Purification de protéines biotinylées
Les protéines et les anticorps biotinylés sont couramment utilisés dans la recherche fondamentale et la découverte de médicaments. Il existe diverses résines de chromatographie d'affinité, ainsi que des colonnes et des plaques préremplies, permettant de fixer, d'isoler et de purifier les protéines et les anticorps biotinylés.
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Ressources connexes
- Brochure : Optimisation de la préparation des protéines
Des outils pour une meilleure analyse des protéines.
- Purification or Removal of Biotin and Biotinylated Substances
This page shows how to purify or remove biotin and biotinylated substances with Streptavidin Sepharose High Performance from Cytiva.
Perles d'agarose et gels d'affinité
Les billes d’agarose et les gels d’affinité permettent la purification de protéines et d’anticorps biotinylés à l’aide de streptavidine ou d’avidine réticulées sur des billes d’agarose. L’avidine et la streptavidine se lient toutes deux à la biotine avec une forte affinité, bien que l’avidine puisse présenter une forte liaison non spécifique. L’Extravidin®-agarose utilise une avidine modifiée présentant une affinité et une spécificité très élevées pour la biotine. Adaptées à la purification à petite comme à grande échelle, ces résines conviennent à la purification sur colonne par écoulement par gravité, à la centrifugation à faible vitesse en traitement discontinu et aux procédures de chromatographie à basse pression. Les gels d’affinité EZview™ contiennent un colorant rouge qui permet à l’utilisateur de distinguer facilement le culot du surnageant, ce qui réduit les pertes de protéines lors de la purification en batch.
Billes magnétiques
Les billes magnétiques PureProteome™ à la streptavidine offrent un moyen rapide et reproductible de purifier les immunoglobulines à partir de mélanges complexes tels que des échantillons de sérum, de plasma ou de surnageant de culture cellulaire. Les protéines biotinylées et les anticorps biotinylés sont purifiés à l’aide d’un portoir ou d’une plateforme magnétique permettant de séparer les billes des fractions de lavage et d’élution. Ce procédé convient aussi bien à un faible débit, avec des tubes de microcentrifugeuse individuels, qu’à un débit plus élevé, avec des plaques à 96 puits, avec ou sans automatisation. Les particules magnétiques de streptavidine peuvent également être utilisées pour la purification de protéines biotinylées et d’anticorps biotinylés.
Plaques enduites de streptavidine haute capacité SigmaScreen™
Les plaques à haute capacité enduites de streptavidine SigmaScreen™ utilisent une technologie de revêtement exclusive qui offre une capacité de liaison à la biotine nettement supérieure à celle des plaques standard enduites de streptavidine ou d’ExtrAvidin. Avec une capacité de liaison supérieure à 300 pmol/puits (format 96 puits) ou supérieure à 150 pmol/puits (format 384 puits), ces plaques permettent d’éluer la protéine capturée en vue d’une analyse post-capture par diverses méthodes telles que la MALDI, l’ICAT ou la SDS-PAGE. Les plaques SigmaScreen™ à haute capacité enduites de streptavidine sont fabriquées conformément à la norme ISO 9002 dans notre site de production conforme aux BPF et offrent une grande homogénéité d’un puits à l’autre et d’une plaque à l’autre.
Colonnes et résines de chromatographie Cytiva™ Amersham
Une gamme variée de colonnes de chromatographie et de résines de support Cytiva™ Amersham est disponible pour une purification fiable et à haute résolution, à petite ou grande échelle, des protéines et anticorps biotinylés.
- Les colonnes SpinTrap™ sont des colonnes centrifuges préremplies à usage unique, destinées à la purification simple à petite échelle de protéines et d’anticorps biotinylés.
- Les colonnes HiTrap™ HP sont préremplies de résine Streptavidin Sepharose™ High Performance pour la purification préparative de routine des protéines et anticorps biotinylés.
- Les plaques filtrantes MultiTrap™ à 96 puits offrent un format rapide et fiable pour la purification à petite échelle de protéines et d’anticorps biotinylés à l’aide de plaques filtrantes préremplies à 96 puits pouvant être soumises à une centrifugation ou à une filtration sous vide, manuellement ou à l’aide de systèmes robotisés automatisés.
- Les supports Streptavidin Mag Sepharose™ sont composés de billes magnétiques à base de Sepharose™, conçues pour simplifier l’enrichissement des protéines cibles par immunoprécipitation ou par des applications de pull-down ; ils peuvent être utilisés pour la purification et le criblage rapides à petite échelle de protéines et d’anticorps biotinylés à partir de surnageants cellulaires.
- La résine Streptavidin Sepharose™ High Performance est également disponible séparément pour la purification à plus grande échelle.



