Medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM)
El medio Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) es uno de los medios más versátiles para numerosos fenotipos de células adherentes entre los medios definidos para el cultivo celular y tisular. Esto incluye células de mamíferos, células de insectos y células vegetales. El medio de Eagle original se desarrolló en la década de 1950 y se formuló para el cultivo de células de pollo. Sin embargo, la modificación de Dulbecco es una fórmula complementaria mejorada que multiplica por cuatro el contenido de determinados aminoácidos y vitaminas en comparación con el medio de Eagle original.
En el cultivo celular, el DMEM se utiliza como medio para favorecer el crecimiento de diferentes tipos de células, incluidas las células primarias, las células madre y las células transformadas. La versión modificada del DMEM también puede utilizarse para diversas aplicaciones de investigación, como el descubrimiento de fármacos, la ingeniería de tejidos y el estudio de las vías de señalización celular.
El DMEM no es un medio completo por sí solo, ya que carece de nutrientes necesarios como proteínas, lípidos o factores de crecimiento. Por lo tanto, debe complementarse con otros componentes, como suero fetal bovino (FBS), aminoácidos y otros nutrientes, para proporcionar un entorno de crecimiento completo y equilibrado a las células en cultivo.
Nuestra selección incluye una gama de concentraciones de glucosa, así como formulaciones con y sin L-glutamina. Disponemos de productos sin el indicador de pH rojo de fenol para aplicaciones sensibles al estrógeno, y nuestra amplia oferta incluye prácticos formatos líquidos listos para usar, así como medios en polvo económicos que facilitan el almacenamiento y prolongan la vida útil.
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DMEM: alto contenido en glucosa frente a bajo contenido en glucosa
El DMEM está disponible en diversas formulaciones, en función de las necesidades específicas de las células que se cultivan y de los objetivos del trabajo experimental. El medio inicial se formuló con un nivel bajo de glucosa, de 1 g/L, adecuado para el cultivo de células sensibles a la glucosa elevada y que podrían no desarrollarse adecuadamente en medios con niveles elevados de este azúcar. Sin embargo, el DMEM con alto contenido en glucosa contiene 4,5 g/L de glucosa y se utiliza habitualmente para el cultivo de células que requieren niveles elevados de glucosa para un crecimiento óptimo.
Medios sin suero (SFM)
El suero es un componente de muchos medios de cultivo celular y se utiliza a menudo para complementar los medios con hormonas, factores de crecimiento y otros nutrientes necesarios para el crecimiento y la proliferación celular. Sin embargo, el suero puede contener impurezas y contaminantes que pueden interferir en los resultados experimentales, y su uso puede plantear cuestiones éticas.
Los medios sin suero están formulados sin suero animal ni otros componentes de origen animal. Estos medios consisten en formulaciones nutricionales y hormonales adecuadas que favorecen el crecimiento y la proliferación de las células en cultivo.
Algunas de las ventajas de utilizar medios sin suero para el cultivo celular son una mayor productividad, una mayor consistencia y una purificación y un procesamiento posterior más sencillos. Los medios sin suero también pueden formularse con combinaciones específicas de factores de crecimiento para determinados tipos de células y objetivos de investigación. Estos medios son adecuados para una amplia gama de aplicaciones de cultivo celular, incluida la producción de proteínas recombinantes, el estudio del crecimiento y la diferenciación celular, la investigación de las vías de señalización celular, la producción de vacunas virales, así como el descubrimiento y desarrollo de fármacos.
Uno de estos medios sin suero es el DMEM con Ham’s F-12, que se utiliza en el crecimiento de células de mamíferos, entre ellas las MDCK, las células gliales, los fibroblastos, las células endoteliales humanas y los fibroblastos de rata. El DMEM contiene altas concentraciones de aminoácidos, glucosa y vitaminas, y el Ham’s F-12 aporta zinc, putrescina, hipoxantina y timidina. Se pueden incluir tampones como el FBS y el HEPES para compensar la pérdida de capacidad tampón.
DMEM con y sin rojo de fenol
El rojo de fenol es un indicador de pH que cambia de color en función de los distintos valores de pH y que suele añadirse al DMEM en una concentración del 0,01-0,03 %. Resulta útil para controlar el pH del medio y garantizar que se mantenga dentro del rango adecuado para el crecimiento y el metabolismo celular.
Algunas células pueden ser sensibles al rojo de fenol o verse afectadas por su presencia en el medio, por lo que también se comercializa DMEM sin rojo de fenol. En algunas aplicaciones posteriores, como el análisis de proteínas o el análisis de la expresión génica, la presencia de rojo de fenol en el medio podría interferir. Para algunas técnicas de imagen, como la microscopía de fluorescencia, también puede ser necesario utilizar DMEM sin rojo de fenol para obtener resultados precisos. El rojo de fenol absorbe la luz del espectro visible y, por lo tanto, puede interferir en la precisión de estas técnicas. La elección entre DMEM con o sin rojo de fenol depende de las necesidades y requisitos específicos de las células que se cultivan y de los objetivos del trabajo experimental.