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Purificación de proteínas de anticuerpos

Los anticuerpos monoclonales y policlonales se utilizan habitualmente en la investigación básica y en el descubrimiento de fármacos. Los productos biológicos basados en anticuerpos también representan una proporción cada vez mayor de los nuevos tratamientos terapéuticos. La cromatografía de afinidad con medios reticulados de proteína A, proteína G y proteína L desempeña un papel fundamental en el aislamiento y la producción de anticuerpos purificados para flujos de trabajo a escala de laboratorio, a escala de proceso y a escala industrial. 


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Perlas de agarosa y geles de afinidad

Las perlas de agarosa y los geles de afinidad permiten la purificación de anticuerpos mediante proteína A o proteína G reticuladas con perlas de agarosa. Ideales para la purificación a pequeña y gran escala, estas resinas son adecuadas para la purificación en columnas de flujo por gravedad, la centrifugación a baja velocidad en procesos por lotes y los procedimientos de cromatografía a baja presión. Los geles de afinidad EZview™ incorporan un colorante rojo que permite al usuario diferenciar fácilmente el sedimento del sobrenadante, lo que se traduce en una menor pérdida de proteínas durante la purificación por lotes. Los kits de inmunoprecipitación incluyen geles de afinidad, columnas mini-spin y reactivo de lisis, y están diseñados específicamente para permitir la máxima recuperación de proteínas a partir de los inmunoprecipitados.

Resinas Fast Flow Sepharose™ y Fast Flow agarosa

Fast Flow Sepharose™ y Fast Flow agarosa utilizan perlas o geles de agarosa altamente reticulados que pueden soportar presiones más altas en comparación con las resinas de perlas de agarosa estándar. Esto hace que estas resinas sean adecuadas para métodos de purificación mediante cromatografía líquida rápida de proteínas (FPLC). Estas resinas se recomiendan para la purificación de anticuerpos a escala media y grande.

Sistema de perlas magnéticas PureProteome™

Las perlas magnéticas PureProteome™ de proteína A, proteína G y proteína A/G ofrecen una forma rápida y reproducible de purificar inmunoglobulinas a partir de mezclas complejas, como muestras de suero, plasma o sobrenadante de cultivos celulares. Los anticuerpos se purifican utilizando un soporte o plataforma magnética para separar las perlas de las fracciones de lavado y elución. Este procedimiento es adecuado tanto para un rendimiento bajo, utilizando tubos de microcentrífuga individuales, como para un rendimiento más elevado mediante automatización.

Columnas y medios cromatográficos Cytiva™ Amersham

Existe una amplia gama de medios cromatográficos Cytiva™ Amersham disponibles para la purificación de anticuerpos monoclonales y policlonales procedentes de diferentes fuentes.

  • Las columnas GraviTrap™ son columnas preempaquetadas de flujo por gravedad diseñadas para la purificación manual rápida y eficaz de anticuerpos monoclonales y policlonales, fragmentos de anticuerpos procedentes del sobrenadante de cultivos celulares y fluidos biológicos.
  • Las columnas SpinTrap™ son columnas de centrifugación preempaquetadas y de un solo uso para la purificación sencilla a pequeña escala de anticuerpos o el enriquecimiento de proteínas específicas.
  • Las columnas HiTrap™ HP están precargadas con resina Sepharose™ de alto rendimiento con proteína A o proteína G para la purificación rutinaria y preparativa de anticuerpos monoclonales y policlonales, como la IgG humana. Las columnas HiTrap™ MabSelect están precargadas con resina MabSelect, un medio de bioprocesamiento para la captura de anticuerpos monoclonales (Mabs) a partir de grandes volúmenes de muestra.
  • Las placas de filtro MultiTrap™ de 96 pocillos ofrecen un formato rápido y fiable para la purificación a pequeña escala de anticuerpos o el enriquecimiento de proteínas de interés mediante placas de filtro prellenadas de 96 pocillos aptas para la centrifugación o la filtración al vacío, ya sea de forma manual o mediante sistemas robóticos automatizados.
  • Las columnas HiScreen™ Capto L vienen precargadas con Capto L, una resina de cromatografía de afinidad para bioprocesos destinada a la captura de anticuerpos y fragmentos de anticuerpos, como fragmentos Fab, fragmentos variables de cadena única (scFv) y anticuerpos de dominio (Dabs). Las columnas HiScreen™ Capto L forman parte de la plataforma de desarrollo de procesos. Estas columnas son una excelente opción para la optimización de métodos y el cribado de parámetros.
  • Las columnas HiScreen™ MabSelect™ están prellenadas con resina MabSelect™ y forman parte de la plataforma de desarrollo de procesos disponible en Cytiva. La resina MabSelect™ es una resina para bioprocesos destinada a la captura de anticuerpos monoclonales a partir de grandes volúmenes de muestra. Estas columnas son una excelente opción para la optimización de métodos y el cribado de parámetros para la captura de anticuerpos monoclonales.
  • Los medios Mag Sepharose™ de proteína A y proteína G están compuestos por perlas magnéticas a base de sefarosa, diseñadas para simplificar el enriquecimiento de proteínas diana mediante aplicaciones de inmunoprecipitación o pull-down, y pueden utilizarse para la purificación y el cribado rápidos y a pequeña escala de anticuerpos monoclonales y policlonales a partir de suero y sobrenadantes celulares.
  • GammaBind y GammaBind Plus Sepharose™ son resinas de cromatografía de afinidad con proteína G para la purificación de inmunoglobulinas (IgG) de diversas especies, y se utilizan para analizar y purificar clases, subclases y fragmentos de inmunoglobulinas a partir de cualquier fluido biológico o medio de cultivo celular. Esta resina es muy adecuada para procedimientos de inmunoprecipitación.
  • Las resinas Sepharose™ de proteína A y proteína G, Sepharose™ Fast Flow, Capto L y MabSelect™ también están disponibles por separado para procedimientos a gran escala.

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