Anticorps anti-histone H3.3 (mutant K27M)

L'histone H3.3 est l'une des cinq principales protéines de type histone impliquées dans la structure de la chromatine dans les cellules eucaryotes. Caractérisée par un domaine principal globulaire et une longue queue N-terminale, l'histone H3.3 détermine la structure en "collier de perles" des nucléosomes. La queue N-terminale de l'histone H3 dépasse de la structure globulaire centrale du nucléosome et peut subir différentes modifications épigénétiques qui affectent les processus cellulaires. Ces modifications incluent la fixation covalente de groupements méthyle ou acétyle sur des acides aminés lysine et arginine et la phosphorylation de la sérine ou de la thréonine. Le variant d'histone H3.3 est typiquement enrichi en chromatine active.

~17 kDa (poids observé)

Peptide linéaire conjugué à de la KLH correspondant à une séquence située à proximité de l'extrémité N-terminale de l'histone H3.3 humaine avec mutation K27M.

Épitope : Séquence de l'histone H3 entourant la mutation K27M

Analyse par western blotting : Un lot représentatif a permis de détecter le mutant K27M de l'histone H3.3 dans des lysats de tissu de gliome infiltrant du tronc cérébral (aussi appelé gliome pontique intrinsèque diffus) exprimant le mutant K27M de l'histone H3.3. (Lewis, P. W., et al. (2013). Science. 340(6134):857-861.

Immunoprécipitation de la chromatine : Un lot représentatif a permis de co-précipiter des fragments de chromatine contenant les régions des promoteurs des gènes ACTA et CCT8 à partir de transfectants HEK293T exprimant l'histone H3.3 portant la mutation K27M et une étiquette FLAG-HA (Peter W. Lewis et David Allis, laboratoire d'épigénétique et de biologie de la chromatine, université Rockefeller, New York, NY).

Domaine de recherche
Épigénétique et fonction nucléaire

L'utilisation de l'anticorps anti-histone H3.3 (mutant K27M) a été validée en western blotting (WB) et immunoprécipitation de la chromatine (ChIP).

Sous-domaine de recherche
Histones

Cet anticorps reconnaît l'histone H3.3 avec mutation K27M.

Anticorps polyclonal de lapin purifié dans un tampon contenant de la Tris-glycine 0,1 M (pH 7,4), du NaCl 150 mM et 0,05 % d'azoture de sodium.

Produit purifié par affinité pour son immunogène

Stable pendant 1 an entre 2 et 8 °C à partir de la date de réception.

Contrôle
Lysats de transfectants MEF exprimant l'histone H3.3 K27M (positifs) ou de type sauvage (négatifs) avec étiquette FLAG-HA.

Produit évalué par western blotting sur du lysat de cellules MEF (H3.3) et MEF (H3.3 K27M-HA-Flag) transfectées.

Analyse par western blotting : Une concentration de 0,2 µg/ml de cet anticorps a permis de détecter l'histone H3.3 avec mutation K27M et étiquette FLAG-HA, mais pas sa forme sauvage, dans 3x10E5 équivalents de cellules d'un lysat de transfectants MEF.

Concentration : La concentration de chaque lot figure sur le certificat d'analyse.

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