HEPES

El HEPES, también conocido como ácido 4-(2-hidroxietil)piperazina-1-etano-sulfónico, es un ácido aminosulfónico N-sustituido dipolar amortiguador. Es eficaz en el intervalo de pH 6,8-8,2, con un pKa de 7,48 a 25°C. Reconocido como uno de los mejores amortiguadores de uso general, especialmente en investigación biológica, en biología celular y bioquímica, el HEPES es un amortiguador iónico dipolar y uno de los amortiguadores de Good que no forma complejos significativos con la mayoría de los iones metálicos. Esta propiedad lo hace adecuado como amortiguador no coordinador en disoluciones con iones metálicos.

Muy utilizado en cultivo celular, HEPES destaca en el mantenimiento del pH fisiológico a pesar de las fluctuaciones en la concentración de dióxido de carbono producido por la respiración celular, una característica no tan prominente en los amortiguadores de bicarbonato. Actúa como separador anfolítico para crear gradientes de pH en el enfoque isoeléctrico y exhibe menos interferencia en las reacciones enzimáticas de restricción del ADN en comparación con los amortiguadores que constan de menos grupos amina sustituidos, como el Tris. Más allá de estas aplicaciones, el HEPES puede encontrar aplicación en varios estudios biológicos y bioquímicos, como la inmunoprecipitación, la lisis celular y la obtención de imágenes de células vivas. Su versatilidad lo convierte en una herramienta indispensable en diversas aplicaciones experimentales.

El HEPES se ha descrito como uno de los mejores tampones multiuso disponibles para la investigación biológica. A pH biológico, la molécula es dipolar y es eficaz como amortiguador a un pH de 6,8 a 8,2. El HEPES se ha utilizado en una amplia variedad de aplicaciones, como los cultivos tisulares. Se utiliza habitualmente para amortiguar los medios de cultivo celular en el aire. HEPES encuentra su uso en experimentos in vitro sobre Mg.

HEPES se ha utilizado:

• Como componente en el medio Danieau, que se utiliza para evitar la formación del pigmento melanina después de la gastrulación del embrión del pez cebra
• Como componente de la disolución de Hanks utilizada en los ensayos de degradación del hierro
• Como componente del medio HEPES en la transfección del cultivo celular con plásmidos
• Junto con RPMI-1640, L-glutamina, FBS, piruvato sódico y β-mercaptoetanol para el cultivo de células de insulinoma de rata
• Como suplemento en el medio TCM199 para lavar los ovocitos frescos necesarios para los estudios de transferencia nuclear

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