Pruebas de esterilidad

Los procedimientos de pruebas de esterilidad se aplican a productos de muchas industrias, incluidos los fabricantes de alimentos y bebidas, pero las principales industrias son los sectores farmacéutico y médico, donde las pruebas de esterilidad de los productos siguen siendo una tarea vital y rutinaria para los microbiólogos.

• Métodos de prueba de esterilidad farmacéutica
• Métodos de pruebas de esterilidad para dispositivos médicos
• Sterility Testing Workflow

Pharmaceutical Sterility Testing Methods

Los métodos del compendio para las pruebas de esterilidad de productos farmacéuticos requieren que las muestras se cultiven en dos medios distintos. En las pruebas de esterilidad se utilizan dos tipos diferentes de medios de cultivo para promover el crecimiento de anaerobios residuales, así como de aerobios y hongos. El medio de tioglicolato fluido (FTM) se utiliza normalmente para cultivar bacterias anaerobias y algunas aerobias, mientras que el medio de digestión de caseína de soja (SCDM) se utiliza normalmente para cultivar hongos y bacterias aerobias. Las muestras se incuban durante 14 días a 32,5 °C y 22,5 °C, respectivamente, antes de su examen. Cualquier turbidez en los medios de cultivo puede indicar crecimiento y debe investigarse. Existen dos métodos recomendados para las pruebas de esterilidad de los productos farmacéuticos: la filtración por membrana y la inoculación directa.

Pruebas de esterilidad por filtración de membrana

Las pruebas de esterilidad por filtración de membrana son el método reglamentario de elección para productos farmacéuticos filtrables, como se cita en la USP <71>, la Farmacopea de la UE < 2.6.1>, y la Farmacopea JP <4.06>. Las muestras se pasan a través de un filtro de membrana de 0,45 µm en un bote de filtración y se añade medio de cultivo para la incubación. Este método de prueba de esterilidad puede proporcionar una mayor sensibilidad en comparación con otros métodos, ya que toda la muestra, o una muestra compuesta, pasa a través de un único filtro. La filtración también ofrece la oportunidad de eliminar componentes de la muestra que puedan causar turbidez o inhibir el crecimiento, como antibióticos o conservantes.

Pruebas de esterilidad por inoculación directa

En la inoculación directa, se extrae asépticamente un pequeño volumen de muestra de la unidad de muestra y se inocula directamente en un volumen adecuado de medio de cultivo antes de la incubación. Aunque sencillo, este método de ensayo puede tener algunas limitaciones significativas. Sólo pueden inocularse pequeños volúmenes de producto en el medio de cultivo, lo que limita la sensibilidad de la prueba. Si la muestra aparece turbia o turbia después de la inoculación, puede ser difícil detectar la turbidez del crecimiento microbiano al final del período de incubación. Además, si el producto tiene propiedades antimicrobianas, la muestra debe neutralizarse para que no se inhiba el crecimiento microbiano.

Métodos de prueba de esterilidad para dispositivos médicos

Se recomienda la prueba de esterilidad por transferencia directa para la prueba de esterilidad de dispositivos médicos. El dispositivo a probar está en contacto directo con los medios de prueba durante todo el período de incubación, durante el cual cualquier microorganismo dentro o sobre el dispositivo crecerá y proliferará. Además, las pruebas de esterilidad por lavado del producto son preferibles para productos con tubos huecos, como los conjuntos de transfusión e infusión, en los que la vía del fluido está etiquetada como estéril. El lumen del producto se lava con un fluido de enjuague, el eluido se filtra por membrana y se coloca en un medio adecuado para la incubación.

Flujo de trabajo de la prueba de esterilidad

1. Preparación de la prueba. Preparación de la prueba-Coloque el tubo del dispositivo de filtración por membrana en la bomba

2. Prehumectación del filtro-Humedezca el dispositivo de filtración por membrana para optimizar la filtración y minimizar la unión del producto al filtro.

3. Filtración de la muestra-Filtre una cantidad igual de producto en ambos recipientes. Los microorganismos son retenidos por un filtro con un tamaño de poro de 0,45 µm.

4. Enjuague-Todos los compuestos inhibidores se enjuagan utilizando una(s) solución(es) de enjuague adecuada(s)

5. Llenado de medios de cultivo-Los dispositivos de filtración de membrana se llenan con medios de cultivo estériles TSB y FTM.

6. Tiempo de incubación-14 días.

7. Resultados finales de la prueba-Verificación visual de turbidez/sin turbidez.

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