Anti-β-Actin (ACTB) Antibody

El anticuerpo anti-β-actina producido en el ratón se ha utilizado también:

• en análisis de inmunofluorescencia
• en inmunotransferencia
• en inmunohistoquímica
• como control para micromatrices de proteínas

El anticuerpo monoclonal anti-actina de ratón se utilizó como control de carga para el análisis mediante inmunoelectrotransferencia de las proteínas inmunoprecipitadas de cocultivos de los ganglios radiculares dorsales de rata.

La anti-actina monoclonal de ratón se utilizó como un control de carga para el análisis mediante transferencia Western de lisados proteicos de hígado de rata.

El anticuerpo monoclonal anti-β-actina reconoce un epítopo localizado en el extremo N-terminal de la isoforma β de la actina. El anticuerpo permite etiquetar específicamente la β-actina en una amplia variedad de tejidos y especies utilizando inmunotransferencia (42 kDa), tinción inmunofluorescente de líneas celulares cultivadas e inmunohistoquímica.

La actina y la miosina son constituyentes de muchos tipos de células e intervienen en una miríada de procesos celulares, como la locomoción, la citocinesis, la transmisión citoplásmica, la secreción y la fagocitosis. La actina de células de distintas especies y origen tisular es muy similar en sus propiedades físicas e inmunológicas.

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El anti-β-actina monoclonal (isotipo IgG1 de ratón) se obtiene del hibridoma AC-15 producido por la fusión de células de mieloma de ratón y esplenocitos de un ratón inmunizado. La actina es una de las proteínas eucariotas más conservadas, se expresa en mamíferos y aves como mínimo en seis isoformas. Cuatro de ellas representan los marcadores de diferenciación del tejido muscular y dos se encuentran prácticamente en todas las células. Hay tres α-actinas (músculo α-esquelético, α-cardiaco y α-liso), una β-actina (β-no muscular) y dos γ-actinas (γ-músculo liso y γ-no muscular). Las isoformas de la actina muestran >90 % de homología de secuencia global, pero sólo un 50−60 % de homología en sus 18 restos NH2-terminales. La región NH2 terminal de la actina parece una importante región antigénica y puede intervenir en la interacción de la actina con otras proteínas como la miosina. El anticuerpo puede utilizarse para tinción de cortes congelados fijados con acetona, preparaciones para microscopia electrónica y experimentos de microinyección. Pueden utilizarse como fijadores las disoluciones B5, etanol, metacam o Bouin. El epítopo reconocido por el anticuerpo es resistente a la fijación con formol y la inclusión en parafina.

En la tinción de criosecciones tisulares ultrafinas de molleja de pollo, el anticuerpo marca los cuerpos densos y los canales longitudinales que unen cuerpos densos consecutivos que también están ocupados por desmina y la placa densa asociada a la membrana. No tiñe los músculos cardiaco y esquelético adultos excepto las trazas debidas a la contaminación de la muestra con células no musculares o si se está utilizando tejido embrionario.

péptido N-terminal de la actina β-citoplasmática ligeramente modificado, Ac-Asp-Asp-Asp-Ile-Ala-Ala-Leu-Val-Ile-Asp-Asn-Gly-Ser-Gly-Lys, conjugado con KLH.

Para ver una guía de selección de anticuerpos anti-actina, visite www.sigmaaldrich.com/actin.

Suministrados como líquido ascítico con azida sódica 15 mM como conservante.