Método analítico: Urea en el agua y las aguas residuales, determinación enzimática

Reactivo 1:
Disuelva 1,5 g de fosfato de trisodio dodecahidratado, 0,5 g de dihidrogenfosfato de sodio monohidratado y
1,5 g de Titriplex^® III en 100 ml de agua para análisis.

Reactivo 2:
Ureasa

Reacción:
La ureasa hace que se libere amonio de la urea; el amonio se puede determinar fotométricamente de acuerdo con el método del azul de indofenol. Cuando el amonio está presente en la muestra, se pueden utilizar la determinación de la suma y la determinación de la concentración de amonio para calcular la concentración de urea.

Intervalo de medida:
0,5 - 25,0 mg/l de urea a 690 nm en la cubeta redonda de 16 mm

Análisis:
A 5,0 ml de la disolución de la muestra añada 2 gotas de reactivo 1 y 1 gota de reactivo 2, y mezcle; deje reposar durante 5 min. Tome 0,50 ml de esta disolución para la determinación del amonio mediante el ensayo de amonio en cubeta Spectroquant^®.

Lista de parámetros para programar los fotómetros Spectroquant^® NOVA 60, Pharo 100 y Pharo 300

Lista de parámetros para programar los fotómetros Spectroquant^® Prove 100, Prove 300 y Prove 600

Cálculo cuando se mide el valor de la absorbancia utilizando los fotómetros sin programar el método en la memoria del instrumento:

Diferenciación entre urea y amonio:

A. Medición de la concentración de amonio sin añadir los reactivos 1 y 2: Valor de la medida A en mg/l de NH₄⁺ (utilizando el método para el ensayo de amonio en cubeta Spectroquant^®)
= Valor de la medida A en mg/l de NH₄
 
B. Medición de la suma de amonio + urea después de añadir los reactivos 1 y 2: Valor de la medida B en mg/l de NH₄⁺ (utilizando la lista de parámetros para programar los instrumentos NOVA 60, Prove y Pharo
= valor de la medida B en mg/l de urea
 
C. Cálculo de la concentración de urea:
concentración de urea en mg/l de urea = B - (A x 1,66)