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Acerca de este artículo
UNSPSC Code:
41106618
NACRES:
NA.54
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sufficient for 40 reactions (DNA ligation)
manufacturer/tradename
Roche
storage temp.
−20°C
Quality Level
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Other Notes
El nuevo kit Rapid DNA Dephos y ligadura contiene todos los reactivos del kit de ligadura Rapid del ADN además de nuestra nueva fosfatasa alcalina Rapid.
Packaging
1 kit que contiene 3 componentes.
Application
El kit de ligadura de ADN Rapid une covalentemente fragmentos de ADN de extremo escalonado o fragmentos de extremo romo, por ejemplo, para:
- Clonación en vectores plásmidos o fagos.
- Adición de conectores a plásmidos u otros ADN.
- Recircularización del ADN lineal.
Biochem/physiol Actions
ADN con extremos romos o cohesivos (≤200 ng).
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Inactivación por calor: 10 min a 65 °C (lipasa T4)
La inactivación de la ligasa T4 solo es necesaria si la mezcla de reacción de ligadura va a utilizarse en experimentos distintos de los ensayos de transformación.
Nota: La inactivación por calor de la mezcla de reacción de ligadura antes de la transformación hace que el número de colonias transformadas disminuya de manera notable (> factor de 20).
Actividad estrella: También debe evitarse la actividad estrella. Cuando vaya a realizar digestiones dobles con enzimas propensas a actividad estrella, consulte el póster de enzimas de restricción de Roche (o el catálogo de ciencias aplicadas de Roche) para seleccionar el tampón óptimo para una combinación de enzimas dada. Siempre que sea posible, utilice el tampón H para digestiones dobles.
Features and Benefits
- Rápido: la ligadura tarda solo 5 minutos.
- Cómodo: la ligadura se realiza entre +15°C y +25°C.
- Fácil: el kit contiene todos los tampones y enzimas necesarios.
- Flexible: el kit puede utilizarse para todas las reacciones de ligadura habituales.
- Fiable: procedimiento sencillo y reactivos listos para usar que garantizan exactitud y reproducibilidad.
General description
El kit de ligadura de ADN Rapid contiene todos los reactivos necesarios para la ligadura. No se requieren otros reactivos ni aditivos. El kit puede ligar rápidamente el ADN con extremos romos o cohesivos entre +15 y +25°C. Dependiendo de la concentración de ADN en la reacción, los productos de la ligadura serán circulares (si la concentración de ADN es baja) o concatémeros (si la concentración de ADN es alta). El ADN ligado es adecuado para uso directo en experimentos de transformación.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Nota: La electroporación puede realizarse después de la ligadura en combinación con el kit de purificación de productos de PCR de High Pure®.
Preparation Note
Tiempo de incubación: 5 minutos
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Proporción molar del ADN que se va a ligar: La proporción molar de ADN vector a ADN insertado en la reacción de ligadura convencional es normalmente de 1:3. Sin embargo, cuando sea apropiado, usted puede usar otras proporciones. Por ejemplo:
Si los dos ADN difieren mucho en longitud, pruebe una relación de 1:1 o 1:2
Si los extremos de los dos ADN son romos, pruebe con una proporción de 1:5
Legal Information
High Pure is a registered trademark of Roche
Clase de almacenamiento
12 - Non Combustible Liquids
wgk
WGK 1
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does not flash
flash_point_c
does not flash
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