Anticuerpo anti-mono/di/ trimetil-histona H3 (Lys4), clon AW304, monoclonal de conejo

Las histonas son proteínas muy conservadas que sirven de armazón estructural para la organización del ADN nuclear en cromatina. Las cuatro histonas principales, H2A, H2B, H3 y H4, se reúnen en un octámero (2 moléculas de cada una). Posteriormente, 146 pares de bases de ADN se envuelven alrededor del octámero, formando un nucleosoma, la subunidad básica de la cromatina. Las histonas son modificadas después de la traducción por la acción enzimática tanto en el núcleo como en el citoplasma. Estas modificaciones regulan la transcripción, la reparación, la recombinación y la replicación del ADN. Las modificaciones más comúnmente estudiadas son la acetilación, la fosforilación, la metilación y la ubiquitinación. Estas modificaciones pueden alterar la arquitectura local de la cromatina o reclutar factores de actuación en trans que reconocen modificaciones específicas de la histona (la hipótesis del «código de histonas»). Las modificaciones se producen sobre todo en las colas N-terminal y C-terminal que se extienden más allá de la partícula central del nucleosoma. La metilación de histonas se asocia principalmente con la heterocromatina y el silenciamiento génico.

~17 kDa

Epítopo: Lys4 de la histona H3

Péptido sintético conjugado con KLH que contiene la secuencia …Tme2KQT…, en la que me2K corresponde a dimetil-lisina en el resto 4 de la histona H3 humana.

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

Inmunoprecipitación de la cromatina:
Un laboratorio independiente comunicó que el anticuerpo era adecuado para ChIP.

Análisis mediante inmunotransferencia:
un lote anterior detectó histona H3 metilada en proteínas extraídas con ácido de células HeLa. El anticuerpo no detectó la histona H3 recombinante no metilada (nº de ref. 14-494).

Análisis de inhibición peptídica:
2 μM de un péptido histona H3 que contenía monometil-lisina 4, dimetil lisina 4, y trimetil-lisina 4 abolió la detección de la histona H3 por este lote en el análisis de inmunotransferencia de extractos ácidos de HeLa. Se observó cierta reducción de la señal con histonas H3 que contenían dimetil-lisina 9 o 27.

Análisis de especificidad histona-péptido Beadlyte: se incubaron diluciones 1:1 000-1:2 000 de este lote con histonas H3 que contenían diversas modificaciones conjugadas con microesferas Luminex. Se demostró especificidad por la mono, la di y la trimetil-lisina 4.

Subcategoría investigación
Histonas

Utilización del anticuerpo anti-mono/di/trimetil-histona H3 (Lys4), clon AW304 (anticuerpo monoclonal de conejo), validado en ChIP, WB, PIA, Mplex para detectar la mono/di y trimetil-histona H3 (Lys4), también conocida como H3K4me, histona H3 (metil K4).

La secuencia inmunizante está conservada desde Tetrahymena hasta los seres humanos, por lo que se espera una amplia reactividad cruzada.

Monometil, dimetil y trimetilhistona H3 (Lys4). En algunas muestras se detectan otras bandas no identificadas por encima de 50 kDa

Sobrenadante cultivado en azida sódica al 0,05 %

Estable durante 1 año a 2- 8°C desde la fecha de recepción.
Para obtener la máxima recuperación del producto, centrifugue el vial antes de retirar el tapón. Evite ciclos repetidos de congelación y descongelación que pueden dañar la IgG y afectar al rendimiento del producto.

Control
Extractos nucleares o ácidos de células HeLa.

Evaluada sistemáticamente mediante inmunotransferencia en extractos nucleares de células HeLa.

Análisis mediante inmunotransferencia: una dilución 1:500 (carril 1) y 1:1000 (carril 2) de este lote detectó histona H3 metilada en extractos nucleares de HeLa.

Sustituye a: 05-791

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