Base de nitrógeno de levadura sin aminoácidos

La base nitrógeno de levadura es un medio de crecimiento muy citado utilizado para el cultivo de levaduras. Este caldo microbiológico rico en nutrientes contiene nitrógeno, vitaminas, oligoelementos y sales.

La base nitrógeno de levadura se considera ideal para cultivar levaduras naturales. Se sabe que la presencia de aminoácidos evita la utilización de un marcador seleccionable. Por consiguiente, estos medios se formulan sin aminoácidos y son útiles para la clonación y la manipulación de cromosomas artificiales de levadura.

Idóneo para utilizar en la clasificación de las levaduras en función de sus requisitos de aminoácidos y carbono. Puede ser necesario añadir aminoácidos y una fuente de carbono (normalmente glucosa).

Se ha utilizado base de nitrógeno de levadura sin aminoácidos:

• en los medios de mezcla de suplemento sintético completo (SC)-Leu utilizados para el cultivo y la caracterización
• de Y. lipolytica como componente de los medios líquidos selectivos para el crecimiento auxótrofo de uracilo en levaduras
• para evaluar las eficiencias de transformación de las cepas de S. cerevisiae, bajo diferentes condiciones de nutrientes

1. Prepare una disolución madre x10 suspendiendo 6,7 g de base de nitrógeno de levadura, 5 g de glucosa o una cantidad equivalente de otros carbohidratos, y 5-10 mg del aminoácido deseado en 100 ml de agua destilada.
2. Caliente si es preciso solubilizar y esterilice mediante filtración.
Almacene la disolución madre x10 a 2-8 °C. Para utilizarla, diluya 1:10 con agua destilada estéril en condiciones asépticas.

Componente, cantidad (μg/l, salvo que se indique otra cosa)

Fuentes de nitrógeno:
Sulfato de amonio, 5,0 g/l

Vitaminas:
Biotina, 2,0
Pantotenato de calcio 400
Acido fólico, 2,0
Inositol, 2,0 mg/l
Ácido nicotínico, 400
Acido p-aminobenzoico, 200
HCl de piridoxina, 400
Riboflavina, 200
HCl de tiamina, 400

Oligoelementos:
Ácido bórico, 500
Sulfato de cobre, 40
Yoduro de potasio, 100
Cloruro férrico, 200
Sulfato de manganeso, 400
Molibdato de sodio, 200
Sulfato de cinc, 400

Sales:
Fosfato de potasio monobásico, 1,0 g/l
Sulfato de magnesio, 0,5 g/l
Cloruro de sodio, 0,1 g/l
Cloruro calcio, 0,1 g/l