Anticuerpo anti-acetil-alfa tubulina, clon 6-11B-1

Los microtúbulos son filamentos citoesqueléticos compuestos por heterodímeros de alfa y beta-tubulina que se autoensamblan de cabeza a cola para formar protofilamentos y lateralmente para formar un tubo hueco. Varias modificaciones postraduccionales (PTM), como acetilación, poliglutamilación, poliglicilación, detirosinación, fosforilación y palmitoilación, pueden regular las propiedades de polimerización de las tubulinas o sus interacciones con las proteínas asociadas a los microtúbulos (MAP) y las proteínas motrices. Se sabe que un subconjunto de microtúbulos citoplásmicos y microtúbulos del huso, el axón y los cilios contiene alfa-tubulina acetilada a través del grupo epsilon-amino de la Lisina-40 (K40). El miembro MEC-17 de la familia de lisina acetiltransferasa GNAT (o alfa-tubulina acetiltransferasa/alfaTAT) cataliza la acetilación K40, mientras que se sabe que HDAC6 y sirtuina2 (SIRT2) catalizan la desacetilación de la tubulina. Las evidencias experimentales indican que la acetilación K40 prepara la alfa-tubulina para más modificaciones postraduccionales, que no se pueden revertir mediante la desacetilación ulterior de K40ac. Posteriormente, la alfa-tubulina acetilada y desacetilada en microtúbulos nativos son estructuralmente diferentes de la alfa-tubulina no acetilada (su K40 no ha estado nunca antes acetilada).

~50 kDa observados

Fracción dineína 15 S del axonema de esperma de erizo de mar.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): 4,0 µg/ml de un lote representativo detectaron la acetil-alfa tubulina en 10 µg de lisado de tejido cerebral de ratón.
Análisis inmunocitoquímico: un lote representativo detectó alfa-tubulina acetilada en células epiteliales renales humanas sanas cultivadas (cortesía del Dr. Christopher Ward, University of Kansas Medical Center).
Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (WB): un lote representativo detectó alfa-tubulina en lisados de axonema de esperma de erizo de mar, pero no en lisados de microtúbulos estabilizados con taxol de huevos de erizo de mar (Piperno, G., y Fuller, M. (1985). J Cell Biol.101(6):2085-2094).
Análisis mediante inmunotransferencia por puntos: un lote representativo detectó alfa-tubulina en las fracciones soluble e insoluble en detergente iónico Sarkosyl de extractos de axonema de esperma de erizo de mar (Piperno, G., y Fuller, M. (1985). J Cell Biol.101(6):2085-2094).
Análisis mediante inmunocitoquímica: un lote representativo detectó alfa-tubulina acetilada y desacetilada, pero no no-acetilada en fibroblastos renales de mono verde COS-7 y células epiteliales PtK2 de rata canguro mediante inmunocitoquímica fluorescente (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).
Análisis mediante microscopia electrónica: se ha demostrado que el fragmento Fab del clon 6-1 tiñe los microtúbulos estabilizados con Taxol polimerizados in vitro a partir de tubulina cerebral bovina purificada con o sin desacetilación catalizada por SIRT2 (Soppina V., et al. (2012). PLoS One. 7(10):e48204).

Categoría de investigación
Estructura celular

Este anticuerpo anti-acetil-alfa tubulina, clon 6-11B-1, está validado para utilizar en Western Blotting, inmunocitoquímica, inmunotransferencia por puntos y microscopia electrónica para la detección de acetil-alfa tubulina.

Subcategoría de investigación
Adherencia (CAM)

Las evidencias experimentales indican que la α-tubulina acetilada y la desacetilada en microtúbulos nativos son estructuralmente distintas de la α-tubulina no acetilada , y que el clon 6-11B-1 reconoce la α-tubulina acetilada y desacetilada, pero no la α-tubulina no acetilada (nunca acetilada) . Mientras que el patrón de inmunotinción de 6-11B-1 se asemeja al de los anticuerpos anti-acetil-Lys40 en células de ciclo normal, debe prestarse especial atención al interpretar los resultados de la inmunotinción cuando se utiliza este AcM en células sometidas a manipulación de desacetilación de tubulina por expresión exógena de desacetilasa o por medios químicos.

IgG2bκ monoclonal de ratón purificada en tampón que contiene Tris-glicina 0,1 M (pH 7,4), NaCl 150 mM con azida sódica al 0,05 %.

Presentación: Purificada

Proteína G purificada

Estable durante 1 año a 2-8°C desde la fecha de recepción.

Evaluada mediante inmunotransferencia Western en lisado de células HeLa.

Análisis mediante inmunoelectrotransferencia (western blot): 4,0 µg/ml de este anticuerpo detectaron la acetil-alfa tubulina en 10 µg de lisado de células HeLa.

Concentración: Consulte la ficha técnica específica del lote.

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