Sistema mPAGE^® Lux Casting para geles SDS-PAGE

Descubra el mPAGE^® Lux Casting System para geles SDS-PAGE listos para usar en 3 minutos. Geles SDS-PAGE frescos que estarán listos cuando los necesite.

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mPAGE^® Lux Sistema de casting para geles SDS-PAGE

¿Cómo se hace el casting de un gel para SDS-PAGE? El colado de geles suele implicar el vertido de geles de resolución y apilamiento en un proceso paso a paso que requiere mucho tiempo. Tradicionalmente, los investigadores disponen de pocas opciones para satisfacer sus necesidades de colado de geles y electroforesis. Nuestro innovador sistema de colado de geles SDS-PAGE mPAGE^® Lux está diseñado para proporcionar la flexibilidad de los geles colados a mano y la fiabilidad de los geles prefabricados, sin la pérdida de calidad, tiempo o el coste significativamente mayor que acompañan a las opciones alternativas. Geles en menos de tres minutos con nuestro mPAGE^® Lux Casting System. Puede decir adiós a los métodos convencionales y a sus pasos manuales y lentos para la creación de geles. Así de fresco.

Resumen de la sección

• mPAGE^® Características y ventajas del sistema de colado Lux
• ¿Cuáles son los pasos del colado en gel?
• mPAGE^® Lux Casting System y Bis-Tris Reagent Kit
• mPAGE^® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol
• mPAGE^® Lux Bis-Tris Gels with MOPS and MES Running Buffers
• Casting de gel sostenible con mPAGE^® Lux Casting System
• Pida el mPAGE^® Lux Casting System y los reactivos relacionados

mPAGE^® Lux Características y ventajas del sistema de colado

El sistema de colado mPAGE^® Lux sustituye su proceso de colado de gel por métodos más rápidos, sencillos y seguros con resultados más reproducibles. Cure un mini gel en 90 segundos con el mPAGE^® Lux Casting System en comparación con los métodos convencionales que tardan más de 90 minutos. Nuestro flujo de trabajo de colado rápido con irradiación UV acelera el curado de los reactivos Bis-Tris de mPAGE^® Lux, mientras que la química del gel Bis-Tris permite tiempos de ejecución más cortos en comparación con los métodos convencionales.

La fotopolimerización en un solo paso utilizando controles precisos del sistema junto con menos pasos de preparación significa que hay menos posibilidades de error. Nuestro mPAGE^® Caster evita las fugas y el uso de geles Bis-Tris proporciona una calidad de banda superior en comparación con los geles Tris-Glicina fundidos a mano. Además, el kit de reactivos mPAGE^® Lux, el kit de reactivos mPAGE^® TurboMix y los geles mPAGE^® prefabricados utilizan la química Bis-Tris y comparten los mismos tampones y tinciones de gel. Nuestro mPAGE^® Lux Casting System no utiliza APS ni TEMED y ofrece una opción más segura que utiliza menos productos químicos tóxicos.

Para mejorar aún más la compatibilidad y sus necesidades de flujo de trabajo, ahora ofrecemos nuestra mPAGE^® Clip-on Mask. Con la mPAGE^® Clip-on Mask, las placas cortas, las placas espaciadoras y los peines Mini-PROTEAN^® de Bio-Rad, así como las mPAGE^® Mini Short Plates, Spacer Plates and Combs pueden utilizarse al curar un gel utilizando la estación de curado mPAGE^® Lux Curing Station.

Nota: La mPAGE^® Lux Masked Short Plate ya no es necesaria cuando se utiliza la Clip-on Mask, aunque la Masked Short Plate también se puede seguir utilizando.

Flujo de trabajo tradicional de colado manual

Flujo de trabajo tradicional de colado manual

¿Cuáles son los pasos del colado de gel?

