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Enzymes utilisées dans l'analyse des médicaments

Enzymes β-glucuronidase et sulfatase pour l'analyse des médicaments

La plupart des médicaments, des hormones et des xénobiotiques sont métabolisés par l'organisme humain et animal en molécules hydrophiles, puis rapidement excrétés dans les fluides corporels, principalement l'urine. Ces médicaments et molécules conjugués le sont principalement avec des glucuronides ou des sulfates (glucuronoconjugués et sulfoconjugués). Chez l'homme, la glucuronidation constitue la principale voie métabolique de phase II. Les conjugués sont difficiles à détecter et à quantifier à l’aide d’instruments chromatographiques, qu’il s’agisse de la chromatographie en phase gazeuse (GC-MS) ou de la chromatographie en phase liquide (LC-MS). L’hydrolyse par la bêta-glucuronidase et/ou la sulfatase rompt les liaisons de conjugaison et ramène les médicaments, les hormones et les xénobiotiques à leur forme libre initiale. Les analytes libérés sont alors facilement « détectables » et mesurables par les instruments de laboratoire utilisés pour le dépistage ou la quantification.  

Les enzymes bêta-glucuronidases sont utilisées dans les secteurs des sciences de la vie et du diagnostic depuis plus de cinq décennies ; elles sont principalement extraites des viscères de différents animaux (Helix pomatia ou Haliotis rufescens) ou de sources bactériennes (E. coli). Depuis 2015, on observe une transition vers les bêta-glucuronidases recombinantes en toxicologie analytique et dans les tests de dépistage urinaire de routine. Grâce à une qualité analytique améliorée, à la facilité de préparation des échantillons, à la réduction du temps d’incubation et à leur aptitude à l’automatisation, nos enzymes bêta-glucuronidases recombinantes (SRE0093, SRE0095) sont de plus en plus utilisées dans de multiples domaines d’application en tant qu’enzymes analytiques. 


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Domaines d'application de la bêta-glucuronidase et des sulfatases en tant qu'enzymes analytiques

Le dépistage urinaire de stupéfiants (UDT) constitue la principale application courante de la bêta-glucuronidase et des sulfatases. Les enzymes utilisées dans le cadre de l’UDT s’appliquent à différents types de tests :

  • Dépistage médico-légal de stupéfiants (justice pénale)
  • Contrôles antidopage chez l'homme (sports de compétition)
  • Contrôles antidopage chez les animaux (courses)
  • Dépistage de drogues en milieu professionnel (nouveaux employés)
  • Dépistage de l'exposition aux xénobiotiques (exposition environnementale)
  • Suivi des médicaments sur ordonnance et des traitements (vérification de l'observance et tests complémentaires)

HYDROLYSE ENZYMATIQUE

Plages de pH optimales pour les enzymes glucuronidases issues de sources courantes

Figure 1.Plages de pH optimales pour diverses enzymes glucuronidases issues de sources courantes.

Une hydrolyse efficace et complète des métabolites glucuronidés et sulfatés est essentielle pour les analyses urinaires de dépistage de stupéfiants, en particulier lorsque la quantification est nécessaire. De nombreuses recherches universitaires menées depuis longtemps ont permis de découvrir dans la nature de nombreuses formes de bêta-glucuronidase et de sulfatase, chacune présentant des propriétés spécifiques. L’un des paramètres ayant le plus d’impact sur l’activité enzymatique est le pH. Pour vous aider dans le choix de vos enzymes, veuillez consulter notre tableau des plages de pH optimales, qui répertorie les valeurs de pH optimales pour diverses enzymes de glucuronidase issues de sources courantes.

Nos sites fabriquent des bêta-glucuronidases natives et recombinantes depuis 1960. Toutes nos bêta-glucuronidases et arylsulfatases sont produites dans le cadre du système de qualité ISO 9001. Nous continuons à consacrer nos efforts à rendre l’hydrolyse plus rapide, plus facile à mettre en œuvre et prête à l’emploi.


Ressources connexes