Análisis de micoplasmas en el sector farmacéutico
La contaminación por micoplasmas es un problema generalizado y recurrente en muchos sistemas de cultivo celular, tanto en la investigación en ciencias de la vida como en la industria farmacéutica. Los micoplasmas pueden alcanzar títulos elevados en los medios de cultivo sin mostrar los signos típicos de la contaminación bacteriana, como la turbidez. Sus efectos sobre las células cultivadas incluyen alteraciones metabólicas, ralentización de la proliferación y aberraciones cromosómicas. En resumen, la contaminación por micoplasmas compromete la validez de los datos de las líneas celulares afectadas y de los resultados de la investigación en ciencias de la vida. Esto hace que las pruebas de detección de micoplasmas y, por lo tanto, el mantenimiento de cultivos celulares libres de contaminación, sean fundamentales para la investigación basada en células y para la fabricación de productos en los que la salud de los consumidores es una preocupación fundamental.
Categorías destacadas
Un medio de cultivo microbiano es una mezcla de sustancias que favorece y sustenta el crecimiento y la diferenciación de los microorganismos.
Las pruebas de esterilidad son una parte esencial de la validación de los productos fabricados de acuerdo con las buenas prácticas de fabricación (GMP) y que pretenden ser estériles.
Garantizar la seguridad: Los ensayos de pirógenos son fundamentales para los productos farmacéuticos y los dispositivos médicos. La prueba de activación de monocitos (MAT) detecta endotoxinas y pirógenos no endotóxicos.
Descubre soluciones avanzadas de monitorización medioambiental y simulación de procesos asépticos para la fabricación de productos farmacéuticos. Garantiza el cumplimiento de las buenas prácticas de fabricación (GMP) con nuestras herramientas y medios especializados para salas blancas, aisladores y RABS.
SERVICIOS DE ANÁLISIS DE BIOSEGURIDAD
Servicios de análisis de bioseguridad para investigar anticuerpos monoclonales (mAb), materiales de terapia celular y génica, y vacunas, con el fin de garantizar que estén libres de agentes adventicios o de resultados inesperados que puedan provocar fallos catastróficos en el procesamiento posterior, incluyendo: análisis de micoplasmas.
Acerca de las bacterias micoplasmas
Los micoplasmas se encuentran entre las bacterias más pequeñas que se conocen, siendo capaces de atravesar filtros con un tamaño de poro de 0,2 µm. Estos microorganismos crecen en condiciones aeróbicas o anaeróbicas facultativas.
Los micoplasmas pueden ser parásitos o saprófitos. Varias especies, como por ejemplo M. pneumoniae, son patógenas y causan neumonía y otros trastornos respiratorios en los seres humanos. Se cree que M. genitalium está implicado en las enfermedades inflamatorias pélvicas. Al carecer de pared celular, los micoplasmas no son sensibles a las penicilinas ni a otros antibióticos que actúan sobre esta estructura. Para estabilizar sus membranas citoplasmáticas, la mayoría de los micoplasmas necesitan esteroles, que obtienen de su entorno, normalmente en forma de colesterol procedente de sus huéspedes animales. Muchas cepas de Mycoplasma también son tolerantes a una variedad de otros antibióticos.
Visita nuestro buscador de documentos para consultar fichas técnicas, certificados y documentación técnica.
Fuentes de contaminación por micoplasmas
Las fuentes de contaminación por micoplasmas en el laboratorio y en la producción son muy difíciles de controlar. Algunas especies se encuentran en la piel humana y pueden introducirse en los cultivos debido a prácticas asépticas deficientes. Además, los micoplasmas pueden introducirse a través de suplementos contaminados, como el suero fetal bovino, o, lo que es más habitual, por transmisión desde otros cultivos celulares contaminados. Una vez que un cultivo celular contiene micoplasmas, estos microbios pueden propagarse rápidamente y contaminar otras zonas del laboratorio a través de los aerosoles y las partículas generadas durante la manipulación de los cultivos. Es fundamental cumplir estrictamente con las buenas prácticas asépticas de laboratorio, y se recomienda encarecidamente realizar análisis rutinarios de los cultivos para controlar con éxito la contaminación por micoplasmas en las áreas de fabricación.
¿Por qué es necesario realizar pruebas de detección de micoplasmas en la industria farmacéutica?