El colado de un gel SDS-PAGE a menudo incluye el pesaje, la premezcla de soluciones de gel, el colado y el tiempo de espera para la polimerización. Aunque a menudo se citan como una solución más económica, los métodos convencionales de gel colado a mano consumen mucho tiempo y requieren muchos pasos prácticos que pueden dar lugar a formulaciones de gel inconsistentes. La calidad de los geles colados a mano y los datos que pueden ayudar a generar dependen de la consistencia de la formulación, de modo que los valiosos reactivos y el tiempo no se malgasten con fallos de gel.

El sistema de colado mPAGE^® Lux ofrece una solución innovadora para su proceso de colado en gel. Ya no tendrá que elegir entre ahorrar tiempo o recursos. Nuestro novedoso sistema de colado de geles permite a los investigadores colar fácilmente sus geles rápidamente cuando los necesitan, a una fracción del coste de las tecnologías de geles prefabricados. Mejore la eficiencia de su laboratorio y actualice su flujo de trabajo de electroforesis en gel con el mPAGE^® Lux Casting System.

mPAGE® Lux<< /span/span> Casting System y kits de reactivos Bis-Tris

Añada mPAGE^® Lux Casting System a su laboratorio y disponga de geles listos para usar en menos de 3 minutos. Tómese un respiro y acostúmbrese a un proceso de colado de geles rápido, con menos residuos y sin la preocupación del fracaso. Así de fresco. Nuestros kits del sistema de colado mPAGE^® Lux están compuestos por la estación de polimerización mPAGE^® Lux, el tubo de mezcla mPAGE^® Lux, el colador de gel mPAGE^® Gel Caster, mPAGE^® Comb con 10 pocillos y 15 pocillos, mPAGE^® Mini Spacer Plate, mPAGE^® Lux Masked Short Plates con 10 pocillos y 15 pocillos. Para el sistema mPAGE^® Lux Casting de 0,75 mm de grosor, no se incluyen el peine de 15 pocillos ni las placas cortas enmascaradas. A continuación se incluyen las descripciones y configuraciones de los kits:

Mini Placa Espaciadora mPAGE®.

 mPAGE® Lux SDS-PAGE Gel Cast Protocol

Todas las soluciones deben protegerse de la luz solar para evitar la polimerización. Antes de colar los geles, ponga todas las soluciones a temperatura ambiente.

Gel de resolución

1. Prepare la solución de gel de resolución mezclando la solución de resolución y el diluyente. Consulte la tabla siguiente para conocer los volúmenes de mezcla. La solución de gel de resolución puede prepararse en un lote grande para hacer varios geles secuencialmente.
2. Usando una pipeta limpia, añada la solución de resolución a un tubo de mezcla negro u otro recipiente opaco.
3. Usando una pipeta limpia, añada el diluyente al mismo tubo de mezcla.
4. Mezcle girando suavemente el recipiente de un extremo a otro. No agitar en vórtex.

Volúmenes de solución de gel de resolución

Utilizar los siguientes volúmenes para hacer un solo gel de 1,0 mm. Para volúmenes de solución de 0,75 mm y 1,5 mm, consulte la guía del usuario completa disponible en la página del producto en SigmaAldrich.com.

Gel de Apilamiento

La Solución de Apilamiento está lista para usar directamente de la botella. Utilice 1,5 mL de Stacking Solution para un gel de 1,0 mm. Importante: No diluya Stacking Solution.

