微生物负荷检测

 生物负荷检测基础

生物负荷检测或微生物检测是一种质量控制流程，用于检测和定量分析产品在不同生产阶段（即从初始制造到最终分销）的微生物污染情况。有效的质量控制和准确的检测结果对于最大限度地降低消费者风险至关重要，也是受监管生产环境所必需的。因此，生物负荷分析通常被纳入常规检测中，以确保每批生产产品的安全性、质量及符合监管要求。

生物负荷检测适用于医疗器械、药品、食品和饮料、水、包装材料、原材料、人体组织、动物组织以及化妆品。在遵循下文所述的标准方法时，必须确保检测方法不会将细菌引入待测样品，也不会杀死待测样品中的细菌。

• 生物负荷检测的膜过滤法
• 生物负荷检测的直接接种法
• 微生物负荷检测中的最可能数（MPN）法

生物负荷检测的膜过滤法 

对于含有抗菌物质的产品，膜过滤是首选方法。该方法中，样品通过孔径为0.45 µm的膜过滤器。膜作为屏障，可截留大于膜孔径的微生物。过滤过程中可使用真空以加快速度。 随后将滤膜转移至培养基中，并置于培养箱内：细菌检测时在30–35 °C下培养至少5天，真菌检测时在20–25 °C下培养至少5天。对培养物进行计数，以确定样品中的微生物污染水平。应采取适当措施，避免可能导致假阳性结果的交叉污染。

生物负荷检测的直接涂布法

生物负荷检测的直接涂布法包括倾注法和涂布法。由于倾注法具有更高的理论准确度，因此更受青睐。在倾注法中，将灭菌培养基加入装有待测样品的培养皿中，待其凝固。相反，在涂布法中，将样品加入装有无菌、已凝固培养基的培养皿中。 无论采用哪种方法，在将样本加入培养系统后，均需对培养皿进行培养，并计数所得菌落。

生物负荷检测中的最可能数（MPN）法

最可能数（MPN）法是一种用于确定样品中细菌近似浓度的定量方法。将原始溶液或样品按数量级（通常为10倍或2倍）分装到培养基中，并检测其中是否存在微生物。MPN法的缺点在于，为了缩小置信区间，需要在适当的稀释度下进行大量重复试验。 此外，该方法仅适用于细菌检测，对于真菌计数无法提供可靠的结果。