Kit de inmunoprecipitación de cromatina EZ-Magna ChIP^® A/G

A diferencia de los protocolos de la ChIP convencional, que pueden ser laboriosos y prolongados, el protocolo del kit de ChIP Magna puede reducir el tiempo necesario para realizar un experimento de ChIP de tres días a uno. Además, el menor volumen de reacción del ChIP Magna aumenta la concentración relativa del anticuerpo, lo que permite realizar la reacción de ChIP con cantidades reducidas de anticuerpo y cromatina fragmentada. Por último, debido a que en este kit se utiliza una mezcla de microesferas de proteína A y proteína G, se puede utilizar una gama de isotipos de anticuerpos más amplia que sólo A o G. Esto permite utilizar una variedad más amplia de anticuerpos y evita la necesidad de comprar kits separados para la inmunoprecipitación basada en proteína A y proteína G. Debido a que en los kits de ChIP Magna se utilizan microesferas paramagnéticas, son compatibles con plataformas automatizadas de alto rendimiento, lo que permite que se se lleven a cabo simultáneamente un gran número de reacciones de ChIP. Características y beneficios:

• El protocolo rápido basado en microesferas magnéticas permite realizar la ChIP en tan solo 1 día
• La mezcla de microesferas de proteínas A+G permite realizar la ChIP utilizando una gama de anticuerpos más amplia que sólo A o G
• Anticuerpos de control negativo y positivo y conjunto de cebadores de control para simplificar la validación del procedimiento experimental.
• Incluye columnas de centrifugación para facilitar la purificación del ADN y hacerla más fiable; no más extracciones fenol-cloroformo
• Kit completo con todos los reactivos necesarios para obtener resultados fiables y reproducibles
• Compatible con los juegos de anticuerpos y cebadores validados por ChIPAb+

La inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) es una técnica importante que permite el análisis in vivo de interacciones de proteínas con ADN genómico. Cualquier proteína asociada a la cromatina o de unión al ADN puede analizarse con esta técnica, siempre que exista un buen anticuerpo frente a la proteína. Se pueden medir diferentes proteínas ubicadas en una región específica del genoma o la distribución genómica amplia de una proteína específica. Otra poderosa aplicación de esta técnica consiste en analizar los cambios en las modificaciones de las histonas que se correlacionan con procesos como la transcripción, la mitosis o la reparación del ADN.

La inmunoprecipitación de cromatina (ChIP) es una técnica potente para cartografiar la distribución in vivo de las proteínas asociadas con el ADN cromosómico. Estas proteínas pueden ser subunidades y modificaciones postraduccionales de histonas u otras proteínas asociadas a la cromatina como factores de transcripción, reguladores de la cromatina, entre otros. Además, la ChIP se puede utilizar para identificar regiones del genoma asociadas con estas proteínas, o por el contrario, para identificar proteínas asociadas con una región concreta del genoma. La metodología de ChIP a menudo implica entrecruzamiento proteína-ADN y proteína-proteína, fragmentación de la cromatina entrecruzada y la subsiguiente inmunoprecipitación de la cromatina con un anticuerpo específico frente a una proteína diana. Los fragmentos de ADN aislados formando complejo con la proteína diana se pueden identificar mediante una variedad de métodos, como la PCR, las micromatrices de ADN y la secuenciación del ADN. Se puede realizar PCR convencional o cuantitativa para verificar si una secuencia concreta de ADN (el gen o la región del genoma) está asociada con la proteína de interés. La combinación de ChIP y micromatrices de mosaico genómico o promotor (ChIP-chip) permite la identificación, con una resolución precisa, de los sitios de unión al ADN en todo el genoma de las proteínas asociadas a la cromatina. Alternativamente, la secuenciación de gran rendimiento de las colecciones construidas a partir de ADN cromosómico inmunoprecipitado (ChIP-Seq) es una alternativa poderosa al ChIP-chip para cartografiar las interacciones proteína-ADN en los genomas de mamíferos.

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

Utilizado para detectar o cuantificar: Proteína A+G

Capacidad del kit: 22 análisis de inmunoprecipitación de cromatina

Dos cajas que contienen todos los reactivos necesarios para realizar 22 reacciones individuales de inmunoprecipitación de cromatina (ChIP). Las disoluciones tampón suministradas son suficientes para generar cromatina a partir de hasta cinco placas de 15 cm de células cultivadas, proporcionando cada placa hasta 10 preparaciones de cromatina (varía según el tipo de célula y de análisis).

Una vez recibidos, guarde los componentes a las temperaturas indicadas en las etiquetas. Los componentes del kit se mantienen estables durante 1 año a partir de la fecha de envío si se guardan según las instrucciones.

Microesferas magnéticas de proteína A/G

Tampón de dilución para ChIP

Tampón de lavado bajo en sal

Tampón de lavado con alto contenido salino

Tampón de lavado LiCl

Tampón TE

Tampón de lisis celular

Tampón de lisis nuclear

Tampón de elución en la ChIP (sin proteinasa K)

Proteinasa K

ARNasa A

X10 Glicina

x10 PBS

Combinación II de inhibidores de proteasas

Anti-ARN polimerasa II, clon CTD4H8

IgG normal de ratón

Cebadores de control

Filtros de centrífuga

Tubos de recogida

Reactivo de unión A

Reactivo de lavado B

Reactivo de elución C

MAGNA CHIP is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

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