Anticuerpo anti-proteína fluorescente verde

La proteína verde fluorescente (GFP) de la medusa Aequorea victoria se utiliza como indicador fluorescente para supervisar la expresión génica en una variedad de sistemas celulares, incluidos organismos vivos y tejidos fijados. A diferencia de otros reporteros bioluminiscentes, la GFP emite fluorescencia en ausencia de sustratos, cofactores u otras proteínas intrínsecas o extrínsecas. La GFP purificada es un monómero de 27 kDa compuesto por 238 aminoácidos y emite luz verde (emisión máxima a 509 nm) cuando es excitada con luz azul o UV.

Varía (la GFP pesa 27 kDa)

GFP nativa muy purificada de Aequorea victoria.

Categoría de investigación
Etiquetas de epítopo y uso general

El anticuerpo anti-proteína fluorescente verde detecta el nivel de proteína fluorescente verde y se ha publicado y validado para utilizar en ELISA, IC y WB.

Inmunotransferencia Western:
se utilizó una dilución 1:500-1:1000 de un lote anterior mediante detección colorimétrica (peroxidasa/TMB), con la mayor dilución posible utilizando métodos de detección más sensibles.

ELISA:
se utilizó una dilución 1:800 - 1:1 000 de un lote anterior en ELISA.

Nota: mientras que el AB3080 se ha adsorbido a proteínas de E. coli, la mayoría de los anticuerpos secundarios no lo han hecho. Para reducir la probabilidad de reactividad con E. coli de un anticuerpo secundario, sugerimos el uso de los anticuerpos secundarios muy purificados de Millipore en sistemas de detección indirecta.

Inmunocitoquímica:

El usuario final debe determinar las diluciones y protocolos de trabajo óptimos.

Subcategoría de investigación
Epítopos de identificación

El AB3080 se producido contra la GFP nativa muy purificada de Aequorea victoria. Es reactivo con GFP de fuentes nativas y recombinantes. Mientras que otros anticuerpos comerciales contra la GFP suelen demostrar una fuerte reactividad con E. coli, el anticuerpo AB3080P contra la GFP se ha purificado por afinidad, seguido de una amplia adsorción contra células enteras de la cepa BL21 de E. coli, lo que les proporciona una reactividad cruzada mínima con E. coli.

No se ha confirmado reactividad con otras especies.

IgG policlonal de conejo purificada por afinidad tampón Tris 10 mM.

Inmunoglobulina de conejo purificada por afinidad

Estable durante 1año a 2°C en alícuotas no diluidas desde la fecha de recepción.

Recomendaciones de manipulación:
Tras su recepción, y antes de quitar la tapa, centrifugue el vial y mezcle suavemente la disolución. Distribúyalo en alícuotas en tubos de microcentrífuga y guárdelo a -20°C.

Control
Células transfectadas con vector de fusión etiquetado con GFP

Células RENCX

Evaluada habitualmente por inmunocitoquímica en células RENCX.

Análisis inmunocitoquímico: Análisis fluorescente confocal de la GFP expresada constitutivamente en células RENCX utilizando este lote de pAB de conejo anti-GFP (rojo). El verde indica la GFP expresada.

Concentración: Para conocer la concentración específica del lote, consulte el certificado de análisis.

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