Purification des protéines d'anticorps

Perles d'agarose et gels d'affinité

Les billes d’agarose et les gels d’affinité permettent la purification d’anticorps à l’aide de protéine A ou de protéine G réticulées sur des billes d’agarose. Adaptées à la purification à petite comme à grande échelle, ces résines conviennent à la purification par colonne à écoulement par gravité, à la centrifugation à faible vitesse en traitement par lots et aux procédures de chromatographie à basse pression. Les gels d'affinité EZview™ contiennent un colorant rouge qui permet à l'utilisateur de distinguer facilement le culot du surnageant, ce qui réduit la perte de protéines lors de la purification par lots. Les kits d'immunoprécipitation comprennent des gels d'affinité, des mini-colonnes de centrifugation et un réactif de lyse ; ils sont spécialement conçus pour permettre une récupération maximale des protéines issues des immunoprécipités.

Résines Fast Flow Sepharose™ et Fast Flow agarose

Les résines Fast Flow Sepharose™ et Fast Flow agarose utilisent des billes ou des gels d’agarose hautement réticulés, capables de résister à des pressions plus élevées que les résines à billes d’agarose standard. Cela rend ces résines adaptées aux méthodes de purification par chromatographie liquide rapide des protéines (FPLC). Ces résines sont recommandées pour la purification d’anticorps à moyenne et grande échelle.

Système de billes magnétiques PureProteome™

Les billes magnétiques PureProteome™ Protein A, Protein G et Protein A/G offrent un moyen rapide et reproductible de purifier les immunoglobulines à partir de mélanges complexes tels que des échantillons de sérum, de plasma ou de surnageant de culture cellulaire. Les anticorps sont purifiés à l’aide d’un portoir ou d’une plateforme magnétique permettant de séparer les billes des fractions de lavage et d’élution. Cette procédure convient à un faible débit utilisant des tubes de microcentrifugeuse individuels ou à un débit plus élevé grâce à l’automatisation.

Colonnes et supports de chromatographie Cytiva™ Amersham

Une large gamme de supports de chromatographie Cytiva™ Amersham est disponible pour la purification d’anticorps monoclonaux et polyclonaux provenant de différentes sources.

• Les colonnes GraviTrap™ sont des colonnes préremplies à écoulement par gravité, conçues pour la purification manuelle rapide et efficace d’anticorps monoclonaux et polyclonaux, de fragments d’anticorps issus de surnageants de culture cellulaire et de liquides biologiques.
• Les colonnes SpinTrap™ sont des colonnes à centrifugation préremplies à usage unique, destinées à la purification simple et à petite échelle d’anticorps ou à l’enrichissement de protéines spécifiques.
• Les colonnes HiTrap™ HP sont préremplies de résine Sepharose™ High Performance à la protéine A ou à la protéine G pour la purification préparative de routine d’anticorps monoclonaux et polyclonaux, tels que les IgG humaines. Les colonnes HiTrap™ MabSelect sont préremplies de résine MabSelect, un support de bioprocédé permettant de capturer des anticorps monoclonaux (Mabs) à partir de grands volumes d’échantillons.
• Les plaques filtrantes MultiTrap™ à 96 puits offrent un format rapide et fiable pour la purification à petite échelle d’anticorps ou l’enrichissement de protéines d’intérêt à l’aide de plaques filtrantes préremplies à 96 puits pouvant être soumises à une centrifugation ou à une filtration sous vide, manuellement ou à l’aide de systèmes robotisés automatisés.
• Les colonnes HiScreen™ Capto L sont préremplies de Capto L, une résine de chromatographie d’affinité destinée aux bioprocédés pour la capture d’anticorps et de fragments d’anticorps tels que les fragments Fab, les fragments variables à chaîne unique (scFv) et les anticorps à domaine (Dabs). Les colonnes HiScreen™ Capto L font partie de la plateforme de développement de procédés. Ces colonnes constituent un excellent choix pour l’optimisation des méthodes et le criblage des paramètres.
• Les colonnes HiScreen™ MabSelect™ sont préremplies de résine MabSelect™ et font partie de la plateforme de développement de procédés proposée par Cytiva. La résine MabSelect™ est une résine de bioprocédé destinée à la capture d’anticorps monoclonaux à partir de grands volumes d’échantillons. Ces colonnes constituent un excellent choix pour l’optimisation des méthodes et le criblage des paramètres de capture d’anticorps monoclonaux.
• Les supports Mag Sepharose™ à protéine A et à protéine G sont composés de billes magnétiques à base de Sepharose, conçues pour simplifier l’enrichissement des protéines cibles par immunoprécipitation ou par des applications de « pull-down » ; ils peuvent être utilisés pour la purification et le criblage rapides à petite échelle d’anticorps monoclonaux et polyclonaux à partir de sérum et de surnageants cellulaires.
• GammaBind et GammaBind Plus Sepharose™ sont des résines de chromatographie d’affinité à la protéine G destinées à la purification d’immunoglobulines (IgG) provenant de diverses espèces ; elles sont utilisées pour analyser et purifier les classes, sous-classes et fragments d’immunoglobulines à partir de tout fluide biologique ou milieu de culture cellulaire. Cette résine est particulièrement adaptée aux procédures d’immunoprécipitation.
• Les résines Sepharose™ à protéine A et à protéine G, Sepharose™ Fast Flow, Capto L et MabSelect™ sont également disponibles séparément pour les procédures à grande échelle.