Las instalaciones biofarmacéuticas que utilizan células eucariotas para la producción de vacunas deben analizar sus bancos de células y lotes de semillas víricas, así como las vacunas a granel, para detectar la contaminación por micoplasmas. Las especies de este género bacteriano infectan las células eucariotas, alterando su crecimiento y metabolismo. Cuando los micoplasmas interfieren en la producción de vacunas, esto puede afectar a la calidad y al rendimiento de las proteínas y, lo que es más importante, provocar efectos secundarios en los pacientes a los que se les administra el producto final de la vacuna.
La contaminación de los biorreactores con micoplasmas puede provocar una pérdida significativa de tiempo, materiales e ingresos, a menos que se detecte en una fase temprana del proceso de fabricación. Sin rutinas de análisis rigurosas, la contaminación por micoplasmas de los lotes de producción biofarmacéutica es extremadamente difícil de detectar, ya que la presencia de micoplasmas no suele provocar cambios en el pH ni turbidez visual en los medios de cultivo. El método de ensayo de micoplasmas establecido en la farmacopea incluye tanto cultivos como ensayos con células indicadoras para su detección. Si solo se utilizan dos medios para el análisis, se recomienda emplear los medios FREY y FRIIS de forma combinada.
Métodos de análisis de micoplasmas
Es importante analizar los productos biofarmacéuticos, las vacunas, los cultivos celulares y los cultivos víricos para detectar la presencia de micoplasmas en distintos momentos del control de calidad. Los tres métodos de análisis más habituales son:
- El cultivo de micoplasmas, en el que se inoculan muestras de ensayo en medios de cultivo bacterianos optimizados para micoplasmas
- Métodos de tinción de ADN, en los que los núcleos de los micoplasmas se contratiñen con Hoechst o DAPI y se observan mediante microscopía de fluorescencia
- PCR (reacción en cadena de la polimerasa) para amplificar el ADN bacteriano en caso de que haya micoplasmas presentes en la muestra
Procedimiento para la detección de micoplasmas según la norma EP 2.6.7 y la USP 63
* En los días posteriores a la inoculación, realice un subcultivo de cada medio líquido inoculando 0,2 ml en al menos una placa de cada medio sólido. Repita el procedimiento entre el sexto y el octavo día, de nuevo entre el decimotercero y el decimoquinto día, y una vez más entre el decimonoveno y el vigésimo primer día de la prueba. Observe los medios líquidos cada dos o tres días y, si se produce un cambio de color, realice un subcultivo.
Nota: Además, se requiere un control positivo y otro negativo por cada medio sólido y líquido, con un tiempo de incubación de 14 días.
Medios listos para usar para la detección de micoplasmas según las farmacopeas
Ofrecemos una gama completa de medios de cultivo líquidos y sólidos listos para usar, necesarios para la detección de micoplasmas según la Farmacopea Europea 6.1 (2.6.7.) y la USP 35 (63). Sin necesidad de pasos de preparación adicionales, nuestros medios de cultivo para micoplasmas listos para usar garantizan una calidad constante del producto y una trazabilidad completa, con certificados de análisis específicos para cada lote.
Debido a sus ingredientes, los medios para micoplasmas suelen tener una vida útil mucho más corta que la mayoría de los demás medios de cultivo para el control de calidad microbiológico. La vida útil de nuestros medios de cultivo líquidos y sólidos Friis, Frey y Hayflick, listos para usar, se ha ampliado a 4 meses para las placas de agar y a 6 meses para los caldos. Descubra nuestra gama completa de medios de cultivo listos para usar con una vida útil más larga para facilitar los análisis de micoplasmas.
Artículos relacionados
- Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using isolation techniques. Free ECACC handbook download.
- Cell culture protocol for testing cell lines for mycoplasma contamination using indirect DNA staining using Hoechst 33342.
- Ver todo (2)
Ver más artículos
¿Cómo podemos ayudarte?
Si tiene alguna duda, envíe una solicitud
de asistencia al cliente o póngase en contacto con nuestro equipo de atención al cliente:
Envíe un correo electrónico a custserv@sial.com
o llame al +1 (800) 244-1173
Asistencia adicional
- Búsqueda de cromatogramas
Utiliza la función de búsqueda de cromatogramas para identificar los compuestos desconocidos de tu muestra.
- Calculadoras y aplicaciones
Caja de herramientas de la página web: herramientas y recursos de investigación científica para química analítica, ciencias de la vida, síntesis química y ciencia de los materiales.
- Solicitud de atención al cliente
Soporte al cliente que incluye ayuda con pedidos, productos, cuentas y problemas técnicos del sitio web.
- Preguntas frecuentes
Consulta nuestra sección de preguntas frecuentes para encontrar respuestas a las dudas más habituales sobre nuestros productos y servicios.