Protéine LIF de souris recombinante ESGRO^®

Le LIF (Leukemia Inhibitory Factor, facteur inhibiteur de la leucémie) favorise l′auto-renouvellement et le maintien à long terme des cellules souches embryonnaires (CSE) pluripotentes de souris et des cellules souches pluripotentes induites (CSPi) de souris, en supprimant la différenciation spontanée.

Le complément de milieu ESGRO LIF de souris est fourni sous forme d′unités d′activité/ml pour une performance uniforme d′un lot à un autre. Chaque lot de complément ESGRO fait l′objet d′analyses méticuleuses de contrôle qualité pour garantir l′inhibition fiable de la différenciation des cellules souches pluripotentes de souris. Le complément de milieu ESGRO LIF de souris peut être utilisé pour la culture des cellules souches embryonnaires (CSE) et cellules souches pluripotentes induites (CSPi) de souris, avec ou sans couche de cellules nourricières.

Complément ESGRO LIF (Leukemia Inhibitory Factor, facteur inhibiteur de la leucémie) pour la culture des cellules souches embryonnaires (CSE) de souris Chaque flacon contient 10^6 unités/ml

Les applications du complément ESGRO incluent son utilisation comme réactif pour maintenir le phénotype pluripotent des cellules souches embryonnaires de souris.

PROTOCOLES SUGGÉRÉS :

Cellules souches embryonnaires (CSE) : Dans les cultures de CSE pluripotentes D3 et MBL-1, le complément ESGRO est généralement utilisé à raison de 1000 U par 1,0 ml de milieux de culture cellulaire pour maintenir le phénotype de cellule souche. Des concentrations similaires de mLIF ont également été utilisées pour la transmission dans la lignée germinale des cellules souches embryonnaires génétiquement modifiées (E3).

La concentration recommandée est de 10⁷ unités de complément ESGRO pour 10,0 l de milieux de culture cellulaire et 10⁶ unités de complément ESGRO pour 1,0 l de milieux de culture cellulaire.

Format : purifié

Le complément ESGRO est fourni sous forme liquide à 10⁶ unités dans 1,0 ml de solution tampon phosphate avec 1 % (p/v) d′albumine de sérum bovin (BSA) pour la stabilité.

Le complément ESGRO^® est fourni filtré sur membranes de 0,22 micron et testé négatif pour les mycoplasmes.

Le complément ESGRO est expédié à température ambiante. Une poche de froid peut être incluse pour satisfaire la demande d'un client, mais elle n'est pas réellement nécessaire. Des tests de stabilité exhaustifs ont été réalisés sur le complément ESGRO lors de sa mise au point. Sous sa forme concentrée ou diluée dans un milieu de culture cellulaire, ce produit est stable pendant au moins 18 mois à partir de la date de fabrication, sans perte d'activité sur les cellules souches embryonnaires. Pour le stockage de longue durée, il est recommandé de stocker le complément ESGRO à 4 °C. Les cycles de congélation/décongélation réduisent son efficacité. Il est recommandé de diluer le complément ESGRO dans du milieu de culture cellulaire à la concentration voulue et de le diviser en aliquotes, puis de le conserver à 4 °C. La congélation/décongélation doit être évitée. Ce produit est stable pendant un minimum de 7 jours dans un incubateur à 5 % CO2 et à 37 °C lors de la culture des CSE.

Activité spécifique: Le complément ESGRO^® est évalué sur des cellules souches embryonnaires de souris (D3 et MBL-1) et sur des cellules de leucémie myéloïde de souris M1 (4) Un standard de 50 unités est défini comme la concentration de complément ESGRO dans 1,0 ml de milieu de culture cellulaire qui induit la différenciation de 50 % des colonies de M1 (4). 10⁶ unités sont équivalentes à environ 10 μg de protéine pure et sont suffisantes pour traiter 1 l de milieu de culture pour CSE.

Essai sur cellules souches embryonnaires : Inhibition de la différenciation à 1000 unités/ml ; Essai sur cellules de leucémie myéloïde de souris M1 : Activité spécifique ≥ 10⁸ unités/mg

CHEMICON is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany

ESGRO is a registered trademark of Merck KGaA, Darmstadt, Germany