Anticorps anti-étiquette histidine, clone HIS.H8

L'étiquette His est une série d'au moins 6 résidus histidine utilisée comme motif d'étiquetage sur l'extrémité C-terminale ou N-terminale des protéines recombinantes. Grâce à sa taille relativement petite par rapport à d'autres solutions couramment employées telles que l'étiquette GST (30 kDa), l'étiquette His est moins susceptible d'interférer avec la structure ou la fonction des protéines cibles. Sa petite taille la rend aussi plus adaptée pour une utilisation en conditions dénaturantes. L'étiquette His est le plus souvent employée dans la purification par affinité et dans les essais de liaison. Cette étiquette se lie aux ions nickel ou cobalt avec une grande affinité ; cette interaction avec des ions métalliques constitue le fondement de nombreux supports d'affinité à base d'étiquette His. L'épitope constitué par l'étiquette His est couramment utilisé pour détecter l'expression des protéines recombinantes dans les systèmes du type bactérie, levure, insecte et mammifère.

Peptide de synthèse constitué de 6 x His.

Domaine de recherche
Étiquettes épitope et usage général

Immunocytochimie :
Une concentration de 2 μg/ml d'un précédent lot de cet anticorps a donné un immunomarquage positif pour la protéine Akt1/PKBα avec étiquette His dans des cellules HeLa transfectées.

Immunoprécipitation :
Un laboratoire indépendant a indiqué que cet anticorps permet d'immunoprécipiter les protéines portant une étiquette His.

L'utilisation de cet anticorps anti-étiquette histidine, clone HIS.H8, a été validée en IC, IP et WB pour la détection de l'étiquette histidine.

Sous-domaine de recherche
Étiquettes épitope

Protéines de liaison à l'ARN (RBP)

Reconnaît la séquence de l'étiquette HHHHHH sur l'extrémité C-terminale ou N-terminale de n'importe quelle protéine de fusion recombinante ; la reconnaissance de l'étiquette 6x-His ne nécessite aucun autre acide aminé autour de la séquence de l'étiquette 6x-His.

Format : Produit purifié

IgG2b monoclonale de souris purifiée dans un tampon contenant du PBS à pH 7,4 avec 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié

Stable pendant 1 an à -20 °C à partir de la date de réception.

Recommandations d'utilisation :
Lors de la première décongélation, et avant retrait du bouchon, centrifuger le flacon et mélanger délicatement la solution. Diviser en aliquotes dans des tubes de microcentrifugation et les stocker à -20 °C. Éviter les congélations/décongélations répétées, qui peuvent détériorer les IgG et nuire aux performances du produit.

Contrôle
Lysats de cellules HeLa transfectées obtenus dans un tampon RIPA.

Produit évalué en routine par western blotting et immunocytochimie sur des cellules HeLa transfectées.

Analyse par western blotting :
Une concentration de 0,5-2 μg/ml de ce lot a permis de détecter la protéine Akt1/PKBα avec étiquette His dans des lysats de cellules HeLa transfectées obtenus dans du tampon RIPA.

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

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