El anticuerpo anti-histona H4 (citrulina 3)

La histona H4 (UniProt P62805; también conocida como miembro A de la familia de histonas H4, Histona 1 H4a) está codificada por el gen HIST1H4A (también conocido como H4/A, H4FA) (ID del gen 8359) en humanos. La histona H4 es una de las principales proteínas histonas que contribuyen a la estructura de la cromatina en las células procariotas y eucariotas. La histona H4 puede experimentar varios tipos diferentes de modificaciones epigenéticas que influyen en los procesos celulares, como la metilación y la acetilación en restos de lisina y arginina, la fosforilación en restos de serina y treonina, así como la conversión de Arg3 en un resto de citrulina mediante reacción de desiminización catalizada por la peptidilarginina desiminasa PAD4, también conocida como citrulinación). La citrulinación de la Arg3 de la histona H4 (H4Cit3) debilita la interacción histona-ADN como consecuencia de un cambio conformacional y una reducción de la carga positiva en el extremo N terminal de la histona H4. Se sabe que la infección bacteriana estimula la H4Cit3 en los neutrófilos, formando una estructura NET (trampa extracelular de neutrófilos) de cromatina extracelular muy descondensada que podría capturar y matar los microorganismos. Por otro lado, las proteínas citrulinadas se reconocen como proteínas no propias y por consiguiente activan el sistema inmunitario. Se ha demostrado que un haplotipo funcional del gen PADI4 está asociado con la patogenia de la artritis reumatoide a través de la inducción de la antigenicidad de las proteínas. La H4Cit3 se induce en respuesta al daño del ADN a través de la vía p53-PADI4, lo que se traduce en un aumento de la inmunorreactividad H4Cit3 localizada alrededor de núcleos fragmentados en las células apoptóticas. Además, se observa una correlación negativa del nivel de H4Cit3 con la expresión de la proteína p53 y el tamaño del tumor en los tejidos de cáncer pulmonar no microcítico (NSCLC), lo que indica un papel crucial de la H4Cit3 en la carcinogénesis.

~12 kDa observados. 11,24/11,37 kDa (H4 con/sin eliminación de Met1) calculado. En algunos lisados pueden observarse bandas no caracterizadas.

Epítopo: N-terminal

Péptido sintético conjugado con KLH que corresponde a los aminoácidos 1-10 (SG[cit]GKGKGL-C) de la histona H4 humana (eliminada la Met1), donde [cit] indica la Arg3 citrulinada. Se añadió una cisteína C-terminal con fines de conjugación.

Categoría de investigación
Epigenética y función nuclear

El anticuerpo anti-histona H4 (citrulina 3), Nº de ref. 07-596, es un anticuerpo policlonal de conejo muy específico dirigido contra la citrulinación de la histona H4 (H4Cit3) y se ha probado en inmunoprecipitación de cromatina (ChIP), inmunocitoquímica, inmunohistoquímica e inmunoelectrotransferencia (Western Blotting).

Subcategoría investigación
Histonas

Este anticuerpo policlonal de conejo detectó la citrulinación de la Arg3 catalizada por PAD4 de las histonas recombinantes H4 y H2A, así como la citrulinación de la Arg3 de la histona H4 (H4Cit3) inducida por ionóforo de calcio en células HL-60. La atenuación de la PAD4 (peptidil arginina desiminasa 4) celular disminuyó en gran medida la H4Cit3 inducida por ionóforo, mientras que el bloqueo de los anticuerpos con el péptido inmunógeno evitó la detección de la banda buscada(Tanikawa, C., et al. (2012). Nat. Commun. 3:676; Wang, Y., et al. (2004). Science. 306(5694):279-283).

Se prevé que reaccione con una amplia gama de especies debido a la homología de secuencia del 100 %.

Anticuerpo policlonal de conejo purificado en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 %.

Purificada por afinidad

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado celular HL-60.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (western blot): una dilución 1:1.000 de este anticuerpo detectó la citrulinación (H4Cit3) de la Arg3 en la histona H4 inducida por diferenciación en 10 µg de lisado de células HL-60 tratadas con ionóforo de calcio.

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

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