Análisis del estado de las células

Ensayos de viabilidad y proliferación celular

Los ensayos para medir la proliferación y la viabilidad celular se utilizan para supervisar la respuesta y el estado de las células en cultivo tras el tratamiento con diversos estímulos. La elección adecuada de un método de ensayo depende del número y el tipo de células que se vayan a evaluar, así como del resultado esperado. Los ensayos de proliferación celular pueden supervisar el número de células a lo largo del tiempo, el número de divisiones celulares, la actividad metabólica o la síntesis de ADN. El recuento celular mediante colorantes de viabilidad, como el azul de tripano o la calceína-AM, puede proporcionar tanto la tasa de proliferación como el porcentaje de células viables. El 5(6)-carboxifluoresceína diacetato N-succinimidil éster (CFSE) (21888, SCT110) es una opción muy utilizada para medir el número de divisiones celulares que ha experimentado una población. Al entrar en la célula, el CFSE es escindido por las esterasas intracelulares para formar el compuesto fluorescente, y el grupo éster succinimidílico reacciona covalentemente con las aminas primarias de las proteínas intracelulares. En cada división, la intensidad de fluorescencia de cada célula hija se reduce a la mitad, lo que permite detectar fácilmente el número de divisiones celulares mediante citometría de flujo.

Ensayos de citotoxicidad

Los ensayos que miden la actividad metabólica son adecuados para analizar la proliferación, la viabilidad y la citotoxicidad. La reducción de sales de tetrazolio, como el MTT y el XTT, a compuestos de formazán coloreados, o la biorreducción de la resazurina (R7017, TOX8), solo se produce en células metabólicamente activas. Las células que proliferan activamente aumentan su actividad metabólica, mientras que las células en estado de estrés, como las expuestas a toxinas, mostrarán una actividad reducida.

Ensayos de apoptosis

La muerte celular es necesaria para muchas funciones fisiológicas normales, tanto en el desarrollo como en la homeostasis. La capacidad de las células tumorales para eludir la muerte celular programada, también conocida como apoptosis, es una característica distintiva de la mayoría de los tipos de cáncer. Una amplia variedad de proteínas celulares, entre las que se incluyen receptores de superficie celular, adaptadores, proteasas y componentes mitocondriales, regulan un delicado equilibrio entre la supervivencia celular y la muerte por apoptosis. Una selección cuidadosa de los ensayos puede ayudar a analizar no solo los efectos de las condiciones de cultivo celular y los tratamientos sobre la salud celular, sino también los mecanismos mediante los cuales estos afectan a dicha salud. Ofrecemos una gama completa de productos de ensayo para la detección de la apoptosis en sus fases temprana, intermedia y tardía.

Detección y eliminación de la contaminación celular

El mantenimiento de cultivos celulares libres de contaminación es fundamental para la investigación basada en células. Uno de los problemas más habituales en los cultivos celulares es la contaminación por micoplasmas, un género de bacterias cuya morfología se caracteriza por un tamaño inferior a la micra y la ausencia de pared celular, lo que hace que estas bacterias sean difíciles o imposibles de detectar mediante microscopía y resistentes a muchos antibióticos. Aunque los micoplasmas no suelen provocar la muerte celular, son responsables de diversos efectos en las células cultivadas, entre los que se incluyen la desregulación del metabolismo, la reducción de la proliferación y las aberraciones cromosómicas. En resumen, la contaminación por micoplasmas compromete la validez de las líneas celulares afectadas a la hora de proporcionar datos significativos para la investigación en ciencias de la vida.