Kits de dosage immuno-enzymatique (ELISA)

ELISA en sandwich, ELISA direct et ELISA compétitif

Nos tests ELISA constituent une méthode pratique et conviviale pour étudier les biomarqueurs protéiques solubles dans diverses matrices, notamment le sérum, le plasma, le surnageant de culture cellulaire ou le lysat. Notre gamme de tests ELISA comprend plus de 1 000 tests à usage exclusif de recherche, couvrant une grande variété d'espèces, notamment l'humain, la souris, le rat et divers autres modèles animaux (animaux d'élevage et de compagnie). Chaque test est accompagné d'un protocole spécifique et des réactifs nécessaires pour réaliser un essai sur une plaque à 96 puits. Les tests ELISA se présentent principalement sous un format à 96 puits, le fournisseur fournissant les réactifs nécessaires pour détecter et quantifier la cible. Il existe diverses méthodes ELISA, notamment les tests sandwich, directs et compétitifs.

Le test sandwich utilise une paire d'anticorps monoclonaux (mAb) dirigés contre différents épitopes de la même cible. Le mAb primaire, lié à la plaque, capture la protéine dans la solution, tandis que le second mAb est utilisé pour compléter le « sandwich » et fournir le signal indiquant la présence de la cible. Une quantité connue de la version recombinante de la protéine est fournie avec le kit, ce qui permet à l'utilisateur de créer une courbe étalon à partir de laquelle le signal provenant de l'un des échantillons sera interprété. La majorité de notre gamme se présente sous ce format ELISA sandwich.

Les tests ELISA directs et compétitifs sont plus rares. Le test direct utilise un seul anticorps monoclonal pour détecter l'échantillon lié à la plaque. L'anticorps monoclonal est ensuite lié par un anticorps secondaire rapporteur afin de fournir le signal.

Dans le test compétitif, une quantité connue du biomarqueur est pré-liée à la plaque. Un anticorps marqué est co-incubé avec l'échantillon, ce qui « capte » l'anticorps en fonction de la concentration de la cible dans l'échantillon. L'anticorps libre peut alors se lier à l'antigène sur la plaque et fournir un signal après le lavage de l'échantillon. Dans ce cas, le signal est inversement proportionnel à la concentration du biomarqueur cible.

Tests ELISA Conferma^® et logiciel d'ajustement de courbes d'immunoessais Belysa^®

La gamme de tests ELISA Conferma^® comprend des tests de type sandwich conçus pour minimiser la variabilité d'un lot à l'autre au niveau des réactifs critiques, une préoccupation majeure des utilisateurs de ces tests. L'évaluation des lots individuels de réactifs critiques à l'aide d'une gamme de techniques analytiques alignées sur un protocole détaillé de contrôle qualité (QC) nous permet de contrôler et de limiter la variabilité dans le temps.

Afin de permettre aux scientifiques d'évaluer la reproductibilité de leur méthode, nous avons également conçu le logiciel d'ajustement de courbes d'immunoessais Belysa®. Grâce à cet outil, l'utilisateur peut examiner son immunoessai de type sandwich pour s'assurer que des paramètres tels que le %CV (coefficient de variation) et le % de récupération correspondent aux attentes. Il peut ensuite comparer les courbes étalons de plusieurs plaques pour confirmer la cohérence de sa méthode.