product line
Duolink®
Quality Level
technique(s)
immunofluorescence: suitable, proximity ligation assay: suitable
suitability
suitable for brightfield, suitable for fluorescence
shipped in
wet ice
storage temp.
−20°C
Application
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特异性
Duolink® In Situ Probemaker 通过允许您创建自己的 PLA 探针来满足特定的检测要求，从而进一步扩展了您的可能性。
- 研究同源二聚体
- 研究来源于同一物种的两种一抗的蛋白质-蛋白质相互作用
- 研究与任何物种一抗的蛋白质-蛋白质相互作用
使用 Duolink®原位 Probemaker 加号、减号探针，您只需将加号、减号寡核苷酸臂直接偶联到您的抗体上，即可快速方便地操作。除了提供独特的功能，这也意味着在执行 Duolink ® 原位检测时，您的一抗必须来自于哪个物种不再有任何限制。
应用说明
待偶联抗体的浓度必须为 1 mg/mL。不得使用大于 20 mL 的体积进行偶联。抗体必须在无胺缓冲液中，理想的 PBS。缓冲液应不含载体，但可能含有 0.1%BSA、5% 海藻糖和 0.02% 叠氮化钠。
- 使用分成两半的单克隆抗体研究同源二聚体。一个用加性寡核苷酸标记，另一个用负性寡核苷酸标记。
- 使用来自相同种属的抗体：使用来自相同种属的两种一抗研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质修饰或单一蛋白质。用正寡核苷酸标记其中一种抗体，用负寡核苷酸标记另一种抗体
- 使用来自任何物种的抗体：研究蛋白质-蛋白质相互作用、蛋白质修饰或单一蛋白质，使用来自小鼠、兔或山羊以外物种的一种或两种一抗。用正寡核苷酸标记您的一个二抗，用负寡核苷酸标记另一个二抗。或者，将一种标记的二抗与标准二抗 Duolink®原位 PLA 探针结合。
在标准免疫荧光 (IF)、免疫组织化学 (IHC) 或免疫细胞化学 (IHC) 分析中测试您的初级抗体（IgG类、单克隆或多克隆），以确定最佳固定、阻断和滴度条件。Duolink® 原位试剂适用于固定细胞、细胞离心涂片器细胞、载玻片上生长的细胞、福尔马林固定的、石蜡包埋 (FFPE) 或组织（新鲜或冷冻）。没有要求最小数量的细胞。
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Features and Benefits
- 不需要过度表达或基因操作
- 高特异性（假阳性更少）
- 滚环扩增导致的单分子灵敏度
- 相对量化是可能的
- 不需要特殊设备
- 比FRET更快更简单
- 与co-IP相比，准确性更高
- 可发布的结果
Other Notes
遵照 Duolink ®原位 Probemaker 方案 使用 Duolink ®原位探针制造商 PLUS 和 MINUS。本产品可应用于 Duolink ® 原位荧光方案 和 Duolink ® 原位明场方案 ，具体取决于使用的检测试剂。有关详细信息，请参阅 创建您自己的 (PLA ®) 探测 。
请访问我们的Duolink® PLA资源中心了解如何运行Duolink®实验、应用、故障排除等信息。
- Duolink ® In Situ 寡核苷酸 MINUS– 一瓶冻干的活化 MINUS 寡核苷酸，用于 20 μg 抗体的一次偶联
- 偶联缓冲液 – 用于偶联反应的缓冲液
- 终止试剂-终止偶联反应
- 保存液 – 保存制备的 PLA 探针的缓冲液（偶联抗体）
- 20x 检定试剂– 加入实验者优化抗体稀释液的试剂
- 封闭液-使用 Duolink ® 进行原位染色前，封闭样本
- PLA 探针稀释液-用于将 PLA 探针（结合抗体）稀释至最终试验浓度的缓冲液
Legal Information
signalword
Warning
hcodes
Hazard Classifications
Aquatic Chronic 2 - Skin Sens. 1
存储类别
10 - Combustible liquids
wgk
WGK 3
实验方案
Duolink®试剂盒使用原位PLA®技术（一种邻位连接检测技术）准确、客观地量化单个蛋白质，以及这些蛋白在未修饰细胞和组织中的互作和修饰。
Duolink® kits use in situ PLA® technology for accurate quantification of individual proteins, interactions, and modifications in cells and tissue.
商品
Support information including tips and tricks, frequently asked questions, and basic troubleshooting.
Things to consider for preparation, setup and execution of the Duolink® assay protocol
包括建议和技巧、常见问题解答和基本故障排除的支持信息。
相关内容
Applications to detect, quantify and visualize protein-protein interactions, post-translational modifications and low expression protein detection using proximity ligation assay
利用邻位连接技术对蛋白质互作、翻译后修饰和低表达蛋白进行检测、定量和成像应用。
Instructions