Anti-β-Actin (ACTB) Antibody

Dans la coloration de cryosections ultra-minces de gésiers de poulet, l′anticorps marque les corps denses et les faisceaux longitudinaux reliant les corps denses successifs, comportant également la desmine et la plaque dense associée à la membrane. Il ne marque pas les muscles cardiaques et squelettiques adultes, sauf en cas de contamination de l′échantillon par des cellules non musculaires ou lorsque du tissu embryonnaire est utilisé.

L'anticorps monoclonal anti-β-actine (isotype IgG1 de souris) provient de l'hybridome AC-15 produit par la fusion de cellules de myélome de souris et de splénocytes d'une souris immunisée. L'actine est l'une des protéines les mieux conservées chez les eucaryotes ; elle est exprimée sous au moins six isoformes différentes chez les mammifères et les oiseaux. Quatre de ces isoformes sont les marqueurs de différenciation des tissus musculaires ; deux sont présentes dans la quasi-totalité des cellules. Il existe trois α-actines (α-actines des muscles squelettique, cardiaque et lisse), une β-actine (β-actine non musculaire) et deux γ-actines (γ-actine du muscle lisse et γ-actine non musculaire). Les isoformes de l'actine présentent une homologie de séquence globale supérieure à 90 %, mais l'homologie n'est que de 50 % à 60 % au niveau des 18 résidus NH2 terminaux. La région NH2 terminale de l'actine semble constituer une région antigénique importante et pourrait jouer un rôle dans les interactions entre l'actine et d'autres protéines, comme la myosine. Cet anticorps peut être utilisé pour marquer des cryocoupes fixées à l'acétone ou des préparations pour microscopie électronique ainsi que dans des expériences de micro-injection. Une solution de Bouin, de B5, d'éthanol ou de méthacam peut être utilisée comme fixateur. L'épitope reconnu par l'anticorps est résistant à la fixation au formol et à l'inclusion en paraffine.

Peptide N-terminal de β-actine cytoplasmique légèrement modifié, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugué à la KLH.

Cet anticorps monoclonal anti-β-actine produit chez la souris a également été utilisé :

• en immunofluorescence
• dans des tests d'immunoblotting
• en immunohistochimie
• comme témoin pour des puces à protéines

L′anticorps monoclonal anti-actine de souris a été utilisé comme contrôle de charge pour l′analyse par western blot de lysats de protéines du foie.

L′anticorps monoclonal anti-actine de souris a été utilisé comme contrôle de charge pour l′analyse par western blot de protéines immunoprécipitées à partir de co-cultures de ganglion spinal de rat.

L'actine et la myosine se retrouvent dans de nombreux types de cellules et sont impliquées dans un vaste éventail de processus cellulaires comme la locomotion, la cytocinèse, la cyclose, la sécrétion et la phagocytose. Les propriétés immunologiques et physiques de l'actine restent remarquablement constantes dans les cellules de diverses espèces et tissus d'origine.

L'anticorps monoclonal anti-β-actine reconnaît un épitope situé dans la partie N-terminale de l'isoforme β de l'actine. Cet anticorps permet de marquer spécifiquement la β-actine dans une grande variété de tissus et d'espèces par immunoblotting (42 kDa), coloration immunofluorescente de lignées cellulaires en culture et immunohistochimie.

Fourni sous forme de liquide d′ascite avec azoture de sodium à 15 mM comme agent de conservation.

Pour consulter notre guide de sélection d'anticorps anti-actine, rendez-vous sur www.sigmaaldrich.com/actin.

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