HEPES

L'HEPES, aussi connu sous le nom d'acide 4-(2-hydroxyéthyl)pipérazine-1-éthane-sulfonique, est un tampon zwittérionique du type acide aminosulfonique N-substitué. Il est efficace de pH 6,8 à 8,2, grâce à son pKa de 7,48 à 25 °C. Reconnu comme l'un des meilleurs tampons polyvalents, notamment dans la recherche en biologie cellulaire, en biochimie et en biologie, l'HEPES est un tampon ionique dipolaire et l'un des tampons de Good qui ne forme pas de complexes majeurs avec la plupart des ions métalliques. Cette propriété permet de l'utiliser comme tampon coordinateur dans les solutions contenant des ions métalliques.

Largement utilisé en culture cellulaire, l'HEPES excelle dans le maintien d'un pH physiologique malgré les fluctuations de la concentration en dioxyde de carbone dues à la respiration cellulaire, un aspect moins marqué dans les tampons bicarbonate. Il sert de séparateur ampholyte pour créer des gradients de pH en focalisation isoélectrique et interfère moins avec les réactions des enzymes de restriction que les tampons avec moins de groupements amine substitués comme le Tris. Outre ces applications, l'HEPES peut être utilisé dans différentes études biologiques et biochimiques, notamment en immunoprécipitation, dans la lyse cellulaire et dans l'imagerie de cellules vivantes. Sa polyvalence en fait un outil indispensable dans différentes applications de recherche.

L'HEPES a été décrit comme l'un des meilleurs tampons polyvalents disponibles en recherche biologique. Aux pH biologiques, la molécule est zwittérionique et possède des propriétés tampon de pH 6,8 à pH 8,2. L'HEPES est utilisé dans une grande variété d'applications, incluant la culture de tissus. Il sert généralement à tamponner les milieux de culture cellulaire exposés à l'air. L'HEPES est employé dans des expériences in vitro sur le Mg.

L'HEPES a été utilisé :

• Comme constituant du milieu de Danieau, qui est utilisé pour prévenir la formation de pigment de mélanine post gastrulation chez l'embryon de poisson-zèbre
• Comme constituant de la solution de Hanks utilisée dans les tests de dégradation du fer
• Comme constituant du milieu HEPES utilisé en transfection de cultures cellulaires avec des plasmides
• Avec le RPMI-1640, la L-glutamine, le FBS, le pyruvate de sodium et le β-mercaptoéthanol pour la culture de cellules d'insulinomes de rat
• En tant que supplément au milieu TCM199 pour laver les ovocytes frais requis pour des études de transfert nucléaire

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