보입니다. 최적 pH는 5.0입니다. 이 효소의 최적 안정성은 pH 5~5.5에서 나타나며, 30°C에서 pH 8.5일 경우 빠르게 비활성화됩니다. 당사는 다양한 시료 유형과 응용 분야를 지원하기 위해 광범위한 DNase 효소 제품군을 제공합니다. 동결건조형이든 액체형이든, 당사의 일부 DNase 제품에는 원치 않는 분해를 방지하기 위해 RNase 또는 프로테아제의 농도가 현저히 낮게 함유되어 있습니다.
리보뉴클레아제 A, 리보뉴클레아제 H 및 리보뉴클레아제 T1 RNase 효소
리보뉴클레아제 A는 RNA의 내핵분해적 절단을 촉매하여, Cp 또는 Up으로 끝나는 뉴클레오사이드 3'-인산염 및 3'-포스포올리고뉴클레오티드를 생성합니다. RNase A의 활성화제에는 칼륨 및 나트륨 염이 포함됩니다. 활성에 대한 최적 온도는 60 °C이지만, 이 효소는 15~70 °C 범위에서도 활성을 나타냅니다. pH 최적치는 7.6이며, 활성 범위는 6~10입니다. 단일 가닥 RNA에서 가장 높은 활성을 나타냅니다. RNase A는 매우 안정적인 효소로, 최대 100 °C의 온도까지 견딜 수 있습니다. 100 °C에서 RNase A는 pH 2.0~4.5 사이에서 가장 안정적이다. 리보뉴클레아제 H는 RNA:DNA 이중가닥에서 RNA의 포스포디에스터 결합을 특이적으로 가수분해하여 3'-하이드록실 말단과 5'-인산 말단을 가진 생성물을 생성한다. 이 효소는 DNA-RNA 하이브리드(상보적인 DNA 가닥과 수소 결합을 형성한 RNA)의 RNA 성분만을 분해한다.
또한, 리보뉴클레아제 T1은 RNA의 2단계 내핵산 분해를 촉매하여, 주로 Gp로 끝나는 뉴클레오사이드 3'-인산염과 3'-포스포올리고뉴클레오티드를 생성한다. 이 반응에서, 절단은 구아니딘 리보뉴클레오티드의 3'-인산기 와 인접한 뉴클레오티드의 5'-하이드록실기 사이에서 발생한다. 초기 생성물은 2':3' 고리형 인산 뉴클레오사이드이며, 이는 가수분해되어 해당 3'-뉴클레오사이드 인산으로 변환됩니다. 용액 상태에서 이 생성물은 열(pH 6 조건에서 100 °C, 10분간)과 산에 내성이 있지만, 알칼리성 용액(pH 9 이상)에서는 불안정합니다. 이 효소에 의해 촉매되는 반응은 반응 혼합물을 100 °C로 가열해도 중단될 수 없다는 점에 유의해야 합니다. 당사는 다양한 시료 유형과 응용 분야를 지원하기 위해 폭넓은 RNase 효소 제품군을 제공합니다. 동결건조형이든 액상 형태이든, 당사의 일부 RNase 제품에는 원치 않는 단백질 분해를 방지하기 위해 매우 낮은 농도의 프로테아제가 포함되어 있습니다.