Gel Casting

1. Limpie las placas de vidrio con detergente suave y enjuague con agua DI. Límpielas con etanol al 70% antes de usarlas.
2. Monte el Gel Caster mPAGE^® usando la mPAGE^® Spacer Plate y la mPAGE^® Lux Masked Short Plate para formar el casete de vidrio. La placa corta enmascarada debe orientarse con el texto en el lado izquierdo del casete. Asegúrese de que ambas placas de vidrio estén alineadas en la parte inferior del bastidor del cassette antes de cerrar las abrazaderas del cassette. Nota: La placa corta enmascarada mPAGE^® Lux debe utilizarse con la estación de polimerización mPAGE^®.
3. Encienda la estación de polimerización mPAGE^® Lux pulsando el botón de encendido. La estación de polimerización iniciará una autocomprobación. Una vez finalizada la autocomprobación, aparecerá la pantalla de listo.
4. Abra la puerta y coloque el molde de gel en la estación de polimerización, alineando el molde detrás de los topes.
5. Utilizando una pipeta limpia de 5 ml, añada la solución de gel de resolución preparada hasta la línea de llenado indicada en el marco del molde de gel mPAGE^®.
6. Utilizando una pipeta limpia de 5 mL, añada lentamente Stacking Solution hasta la parte superior de la placa corta.
7. Inserte lentamente el peine mPAGE^® en ángulo para evitar la formación de burbujas de aire bajo los dientes. Importante: La mezcla de diferentes formatos de pocillos puede dar lugar a una formación de pocillos inadecuada. Utilice:
   • Peines de 10 pocillos con placas cortas de 10 pocillos mPAGE^® Lux Masked
   • Peines de 15 pocillos con placas cortas de 15 pocillos mPAGE^® Lux Masked Short Plates
8. Limpie el derrame de solución de la parte delantera de la placa corta para evitar un curado incompleto donde exista derrame.
9. Instale la máscara con clip sobre la placa corta y el marco de colado.
10. La parte delantera de la máscara debe quedar bien ajustada contra la placa corta, cubriendo completamente los dientes del peine.
11. Cierre la puerta de la estación de polimerización y seleccione el grosor del gel.
12. Pulse Inicio para comenzar la polimerización del gel. Consejo: Si va a utilizar varios geles, comience el proceso de moldeado con el segundo Gel Caster ahora, mientras el primer gel se está curando.
13. Una vez finalizado el curado, abra la puerta y retire el Gel Caster. Retire el cassette del Gel Caster bajando el clip de tensión para liberar el marco del caster. A continuación, abra los laterales del bastidor y deslice el casete hacia fuera desde la parte superior.
14. Utilice el gel inmediatamente o envuelva el casete en una toalla de papel húmeda y guárdelo en posición horizontal en una bolsa con cremallera u otro recipiente hermético a 2-8 °C durante un máximo de 2 semanas. No deje los casetes sin envolver, ya que el gel se secará.

mPAGE^® Lux Bis-Tris Gels with MOPS and MES Running Buffers

mPAGE^® Lux Bis-Tris Gels están diseñados para trabajar exclusivamente con tampón de corrimiento MOPS o MES. Dependiendo de qué tampón de corrimiento se utilice, se pueden conseguir patrones de separación muy distintos. El tampón MOPS puede utilizarse para ajustar la separación de proteínas grandes y medianas, mientras que el tampón MES proporciona una separación óptima de proteínas más pequeñas. Consulte las tablas de migración (Figura 8) para determinar qué sistema de tampón de gel es el más adecuado para el intervalo de separación previsto.

Cómo retirar el gel después de la electroforesis

Retire el gel del casete de vidrio utilizando un raspador de gel. Corte a lo largo de los bordes del gel (derecha) para evitar que se rompa. Los geles mPAGE^® Lux Bis-Tris SÓLO deben utilizarse con el tampón MOPS-SDS o MES-SDS. Los geles Bis-Tris NO son compatibles con el tampón Tris-Glicina.

Casting de gel sostenible con mPAGE^® Lux Sistema de colado de geles

Para cuantificar el impacto sostenible de nuestro sistema de colado mPAGE^® Lux, se realizaron cálculos comparándolos con el uso de un kit de colado rápido representativo para el colado manual de geles de poliacrilamida para electroforesis de proteínas. Ambos sistemas requieren el uso de kits de colado reutilizables y kits de reactivos de colado manual. El sistema de colado mPAGE^® Lux requiere además el uso de la estación de curado de geles mPAGE^® Lux, mientras que el sistema de referencia requiere el uso de APS & TEMED, que se venden por separado del kit de reactivos de colado manual.

