免疫组织化学诊断操作流程

诊断性免疫组化与临床病理学

免疫组化（IHC）作为常规服务的一部分，在普通病理实验室中广泛应用，为临床诊断提供了便捷的分析和诊断工具。尽管临床诊断在很大程度上仍主要依赖于标准组织染色（如苏木精-伊红染色，H&E），但免疫组化在协助病理学家检测疑难病例方面发挥着重要作用。诊断性免疫组化常被用于识别早期细微的形态学或细胞发育变化，如增殖或凋亡。 临床抗体可通过与特定标志蛋白结合来识别个别细胞谱系。由于免疫染色对组织处理、保存及试剂质量较为敏感，这种抗体的特异性也可能导致假阳性或假阴性结果。 临床病理实验室通过遵循既定操作规程和培训计划，同时使用经临床验证的诊断抗体、染色剂和试剂，将检测误差降至最低。特别是，针对关键细胞标志物开发的高特异性单克隆抗体，推动了诊断性免疫组化检测组合在疾病状态的研究与临床识别以及外科病理指导中的应用。

诊断性免疫组化与癌症

通过在活检组织中定位特异性抗原，结合组织学染色和诊断性免疫组化技术，可识别大多数癌症。仅依靠对福尔马林固定组织进行标准H&E染色来确定确切的肿瘤类型可能颇具挑战性，尤其对于转移性及/或分化不良的肿瘤而言。免疫组化提供了一种相对快速简便的方法，有助于更准确地确定肿瘤组织的起源，并研究特定肿瘤的行为或进展。 原发灶不明癌（CUP）是指观察到癌症转移，但原发灶位置不明的病症。据估计，所有癌症病例中约有3%至5%属于CUP。对于形态学和临床数据存在不一致的关键CUP病例及其他非典型病例，免疫组化在缩小诊断备选范围方面发挥着重要作用。 在某些情况下，该技术能为关于癌症表型及原发肿瘤部位的初步诊断提供重要线索。 在免疫组化（IHC）中，免疫染色已被证明是一种便捷的诊断工具，可用于检测多种类型的癌症，包括腺癌（结肠、乳腺、前列腺）和皮肤癌。它常用于结肠癌（HNPCC/林奇综合征）的诊断，以补充微卫星不稳定性（MSI）等传统检测方法——MSI的特征在于某类重复DNA序列中存在大量改变。 在皮肤癌病理学中，仅凭标准H&E染色切片识别表皮内黑色素细胞并不可靠，尤其是在受日光损伤的皮肤上。即使仔细观察，也可能无法清晰区分色素性角质形成细胞与黑色素细胞，或明确界定黑色素细胞密度。因此，许多病理学家建议采用免疫组化（IHC）来区分原位黑色素瘤与其模拟病变。

诊断性免疫组化与病原体

诊断性免疫组化目前可对患者组织样本中的感染进行快速的形态学鉴别，从而有助于在患者诊疗中迅速做出诊断决策。异硫氰酸荧光素（FITC）标记的抗体已被用于检测感染组织中的肺炎球菌抗原。在传染病检测中，免疫组化在识别以下微生物方面非常有用：

• 常规或特殊染色难以检测的微生物
• 染色效果不佳的微生物
• 数量稀少
• 无法培养的

某些诊断性免疫组化方法已应用于乙型肝炎、丙型肝炎及巨细胞病毒感染的病例中，通过使用针对微生物DNA或RNA制备的特异性抗体，在组织中确认病原体。此外，免疫组化还用于多种皮肤感染的检测，以识别仅凭常规显微镜染色难以确切检测的特定病毒和细菌感染。 免疫荧光法（IFA）在人类和兽医医学领域中，已被广泛用于检测未固定组织中的病原体（病毒、细菌或原虫）。