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Análisis de fármacos Enzimas

Enzimas β-glucuronidasa y sulfatasa para el análisis de fármacos

La mayoría de los fármacos, hormonas y xenobióticos son metabolizados por el organismo humano y animal en moléculas hidrófilas y luego excretados rápidamente en los fluidos corporales, principalmente en la orina. Estos fármacos y moléculas conjugados se conjugan principalmente con glucurónidos o sulfatos (glucuronogonjugados y sulfoconjugados). En los seres humanos, la glucuronidación es la principal vía metabólica de fase II. Los conjugados son difíciles de detectar y cuantificar mediante instrumentos cromatográficos, cromatografía de gases (GCMS) y cromatografía de líquidos (LCMS). La hidrólisis con betaglucuronidasa y/o sulfatasa rompe los enlaces conjugados y devuelve los fármacos, hormonas y xenobióticos a su forma libre inicial. Los analitos liberados son fácilmente "visibles" y medibles por los instrumentos de laboratorio para el cribado o la cuantificación.  

Las enzimas betaglucuronidasas han estado disponibles para las industrias de las ciencias de la vida y el diagnóstico durante más de cinco décadas, extraídas principalmente de las vísceras de diferentes animales (Helix pomatia o Haliotis rufescens), o de fuentes bacterianas (E. coli). Desde 2015, se ha producido un cambio hacia las betaglucuronidasas recombinantes en toxicología analítica y pruebas rutinarias de drogas en orina. Debido a la mejora de la calidad analítica, la facilidad de preparación de las muestras, la reducción del tiempo de incubación y la capacidad de automatización, nuestras enzimas beta-glucuronidasas recombinantes (SRE0093, SRE0095) se utilizan cada vez más en múltiples campos de aplicación como enzima analítica. 


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Campos de Aplicación para Beta-Glucuronidasa y Sulfatasas como Enzimas Analíticas

El Análisis de Drogas en la Orina (UDT) es la principal aplicación rutinaria para la beta-glucuronidasa y la sulfatasa. Las enzimas utilizadas en UDT se aplican a diferentes tipos de pruebas:

  • Pruebas forenses de detección de drogas (justicia penal)
  • Pruebas antidopaje en humanos (deportes de competición)
  • Antidopaje en animales (carreras de competición)
  • Pruebas de exposición a xenobióticos (exposición ambiental)
  • Monitorización de medicamentos de prescripción y terapéuticos (cumplimiento y ensayos complementarios)

HIDRÓLISIS CON ENZIMAS

Rangos óptimos de pH de las enzimas glucuronidasas de fuentes comunes

Figura 1.Intervalos óptimos de pH para una variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.

La hidrólisis eficiente y completa de los metabolitos glucurónido y sulfato es crucial para el análisis de drogas en orina, particularmente cuando se necesita cuantificación. Una larga historia de investigación académica ha encontrado muchas formas de beta-glucuronidasa y sulfatasa en la naturaleza, cada una con propiedades específicas. Uno de los parámetros que más influyen en la actividad enzimática es el pH. Para ayudarle con sus necesidades de selección de enzimas, consulte nuestra tabla de intervalos óptimos de pH con una lista de pH óptimos para la variedad de enzimas glucuronidasas de fuentes comunes.

Nuestras instalaciones llevan fabricando beta-glucuronidasas nativas y recombinantes desde 1960. Todas nuestras beta-glucuronidasas y arilsulfatasas se producen dentro del sistema de calidad ISO9001. Seguimos dedicando nuestro esfuerzo en hacer que la hidrólisis sea más rápida, fácil de implementar y lista para usar.


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