En esta evaluación se tienen en cuenta todos los componentes necesarios para moldear geles de electroforesis durante la vida útil mínima de la estación de curado mPAGE^® Lux, que es de 5 años. Esto incluye la producción, el embalaje, la distribución, el uso y los impactos al final de la vida útil del kit de moldeado manual, los reactivos necesarios y todo el material de laboratorio consumible requerido. Los cálculos se realizaron asumiendo 250, 500 o 1000 geles producidos al año y se reclamó la diferencia mínima respecto al sistema de referencia.

Atributos de sostenibilidad del material y del producto

Aunque se trata de una solución de flujo de trabajo innovadora para el colado manual de geles de poliacrilamida, el sistema de colado mPAGE^® Lux requiere el uso de consumibles de plástico y reactivos peligrosos. Aunque no existe ningún sustituto adecuado para la acrilamida en esta aplicación, todos los riesgos químicos restantes se eliminaron de este sistema y la cantidad de consumibles de plástico necesarios se redujo significativamente con respecto al sistema de referencia.

La masa adicional de la estación de curado de geles requerida por el sistema de colado mPAGE^® Lux se compensa con la reducción de productos necesarios en el flujo de trabajo de colado de geles, como se muestra en el gráfico. A lo largo de la vida útil del instrumento, la masa total del sistema se reduce en al menos un 20 % en comparación con los sistemas de colado rápido.

Masa del sistema a lo largo de la vida útil (kg) para el colado de 500 geles/año:

Además, este producto se adhiere a los principios de SMASH Packaging, nuestra estrategia que impulsa mejoras en la sostenibilidad de los envases a través de menos envases, materiales más sostenibles y un reciclaje más fácil.

• Los envases para productos y elementos adicionales necesarios para una unidad funcional se reducen en un 30% con respecto al sistema de referencia.
• El 100% de los envases basados en fibra del sistema tienen certificación de silvicultura sostenible.
• Todos los insertos de espuma protectora están fabricados con polietileno 100% reciclado.
• Los embalajes no contienen materiales que impidan el reciclaje, tal y como se define en nuestras directrices SMASH.

Distribución del sistema de colada Lux y uso del producto

La reducción de los consumibles necesarios y la eliminación de determinados reactivos se traduce en una disminución significativa de los impactos asociados al transporte. La reducción de masa en los componentes enviados regularmente y el embalaje asociado es de al menos un 24% durante la vida útil mínima del instrumento.

Aunque el instrumento añadido requiere energía durante su funcionamiento, la estación de colada mPAGE^® Lux se diseñó pensando en la eficiencia energética. Al utilizar iluminación LED y una interfaz de usuario sencilla pero intuitiva, el consumo total de energía se mantiene notablemente bajo. El consumo acumulado de energía necesario para polimerizar 1.000 geles es de sólo 1,65 kWh, lo que equivale aproximadamente a 33 horas de uso de un ordenador portátil. La cantidad de residuos plásticos de un solo uso generados a lo largo del flujo de trabajo de moldeado de geles se reduce en al menos un 25 %. Además, los reactivos mPAGE^® Lux se autopolimerizarán cuando se expongan a la luz ambiental, lo que elimina los residuos de acrilamida no polimerizada en los flujos de residuos.

Al moldear geles frescos y listos para usar cuando se necesiten, se elimina el riesgo de preparar previamente geles que quedarán sin usar. El sistema mPAGE^® Lux elimina la necesidad de almacenar kits de reactivos o geles prefabricados en diferentes porcentajes, lo que reduce la cantidad de residuos generados debido a la caducidad de los componentes. La estación de polimerización mPAGE^® Lux es un equipo electrónico y, como tal, debe desecharse de conformidad con todas las normativas aplicables. Para obtener más información sobre la eliminación de residuos electrónicos, visite nuestra página de Cumplimiento de la normativa RAEE.

Este producto ha demostrado mejoras significativas con respecto al sistema de referencia durante todo el ciclo de vida del producto y ha sido designado como Producto Alternativo Más Ecológico. Para obtener más información, visite nuestra página sobre nuestro marco de diseño para la sostenibilidad y nuestros productos alternativos más ecológicos.