Tinciones de gel para electroforesis de proteínas

Fixing Solutions

Después de la electroforesis en gel, las proteínas son típicamente "fijadas" en el gel para prevenir la dispersión de las proteínas antes de la tinción. Algunas tinciones de geles contienen productos químicos que evitan la necesidad de fijar los geles antes de la tinción.

Colorimetric Protein Gel Stains

• Coomassie Brilliant Blue se utiliza para teñir proteínas en geles de poliacrilamida a través de interacciones electrostáticas con los grupos amino y carboxilo de las proteínas.
• ReadyBlue™ Protein Gel Stain es una tinción de Coomassie coloidal rápida y sensible para geles de poliacrilamida que se suministra como solución lista para usar, lo que permite un protocolo más rápido y simplificado. ReadyBlue™ puede visualizarse mediante métodos colorimétricos o de fluorescencia IR.  Esta formulación segura no contiene disolventes orgánicos ni ácido fosfórico y puede reutilizarse hasta 3 veces. Se ha demostrado una sensibilidad de hasta 2 ng por banda con ReadyBlue™.
• EZBlue™ Gel Staining Reagent es una tinción coloidal de proteínas Coomassie Brilliant Blue G-250 cómoda, sensible y segura que mejora los resultados de la electroforesis de proteínas a la vez que reduce significativamente el tiempo de tinción. Como colorante coloidal, reacciona sólo con las proteínas, no con el gel en sí. La tinción de fondo se reduce, por lo que las bandas de proteínas pueden visualizarse casi inmediatamente en geles de poliacrilamida y membranas de PVDF. No se requiere ningún paso para eliminar la tinción, aunque un lavado con agua puede intensificar las bandas y aclarar el fondo. El reactivo EZBlue™ es extremadamente sensible, detectando tan solo 5 ng de proteína.
• El kit de detección reversible de proteínas es un sistema de detección único diseñado para la tinción de proteínas en membranas de nylon, nitrocelulosa y PVDF o geles PAGE con una sensibilidad de detección similar a la de las tinciones de Coomassie. La mayoría de las otras tinciones producen altos fondos en membranas de nylon debido a las fuertes interacciones de carga con la membrana. La tinción es fácilmente reversible con una solución de EDTA, de modo que el blot puede reutilizarse para Western blotting o para el análisis de secuencias de aminoácidos.
• El colorante negro azul de naftol puede utilizarse para teñir proteínas en geles de poliacrilamida, geles de agarosa y membranas de nitrocelulosa. Tras la electroforesis, se recomienda fijar las proteínas en el gel. A continuación, se tiñe el gel con 0,1% de Naphthol Blue Black en ácido acético al 7% (v/v) durante al menos 2 horas y se desmancha con una solución de ácido acético al 7% (v/v). La sensibilidad de detección es aproximadamente el 20% de la de Coomassie Blue
• Proporcionando la mayor sensibilidad, el ProteoSilver™ Silver Stain Kit tiene una sensibilidad de ≥0,1 ng de proteína por banda con un tiempo de incubación de 3-12 minutos. Esta tinción se recomienda para proteínas de muy baja abundancia y es compatible con aplicaciones MALDI-TOF.

Tinciones fluorescentes de proteínas en gel

• EZFluor™. 1-step Fluorescent Protein Gel Stain es una tinción fluorescente de proteínas en gel lista para usar que solo requiere un único paso de tinción de 5-30 minutos sin fijación y puede detectar tan solo aproximadamente 1-10 ng de proteína por banda. La tinción es totalmente compatible con la espectrometría de masas y la secuenciación basada en Edman.
• EZFluor™ UV 1-step Fluorescent Protein Gel Stain es una tinción de gel de proteínas lista para usar diseñada para la obtención de imágenes mediante un transiluminador UV y un filtro de bromuro de etidio compatible con la espectrometría de masas.
• SYPRO^® Ruby protein gel stain es una tinción fluorescente ultrasensible, lista para usar, para la detección de proteínas separadas por electroforesis en gel de poliacrilamida (PAGE). Esta tinción, diseñada especialmente para su uso en PAGE 2-D, ha demostrado ser también una excelente opción para PAGE 1-D y geles de enfoque isoeléctrico (IEF). SYPRO^® Ruby protein gel stain alcanza una sensibilidad comparable a la de muchas técnicas de tinción con plata. 
• SYPRO^® Orange es similar a SYPRO^® Red, aunque es algo más brillante y proporciona una fluorescencia de fondo ligeramente superior. El colorante se excita eficazmente con iluminación UV o de banda ancha. No es adecuado para teñir proteínas en blots o en geles IEF y muestra una sensibilidad reducida al teñir proteínas en geles bidimensionales.

De-staining Reagents

• CoZap se utiliza para la eliminación rápida de la tinción azul Coomasie. La exclusiva almohadilla CoZap se coloca directamente en la cubeta de desmanchado y absorbe todo el tinte libre en la solución, eliminando la necesidad de cambiar la solución de desmanchado.