Albumines et protéines de transport
De nombreuses molécules sont instables ou insolubles lorsqu’elles se présentent sous forme non complexée. In vitro, les albumines et autres protéines de transport sont souvent utilisées pour lier, séquestrer et stabiliser toute une gamme de petites molécules et de protéines importantes. Les albumines sont des protéines simples et hydrosolubles présentes dans les fluides et les tissus animaux, et dans une moindre mesure chez les plantes. Elles sont utilisées dans la production biologique d’anticorps monoclonaux thérapeutiques et de protéines recombinantes.
Nous proposons des albumines répondant à un large éventail de besoins, notamment la culture cellulaire, la quantification des protéines, la stabilisation des enzymes, les tests ELISA et les procédés liés aux anticorps. Outre des albumines issues de diverses sources, nous proposons ces protéines essentielles sous différents formats et formulations.
Produits
Products
Les albumines en culture cellulaire
Les albumines, en particulier celles issues du sérum bovin (BSA), constituent un composant important de nombreux systèmes de culture cellulaire sans sérum, notamment ceux qui utilisent des cellules d'hybridomes ou des cellules d'ovaires de hamster chinois (CHO). Dans les milieux de culture cellulaire, l'albumine agit en se liant à d'autres molécules essentielles et en les acheminant vers les cellules en culture. Étant donné que toutes les albumines n'ont pas la même efficacité dans les milieux de culture, il est conseillé de choisir celles qui ont été testées pour des applications en culture cellulaire.
L'albumine sérique bovine (BSA) est une protéine globulaire (masse moléculaire d'environ 66 kDa) utilisée dans de nombreuses applications biochimiques en raison de sa stabilité et de son absence d'interférence avec les réactions biologiques. La structure de la BSA est constituée d'une seule chaîne polypeptidique composée d'environ 583 résidus d'acides aminés et ne contenant aucun glucide. Pour en savoir plus sur la structure de la protéine BSA, sa masse moléculaire, ses propriétés et ses applications, consultez notre guide sur les propriétés physiques et les applications de la BSA.
La BSA est le produit phare par excellence parmi les albumines utilisées dans de nombreuses applications. Notre gamme variée de formats d’albumine de sérum bovin propose des degrés de pureté allant de 95 à 99 %. Nous fabriquons et distribuons de la BSA purifiée à l’aide de diverses méthodes primaires, notamment la méthode de fractionnement de Cohn, des méthodes modifiées de fractionnement à l’éthanol, le choc thermique et la chromatographie. Des étapes de purification supplémentaires peuvent inclure la cristallisation ou la filtration sur charbon. Pour plus de commodité, nos BSA sont classées selon leur méthode de préparation :
- La purification chromatographique de l'albumine permet généralement d'obtenir une conformation protéique native mieux préservée que les méthodes de fractionnement par l'éthanol et par choc thermique.
- La méthode combinant l'éthanol et le choc thermique associe ces deux procédés : elle utilise le fractionnement de Cohn pour effectuer la purification initiale, suivie d'une étape thermique visant à purifier davantage l'albumine jusqu'à un taux ≥ 99 % par électrophorèse sur agarose.
- Le fractionnement à l’éthanol est une méthode qui implique le réglage de la concentration en éthanol, du pH et de la température. Contrairement à la méthode par choc thermique, ce procédé est réalisé à basse température, ce qui garantit des conditions non dénaturantes pour les protéines et préserve la structure et la fonction natives de l’albumine.
- Le procédé de fractionnement par choc thermique, qui implique un ajustement de la température et du pH, repose sur l’ajout d’un stabilisateur de protéines. Cet ajout permet à l’albumine de tolérer une température supérieure à 65 °C. La plupart des autres protéines plasmatiques se dénaturent et précipitent au cours de ce processus, ce qui permet d’obtenir une albumine d’une pureté accrue.
Albumine sérique humaine (HSA)
L’albumine sérique humaine (HSA) est la protéine la plus abondante dans le plasma humain, avec un poids moléculaire d’environ 66 kDa (d’après sa composition en acides aminés). L’albumine sérique peut être désignée sous le nom de « fraction V de Cohn ». Cette convention de dénomination provient de la méthode originale de Cohn de fractionnement des protéines sériques par précipitation à l’éthanol froid, l’albumine sérique ayant été identifiée dans la cinquième fraction d’éthanol obtenue par cette méthode. Depuis lors, le terme « fraction V de Cohn » est utilisé par certains pour désigner l’albumine sérique, quelle que soit la méthode de préparation. Nous produisons des albumines sériques humaines à l’aide d’un procédé de fractionnement à l’alcool froid dérivé de la méthode traditionnelle de Cohn, ainsi que par la méthode du choc thermique, et proposons des versions natives et recombinantes de l’HSA sous forme de poudre et de solution.
Autres produits à base d’albumine
Notre gamme comprend d’autres produits à base d’albumine destinés à des applications spécifiques nécessitant des protéines humaines ou d’autres protéines non bovines. Les albumines humaines recombinantes et l’albumine sans composants d’origine animale (ACF) sont fournies sous forme de tampons aqueux ou de poudre lyophilisée. Les albumines issues d’autres espèces disponibles proviennent notamment des sources suivantes :
- blanc d’œuf de poule
- sérum de souris
- sérum de rat
- sérum porcin
- sérum ovin
Nos albumines présentent une grande pureté et une solubilité supérieure afin de garantir un faible bruit de fond dans les dosages de quantification des protéines et de minimiser les interférences dans les bioprocédés.
Transférines et substituts de transférine
Les cellules ont besoin de fer pour fixer l’oxygène disponible dans l’environnement extracellulaire. Les transferrines sont des glycoprotéines à chaîne unique présentes dans le sérum qui facilitent l’absorption du fer dans le milieu de culture et son transport intracellulaire ultérieur. Bien que la transferrine constitue la méthode physiologiquement optimale pour acheminer le fer vers les cellules en culture et qu’elle ait donc joué un rôle essentiel dans la production de produits biopharmaceutiques tels que les anticorps monoclonaux, l’émergence de systèmes sans origine animale présentant moins de risques a conduit à l’adoption, dans une certaine mesure, de petites molécules comme alternatives à la transferrine dans la fabrication de produits biologiques. Bon nombre de ces alternatives à la transferrine sont des chélateurs de fer, qui doivent être utilisés selon des protocoles adaptés dans les systèmes de culture, car beaucoup d’entre eux ne permettent pas de gérer le cycle redox du fer et peuvent donc contribuer au stress oxydatif. Notre gamme de réactifs pour la culture cellulaire comprend une sélection complète de transferrines et de substituts de la transferrine.
Ressources connexes
- Albumin in Cell Culture
Explore serum albumin's role in serum-free cell culture systems for biomanufacturing.