Anti-GAPDH Antibody

El gen GAPDH (gliceraldehído-3- fosfato deshidrogenasa) se ha cartografiado en el cromosoma humano 12p13.3 y codifica un tetrámero que contiene cadenas idénticas. La enzima se conoce comúnmente como enzima glucolítica y contiene un sitio de unión para el NAD⁺( difosfato de nicotinamida y adenina) y el gliceraldehído-3-fosfato. La GAPDH contribuye al 10-20% de la proteína celular total y se considera que está evolutivamente conservada.

Péptido sintético correspondiente a los aminoácidos de la GAPDH de ratón conjugados con KLH a través del resto N-terminal de cisteína. La secuencia correspondiente es idéntica en la rata y difiere en dos aminoácidos en los humanos.

El anticuerpo anti-GAPDH producido en conejo es adecuado como anticuerpo primario para inmunoelectrotransferencia utilizando:

• extracto de células cancerosas humanas
• extracto de tejido muscular de ratones añosos con sarcopenia
• trabéculas o muestras del miocardio del corazón de ratones
• fibroblastos embrionarios de ratón

Es adecuado para inmunoprecipitación utilizando lisados de células NIH3T3 de ratón con 5-10μg, para inmunofluorescencia indirecta con células NRK de rata a una concentración de trabajo de 5-10μg/ml. También es adecuado para transferencias western a una concentración de trabajo de 0,1-0,2μg/ml utilizando un extracto completo de células HeLa humanas.

El anti-GAPDH reconoce a la GAPDH humana, de ratón y de rata.

La enzima gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa cataliza la fosforilación oxidativa reversible del gliceraldehído-fosfato en presencia de fosfato inorgánico y NAD, que es una etapa crucial de producción de energía en el metabolismo de los carbohidratos. Se une a varias proteínas, como la actina, la tubulina, el precursor amiloide, los péptidos de poliglutamina, DRPLA (atrofia dentatorubro-pálidoluisiana) y la huntingtina. La GAPDH forma parte de OCA-S, el complejo coactivador multicomponente OCT1 (factor de unión al motivo octámero), que interviene en la transcripción de la histona H2B dependiente de la fase S. Esta asociación es responsable de vincular la maquinaria transcripcional de la H2B con la regulación del ciclo celular y el estado metabólico de la célula. En respuesta al estrés oxidativo, la GAPDH induce apoptosis.

Disolución en solución salina tamponada con fosfato 0,01 M, pH 7,4, que contiene acida sódica 15 mM.

Para su uso continuo, debe conservarse entre 2 y 8 °C durante un máximo de un mes.
Para una conservación prolongada, congelar en alícuotas de trabajo. No se recomienda la congelación y descongelación repetidas o la conservación en congeladores “frost free”. Si aparece una turbidez ligera tras una conservación prolongada, clarifique la disolución centrifugándola antes de usarla. Las diluciones de trabajo deben desecharse si no se utilizan en 12 horas.

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